Plazmīdas DNA, kā in vitro transkripcijas (IVT) šablonam, ir svarīgs materiāls mRNA ražošanai. Augsta plazmīdas DNA izdošana, tīrība un atgūšana ir galvenie mērķis plazmīdas procesa attīstības laikā.
Yaohai Bio-Pharma nodrošina visaptverošu risinājumu plazmīdas attīstībai, ieskaitot augstākā līmeņa (fermentācija), zemākā līmeņa (tīrīšana) procesu attīstību, procesa raksturošanu un procesa validāciju. Mums ir plaša pieredze plazmīdas izdošanas uzlabošanā un atdalīšanā no sarežģītiem matriciem, attīstot un optimizējot fermentācijas, tīrīšanas un vielu noņemšanas procesus.
Baziskais bioprosess plazmīdas ražošanai ietver: Escherichia coli (E. coli) fermentāciju, šūnu saņemšanu un alkalisko liksni, klarificēšanu, koncentrēšanu, trīssoļu hromatogrāfijas procesu (iekasēšanu, starpniecisku tīrīšanu un finālo apstrādi), kā arī koncentrēšanu.
Pakalpojumu detaļas | Vienības operācijas | Parametri |
E. coli fermentācija |
Saites flāze | Mediju sastāvs, antibiotika, inseminācijas apjoms, augšanas temperatūra un tālāk. |
Fermentors (7 L) |
Antibiotika, inseminācijas apjoms, augšanas temperatūra, pH, risinājumā esošais skābeklis (DO), barošanas režims (piem., fed-batch), barošanas mediji, fermentācijas laiks un tālāk. |
|
Lietotāju saņemšana | Mikrofiltrācija | Standarts E. coli saņemšanas process |
Lūzu līziss | Lūzu atkal suspendēšana, alkaliska līziss, neutralizācija | Alkālisko attiecība, līzēšanas laiks |
Klārsīkums | Filtrēšana | Primārā filtrācija, 20 µm un 5 µm filtrācijas virkne (iedomātais veids) |
Konzentraciju | Ultrafiltrācija, tangenciālā plūsmas filtrācija | Cietuma lielums (vai NMWC), caur lūpu spiedums (TMP), Fluxs, filtrāta apjoma attiecība pret membrānas laukumiem |
Trīsskaņu hromatogrāfija | Lieluma atdalīšanas hromatogrāfija (SEC) vai žēlastības filtrācijas hromatogrāfija (GFC) | Kolonnas garums un diametrs, bufera sastāvs, ievietošanas apjoms, mobilā fāzes sastāvs (absorbcija un desorbīcija), pH, plūsmas ātrums, pielāgošanas, sašķeļšanas, mazgāšanas un elučēšanas nosacījumi. |
Afinācijas hromatogrāfija (AF) | ||
Anjona maiņas hromatogrāfija (AEX) | ||
Konzentraciju | Ultrafiltrācija, tangenciālā plūsmas filtrācija | Cietuma lielums (vai NMWC), caur lūpu spiedums (TMP), Fluxs, filtrāta apjoma attiecība pret membrānas laukumiem |
Vairāk bioloģisko vielu tīrīšanas procesa risinājumu |