Saskaņā ar centrālo dogmu, messenger RNS (mRNS) ir tilts ģenētiskā materiāla pārnešanai no DNS uz olbaltumvielām.
mRNS spēlē bioloģisku lomu, kodē proteīnus in vivo, un nobriedušā mRNS eikariotu organismos sastāv no piecām sastāvdaļām: 5' vāciņa (vāciņa struktūra), 5' UTR (nekodējošais reģions), ORF (atvērtais lasīšanas rāmis), 3' UTR. , un 3' poliA aste (poliadenilāta aste).
Informācija par pakalpojumiem
| Process | Izvēles pakalpojums | Informācija par pakalpojumu | Piegādes periods (diena) |
| mRNS sekvences projektēšana un optimizācija | Kodēšanas secību projektēšana un optimizācija | CDS secības izlīdzināšana CDS kodona optimizācija | 1 |
| Nekodējošo secību projektēšana un optimizācija | 5' UTR sekvences projektēšana un optimizācija 3' UTR sekvences projektēšana un optimizācija polyA secību projektēšana un optimizācija | 1-2 |
Pielāgojamas opcijas
| 5' UTR/3' UTR | - Dabas UTR secība
- Mutants/inženierizēta UTR secība
|
| 3' PolyA Tail | - 100A ~ 120A aste (ieteicams)
- Segmentēta poliA aste
- Cita Pielāgota aste
|
Kopējās mRNS sekvences izstrādes stratēģijas
| mRNS komponenti | Bioloģiskās funkcijas | Optimizācijas stratēģijas |
| 5' Cap | Aizsargājiet mRNS no eksonukleāžu izraisītas degradācijas un rīkojieties saskaņoti ar poliA asti 3' galā, poliA saistošo proteīnu un translācijas iniciācijas faktora proteīnu, lai uzsāktu proteīna translāciju. | Dabiskā Cap1 struktūra izvairās no modeļa atpazīšanas receptoriem un tādējādi samazina dabisko imūnreakciju, ko var panākt ar vienpakāpes līdztranskripcijas ierobežošanu vai divpakāpju enzīmu ierobežošanu [sīkāku informāciju skatiet sadaļā mRNS enzīmu ierobežošana un līdztranskripcijas ierobežošana]. |
| 5' UTR | 5' UTR var atpazīt ar ribosomām, regulēt mRNS translāciju un ietekmēt mRNS stabilitāti. | Satur Kozaka sekvences bez ļoti stabilas sekundārās struktūras. In vitro transkripcijas (IVT) mRNS, piemēram, α-globīnam un β-globīnam, priekšroka tiek dota ļoti izteiktu gēnu dabiskajiem UTR. |
| CDS | Proteīnus kodējošie reģioni un antigēnu, antivielu vai citu funkcionālu proteīnu kodēšanas sekvences. | Kodonu optimizācija paaugstina translācijas līmeni, atzīmējot, ka dažiem neoptimāliem kodoniem var būt nozīme olbaltumvielu locīšanas procesā. |
| 3' UTR | Regulē mRNS translāciju un stabilitāti. | Augsti izteiktu gēnu dabiskajiem UTR ir priekšroka IVT mRNS, piemēram, α-globīnam un β-globīnam. |
| 3' poliA aste | Regulē olbaltumvielu ekspresiju un aizsargā vāciņu struktūru no degradācijas. | Nepieciešams atbilstošs garums (100-150 bp); kodē poliA asti transkripcijas šablona plazmidā, nodrošina precīzāku poliA astes garumu. |
Mūsu funkcijas
- Daudzveidīga UTR avota izvēle
Vairāki augsti izteiktu dabisko un modificēto UTR bibliotēku avoti; nobriedusi UTR modifikācijas stratēģija;
- Moderna CDS optimizācijas komanda
Sadarbojieties ar profesionālu AI algoritmu komandu, lai pabeigtu kodonu optimizāciju.
- Vienmērīgs polyA astes sadalījums
Pievienojiet poliA sekvences atbilstoši DNS veidnēm, lai precīzāk kontrolētu mRNS garumu.
- Daudzveidīgas optimizācijas kombinācijas
Panākt efektīvu mRNS ekspresiju ar zemu imunogenitāti.
Gadījuma izpēte
Divu ziņotāju mRNS secības dizains: mCherry-eGFP mRNS
Yaohai Bio-Pharma mRNS pakalpojums turpina uzlaboties, izstrādājot un optimizējot dubultā reportiera gēnu tandēma secību, kas nodrošina divu gēnu līdzekspresiju.
Izmantojot parasto transfekcijas reaģentu, dubultā gēna tandēma secība mCherry-eGFP mRNS tiek transficēta 293T šūnās, un pēc 48 stundām tiek atklāti divi mCherry (sarkanā) un uzlabotā zaļā fluorescējošā proteīna (eGFP) fluorescējošie signāli ar vienlaicīgu ekspresiju, un stacked. grafiks ir iezīmēts dzeltenā krāsā.
mCherry-eGFP mRNS ekspresija 293T šūnā
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NĒ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
