タンパク質タグは、組み換え DNA 技術で使用される融合パートナーとして、さまざまな特性を持つさまざまなタンパク質/ペプチドの効果的な 1 ステップのアフィニティー精製を可能にします。この重要な利点にもかかわらず、外因性アミノ酸としてのタグは、タンパク質の構造と生物学的機能を変更する可能性があります。したがって、特にバイオ医薬品分野では、安全性と有効性を確保するために、タグなし (タグなし) のタンパク質またはペプチドの方が好まれます。融合タグ付きの組み換えタンパク質は、医療/医薬品管理機関からの認可を得る可能性が限られています。
Yaohai Bio-Pharma は、微生物生物製剤の研究開発プラットフォームを基盤として、臨床使用のための研究、開発、製造の独自の目的を満たすカスタマイズされた非タグ (タグフリー) タンパク質調製サービスを提供しています。
キーワード: タグフリータンパク質生産、非タグタンパク質精製、タグフリータンパク質調製、タグレスタンパク質発現および精製、高度にタグフリーな標的タンパク質 用途: ヒト医薬品研究、動物医薬品開発、組み換えワクチン開発、組み換え大分子生物製剤生産
当社は微生物株のエンジニアリング、発酵、製品の精製において豊富な経験を持っています。
細菌: 大腸菌 (E. coli)
酵母：ピキア・パストリス（P.パストリス）、サッカロミセス・セレビシエ（S.セレビシエ）、ハンセヌラ・ポリモルファ（H.ポリモルファ）
| モダリティ | 組換えタンパク質 |
| 出発材料 | 遺伝子配列、組み換えプラスミド、または遺伝子組み換え株 |
| 成果 | 精製度：＞80%、＞85%、＞90% 量：0.2～10 g（プロジェクトにより決定） |
| 表現システムと形成 | 大腸菌ペリプラズム分泌、可溶性および封入体発現; 酵母細胞内または分泌発現 |
| 分析方法 | 定量分析には紫外線（UV）、ビシンコニン酸アッセイ（BCA）、ブラッドフォード法、またはローリー法、精製試験にはドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動（SDS-PAGE）オプション：ウエスタンブロット（WB）、酵素免疫測定（ELISA）、高速液体クロマトグラフィー（HPLC） |
| 残留不純物 | エンドトキシン（オプション） |
| サービス | サービスの詳細 | 最小タイムライン（営業日） |
| 遺伝子合成 | 特定の発現ホストに対するコドン最適化 | 7〜10日 |
| 遺伝子合成 | ||
| プラスミド/ベクターの構築 | プラスミド/ベクターへのクローニング | 2日間 |
| プラスミド変換 | ||
| ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）検証、制限酵素消化、遺伝子配列決定 | 3日間 | |
| 大腸菌におけるタンパク質発現 | プラスミド変換、 | 2日間 |
| 振とうフラスコでの栽培 | 3日間 | |
| 7L-サクル発酵、最適化 | 4日間/バッチ | |
| タグフリータンパク質精製、最適化 | 5～10日/バッチ | |
| ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動（SDS-PAGE）による検査 | ||
| 酵母におけるタンパク質発現 | 酵母コンピテントセルの調製 | 4日 |
| プラスミドの線状化と電気変換 | ||
| 7L-サクル発酵、最適化 | 5日 | |
| タグフリータンパク質精製、最適化 | 7日間/バッチ | |
| タグフリーのタンパク質精製 | 5～10日/バッチ | |
| SDS-PAGEによる品質管理 |
発酵プロセス開発
タグフリータンパク質精製プロセス開発
パイロットスケールアップとGMP製造
分析とテスト
私たちは、E. coli DH300α、TOP5、Trans10、BL10、P. pastoris SMD21H、X-1168、GS33、PichiaPink 株 115/1/2/3、H. polymorpha など、4 を超える遺伝子組み換え微生物株に取り組んできました。
当社は、大腸菌のペリプラズム分泌、可溶性および封入体の発現、ならびに酵母の細胞内または分泌発現の経験が豊富です。
私たちは、100 を超える候補株から高生産性で安定した株をスクリーニングするためのハイスループットスクリーニングプラットフォームを構築しています。
Yaohai Biology は、世界中の顧客にワンストップのバイオ医薬品エンドツーエンドのサービスを提供できる微生物発現システム CDMO サービス プロバイダーに注力しています。
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