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組換え酵素

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モダリティ

組換え酵素

治療用の組換え酵素

バイオテクノロジープロセスを通じて得られる治療用酵素は、酵素補充療法、蓄積された代謝産物や毒素の分解、がん治療、ゲノム編集など、いくつかの臨床応用に広く使用されています。いくつかの治療用酵素は微生物発現系で生成できます。

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酵素

物質

代表的な製品・パイプライン

酵素補充療法

アデノシンデアミナーゼ、ADA

アデノシンまたはデオキシアデノシン

エラペガデマーセ-lvlr (Revcovi)

フェニルアラニンアンモニアリアーゼ、PAL

フェニルアラニン

ペグバリアーゼ-pqpz (Palynziq)

蓄積された代謝物の分解

ウリカーゼ/尿酸オキシダーゼ

尿酸

ペグルチカーゼ (Krystexxa) ラズブリカーゼ (Fasturtec)

コラゲナーゼ

コラーゲンの「傷跡」

コラゲナーゼ クロストリジウム ヒストリティカム (Xiaflex、Qwo、Santyl)

切断されたプラスミン

コラーゲン、フィブロネクチン、ラミニン

オクリプラスミン（ジェトレア）

切断型組織プラスミノーゲン活性化因子 (tPA)

プラスミノーゲン

レテプラーゼ (レタベース)

IgGプロテアーゼ

免疫グロブリンG（IgG）

イムリフィダーゼ (Idefrix)

IgAプロテアーゼ

免疫グロブリンA（IgA）

PKU308/AP308IGAN IgA プロテアーゼ

毒素の分解

カルボキシペプチダーゼ G2

メトトレキサート

グルカルピダーゼ（Voraxaze）

癌治療

アスパラギン特異的酵素

アスパラギン

アスパラギナーゼ (Elspar)カラスパルガーゼ pegol-mknl (Asparlas)

ゲノム編集

Cas9ヌクレアーゼ

標的遺伝子

エクサガムグロジェン オートテムセル (Exa-cel、CTX001)
材料としての組換え酵素

ロングコーディング RNA の生成 (mRNA、saRNA、circRNA など)、抗体薬物複合体 (ADC) の生成などに使用される酵素がいくつかあります。微生物が生成する酵素は、哺乳動物細胞、特に大腸菌発現系よりも費用対効果が高くなります。

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酵素

演算

直鎖状 RNA 生成用酵素、RNase フリー

制限エンドヌクレアーゼ

より長い転写産物の生成を避けるためのプラスミド DNA (pDNA) の直線化。

T7 RNA ポリメラーゼ (T7 RNAP)

T7 プロモーターに結合し、特異的な RNA 転写物を生成します。 in vitro 転写物 (IVT) 反応中に重要な役割を果たします。

ワクシニアキャッピング酵素

IVT mRNA の 5' 末端に Cap 構造を追加します。

無機ピロホスファターゼ (iPPase)

IVT 反応中のピロリン酸を防止します。

RNase阻害剤、組換え型

IVT反応中のRNase活性を阻害します。

DNアーゼI

DNA テンプレートを削除します。

circRNA 生成用酵素、RNase フリー

RNase R

直鎖状 RNA を消化し、環状 RNA を濃縮します。

酵素を介した糖鎖結合

ペプチド-N-グリコシダーゼ (PNGase F)

最初の糖類 GlcNAc と Asn297 側鎖 L の間のアミド結合を切断します。 IgG 抗体からグリカンを放出します。

細菌性トランスグルタミナーゼ (BTG)

ペイロードをサイト固有に結合して ADC を生成します。

ソルターゼA

タンパク質のライゲーションを触媒します。

β1,4-ガラクトシダーゼ

すべての末端ガラクトースを解放し、抗体の均一な G0 アイソフォームを形成します。

β1,4-ガラクトシルトランスフェラーゼ (Gal-T)

化学反応性官能基を持つ糖残基を転移します。

α2,6-シアル酸転移酵素（Sial T）

末端シアル酸残基を抗体のネイティブなグリカン構造に組み込みます。

酵素媒介糖鎖リモデリングと糖鎖工学

エンド-N-アセチルグルコサミニダーゼ (ENGase)

N-グリカンのGlcNAcβ1,4-1GlcNAc間のβ4-グリコシド結合を加水分解します。 IgG 抗体の Fc 領域上の N 結合型グリカンを除去します。

エンドグリコシダーゼ S (EndoS)

糖転移酵素 (GT)

N-グリカン オキサゾリンを脱フコシル化 IgG に転移します。

その他

微生物株によって生成される酵素

カスタマイズされたニーズ
試薬としての組換え酵素
タグ除去プロテアーゼ

融合タグは、目的の組換えタンパク質の溶解性と安定性を向上させ、精製を容易にするためによく使用されます。一般的に使用されるタグには、His タグ、マルトース結合タンパク質 (MBP)、グルタチオン-s-トランスフェラーゼ (GST) などが含まれます。

通常、融合タグと標的タンパク質配列の間にリンカー配列を追加してタグを除去します。融合タグの除去には、エンテロキナーゼ (EK)、トロンビン、タバコエッチウイルスプロテアーゼ (TEVp)、ヒトライノウイルスプロテアーゼ 3C (HRV3C)、小型ユビキチン修飾タンパク質 (SUMO) プロテアーゼ、タバコ静脈斑点ウイルス ( TVMV) プロテアーゼ、およびカルボキシペプチダーゼ A/B (CPA/CPB)。

種類

酵素

認定サイト

タグ除去エンドプロテアーゼ

エンテロキナーゼ (EK)、エンテロペプチダーゼ

DDDK↓

トロンビン

LVPR↓GS

TEVプロテアーゼ

ENLYFQ↓G

HRV3Cプロテアーゼ

LEVLFQ↓GP

SUMOプロテアーゼ

SUMO三次構造

TVMVプロテアーゼ

ETVRFQG↓S

タグ除去エキソプロテアーゼ

カルボキシペプチダーゼA（CPA）

Pro、Lys、Arg を除く C 末端アミノ酸

カルボキシペプチダーゼ B (CPB)

C末端のLysとArg
その他のプロテアーゼ、ヌクレアーゼ、アミダーゼ

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酵素

演算

その他のプロテアーゼ

プロテアーゼK

ペプチド結合を加水分解することによってタンパク質を消化するセリンプロテアーゼ。

IdeS、IgGプロテアーゼ

免疫グロブリン G (IgG) の特定の部位で切断し、Fab および Fc フラグメントを生成する IgG 分解酵素 (Ides)

IgA1プロテアーゼ

ヒト免疫グロブリン A1 (IgA1) ヒンジ領域配列の特定の部位を切断するタンパク質分解酵素。

ヌクレアーゼ

ヌクレアーゼ

ホスホジエステル結合を加水分解することにより、核酸 (DNA または RNA) を切断します。

酵素を制限する

特定の部位またはその近くで DNA を切断するエンドヌクレアーゼ。

アミダーゼ

PNGase F

高マンノース、ハイブリッド、複合オリゴ糖の最も内側の N-アセチルグルコサミン (GlcNAc) とアスパラギン残基の間を切断します。
Yaohai Bio-Pharma、組換え酵素向けのワンストップ CDMO ソリューションを提供
参照：

[1] ヘニガン JN、リンチ医師。酵素ベースの治療の過去、現在、未来。今日のドラッグディスコブ。 2022 年 27 月;1(117):133-10.1016。土井：2021.09.004/j.drudis.XNUMX。

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