Kapsulēšanas pamats ir piegādes sistēmas dizains un attīstība. Labi izstrādāta piegādes sistēma ļauj circRNA molekulām iekļūt organismā, nekļūstot nogarota ar RNA enzīmiem, un pēc tam efektīvi tikt piegādātām līdz mērķa vietnei, pārcelties caur šūnu membrānu un tiek atbrīvotas šūnā.
Lipīdu nanocilpsti (LNPs) ir labākais piegādes sistēmas variants, kuru iespējas kapsulēšanā, dzīvorganismā izpausmē un drošībā ir lielākas salīdzinājumā ar citām piegādes sistēmām. Lipīdu nanocilpstu ar nukleīnācids fragmentiem ērti iekļauj šūnās un veido intracelu struktūras. Kad šūna tiek iekļauta, intracelu struktūras sasitums protonē lipīdu galu, kas dod pozitīvu slodzi, tādējādi apvienojoties ar intracelu struktūras iekšējo membrānu un atbrīvojot mērķa nukleīnācids šūnā darbībai.
Yaohai Bio-Pharma circRNA pakalpojumi turpinās uzlaboties un var piedāvāt circRNA-LNP kapsulēšanas pakalpojumu, lai optimizētu saistītos kritiskos procesa parametrus un uzlabotu circRNA līdzekļa ražošanas konsekvenču un atkārtotību.
Procesus | Pakalpojumu detaļas | Piegādes periods (dienās) | Sniedzamie rezultāti |
circRNA-LNP kapsulēšana | Materiāla un dzēriena iepriekšēja sagatavošana | 2 | circRNA-LNP medicīnas produkts (DP) |
Mikrofluīdu aparāta maiņa | |||
Tangenciālā plūsmas filtrācija | 1 | ||
Sterilizējošā filtrācija | |||
circRNA-LNP kvalitātes kontrole | Encapsulācijas efektivitāte | 1 | TESTA ZIŅOSLĒGIS |
Daļiņu izmērs un polidispersitātes indekss | |||
Zeta potenciāls |
Ātra sinteze, augsta R&D efektivitāte un iepriekš optimizēti risinājumi;
Apvilkšanas proporcija var sasniegt vairāk nekā 90%;
Lipīdu nanocilpu izmēru var kontrollēt, mainot šķīduma ievadīšanas ātrumu un proporcijas;
circRNA-LNP produkti tiek apstiprināti in vitro šūnu izpausmes palīdzībā un spēj efektīvi izpaust mērķa oliecisku.
LNP-eGFP circRNA paraugus sagatavo un tos (1ug, 2ug un 4ug) tiek tieši transficētas 293T šūnās, lai pārbaudītu, vai tās var izpaust mērķa oliecisku. Pēc 48 stundām pēc transficēšanas redzams skaidrs fluorescences signāls, un ir redzams fluorescences intensitātes pieaugums atbilstoši dozei.
Lipo-circ_eGFP, kas sastāv no liposomas un neierobežotas eGFP circRNA, tiek lietota kā kontrols.