Lietotu Klētu Spēja Testi
MRNA spēka pārbaudes nozīme
Ar mRNA vakcīnu un terapijas ātrajiem attīstījumiem nepieciešama konkrēta analīzes metožu grupa, lai pārbaudītu spēku (definējot to bioloģisko aktivitāti), kas ietver mRNA tulkošanas efektivitāti. Šīs metodes parasti balstās uz šūnu transfekciju un mērķa olieciskās vielas funkciju pārbaudi.
Yaohai Bio-Pharma piedāvā lokālās spēka pārbaudes mRNA farmatīkām vai LNP produktiem, ieskaitot šūnu transfekciju (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 šūnas utt.) un ELISA vai Ziemeļa blota (WB) pārbaudes.
Regulatīvie prasības spēka pārbaudēm
Saskaņā ar VTO regulatīvajiem apsvērumiem, „Katras galīgās vakcīnas partijas spēja būtu jānoteik šķīstām un validētām funkcionālām metodei(m). Iespējamie in vitro spējas testi var ietvert klētiskās transfekcijas sistēmas vai neklētiskus testus.” Un ASV Farmaceitijs iesaka “klētisku testu” mRNA spējas pārbaudē, proti, mērķa proteīna izpausme.
Analītiskā metode
|
Analīze
|
Metodes
|
|
Spējas testi
|
Klētiskā transfekcija un mērķa proteīna identifikācija:
293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 klētas utt.
|
Procedūra
Solis 1. Klētiskā transfekcija ar mRNA vai mRNA-LNP
Klētas tiek audzētas un transfeicētas ar mRNA vai mRNA-LNP. Sīkāk: mRNA tiek transfeicēta pēc tam, kad tā ir jāsaista ar transfešanas reģentu, savukārt mRNA-LNP tiek tieši transfeicēta klētās. Pēc 24-48 stundām izskaidrojiet satura ar izpaustu proteīnu centrifugējot.
Solis 2. Mērķa proteīna funkcionālie testi
Veiciet ELISA vai WB testus, lai novērtētu funkcionalo mērķa oliecīnu saistīšanos.
Studija par praksi
Lokālās spējas assajos ARN proviem
Yaohai-BioPharma ir izstrādājusi lokālo spēju assaju metodi ARN, kas ietver loku kultūru, loku transfekciju un oliecību funkcionālos testus. Mēs transfektojām eGFP ARN, mCherry ARN, luciferāze ARN, spike oliecība ARN 293T lokās un noteicām mērķa oliecību fluorescences, luminescences vai krāsojošā signāla, WB, ELISA palīdzībā.
Lokālās spējas assaji ARN produktiem no Yaohai Bio-Pharma
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
