MRNS potences testa nozīme
Strauji attīstoties mRNS vakcīnām un terapijai, ir nepieciešams īpašs analīzes metožu panelis, lai pārbaudītu potenci (nosakot to bioloģisko aktivitāti), ietverot mRNS translācijas efektivitāti. Šīs metodes parasti balstās uz šūnu transfekciju un mērķa proteīna funkcionālajiem testiem.
Yaohai Bio-Pharma piedāvā uz šūnām balstītus iedarbības testus mRNS zāļu vielām vai LNP produktiem, tostarp šūnu transfekciju (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 šūnas utt.) un ELISA vai Western Blotting (WB) testus.
Normatīvās prasības potences pārbaudēm
Saskaņā ar PVO normatīvajiem apsvērumiem: “Katras galīgās vakcīnas partijas stiprums jānosaka, izmantojot atbilstoši kvantitatīvu un apstiprinātu funkcionālo metodi(-es). Potenciālie in vitro potences testi var ietvert uz šūnām balstītas transfekcijas sistēmas vai bezšūnu testus. Un USP ieteica "šūnu testu", lai pārbaudītu mRNS potenciālu, ti, mērķa proteīna ekspresiju.
Procedūra
1. solis. Šūnu transfekcija ar mRNS vai mRNS-LNP
Šūnas tiek kultivētas un transfekētas ar mRNS vai mRNS-LNP. Sīkāk, mRNS tiek transficēts pēc sajaukšanas ar transfekcijas reaģentu, savukārt mRNS-LNP tiek tieši transfekēts šūnās. Pēc 24–48 stundām notīriet supernatantu, kas satur ekspresēto proteīnu, centrifugējot.
2. solis. Mērķa proteīna funkcionālie testi
Veiciet ELISA vai WB testus, lai novērtētu mērķa proteīnu funkcionālo saistīšanos.
Gadījuma izpēte
MRNS paraugu potences testi uz šūnām
Yaohai-BioPharma ir izstrādājis uz šūnām balstītu potences noteikšanas metodi mRNS, kas ietver šūnu kultūru, šūnu transfekciju un proteīnu funkcionālos testus. Mēs transfektējām eGFP mRNS, mCherry mRNS, luciferāzes mRNS, smaile proteīna mRNS 293T šūnās un atklājām mērķa proteīnu, izmantojot fluorescenci, luminiscējošu vai krāsainu signālu, WB, ELISA.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NĒ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
