Bok. Je li ti ikada bilo zanimljivo kako znanstvenici mogu klonirati RNA? RNA je taj poseban molekul koji pronađemo u našim ćelijama i radi puno stvari kako bi se napravili proteini, a proteini su tu da bi naše tijelo moglo raditi sve što treba. U ovom sastavku, obićemo mnogo zanimljiviji protokol koji koriste istraživači: in vitro transkripciju. A to znači da znanstvenici uzimaju RNA i proizvode puno njega u probici (to je onaj maleni posude koje laboratoriji koriste), pa hajde da razmotrimo svaki korak.
Završivši svoj prethodni članak, shvatio sam da je posljednji možda bio malo such, pa dođite da se pridružite zabavi u vlažnoj laboratoriji; dakle, sada kada ste stvarno na vlaku zabave (za izradu RNA): Koji će reagenti biti potrebni za vaš EF?? Da bismo to postigli, trebati ćemo posebne proteine nazvane enzimi, identične proizvodima Yaohai Proizvodnja rekombinantnog Midkina . On katalizira kemikalne reakcije, ove enzime pomažu u razlaganju. Sada nam je potreban samo naš komad DNA. Ova funkcija je DNA koji koristimo kao šablon za kopiranje za naš RNA. Dodatne regulatorne sekvence u RNA-u, imenito nukleotidi, također su potrebni. Ti nukleotidi su kao maleni građevini koji moraju biti montirani kako bi se stvorio RNA. Također koristimo kratke cijevi male dijametra da umetnemo procjenu okusa u druge. Na kraju, potreban nam je i uređaj (termocikler) koji osigurava da su naše reakcije na pravoj temperaturi. Dodatno, možda ćemo trebati nekoliko alata i proizvoda za određene eksperimente.
Ovdje se stvari razilaze, imamo jedan lanac RNA i sada želimo imati više kopija njega, također Proizvodnja konjugiranih VLP cjepiva razvila Yaohai. Način da se postigne je upotreba druge enzime; T7 RNA polimeraze. Ova jedinstvena enzima, primjerice, prepoznaje specifične područje unutar RNA. skočni konus za stvaranje još više kopija RNA u nastavku. U ovom trenutku, više će se dodati lancu RNA T7 RNA polimerazom dok ne bude stvorena velika količina transkripta ili dok nam ne izgubi.
Nakon što smo RNA moguće najbolje izolirali, kliznite dalje kako biste saznali kako je čistiti i pohranjivati za buduću uporabu. Rhoades: Neki od tih metoda su malo ekstremniji u smislu izoliranja RNA — ne biste ih uvijek koristili, ali ponekad su potrebni za određene vrste eksperimenata. Kada je naša RNA slobodna od svih kontaminanata, može se pohraniti zamrznuta. Na taj način je sigurna i kasnije ju možemo koristiti u raznim eksperimentima.
Kvaliteta početnog materijala: uvjerite se da vaš DNA šablon nije oštećen ili uništjen. Također možete dopuniti svežo rekonstituirane nukleotide i novo rastopljenim enzimima kako biste maksimizirali šanse za uspješan eksperiment.
Fin tuniranje uvjeta Svi enzimi i njihovi nukleotidi bolje rade na specifičnoj temperaturi i pH-u unutar vašeg tijela, kao i Yaohai-ovog Crveno fluorescentska mRNA . Sada malo prilagodite nuance između uvjeta dok ne dođete do točke gdje je ključ za vaš jedinstven postavku.
Obrnuti transkriptazi je neobičan enzim, jer iz RNA molekula stvara kopiju DNA. Koristili smo i DNAs te i DNA šablon (cDNA) kao ulaz za našu in vitro transkripcioni metod za generiranje RNA. Međutim, u većini eksperimenata biće znanstvenici željeli transkribirati DNA u RNA. Obrnuta transkripcija dobiva svoj naziv upravo po tome. testiranje distribucije poli-A mRNA izrađeno od strane Yaohai. Predstavlja neocjenjiv alat u cijeloj znanosti - od proučavanja RNA molekula unutar stanica do proizvodnje komplementarnih DNA lancova za daljnje eksperimente.
U stvarnim eksperimentima u kojima se RNA koristi kao jedan od najčešće korištenih molekularnih alata, uz proizvod Yaohai. Proizvodnja VLP čakove u E. coli . Količinske analize: Ove testove se može koristiti za otkrivanje količine bilo koje specifične molekule prisutne u uzorku. Na primjer, znanstvenici mogu sintetizirati in vitro pripremu transkripta RNA kopija izvedenih iz ciljnog gene unutar stanice. Dijagnostika zatim može provesti analizu tih kopija; u slučaju da traže RNA, dijagnostika može izvesti reakciju lanca polimeraze (PCR) kako bi se pojačale te kopije u uzorku. To čini mogućim za znanstvenike da vide kako se gene izražavaju u stanici, a čak omogućuje neke vrlo visokoprotokne analize, poput prisutnosti bakterijske ili virusne infekcije, i dijagnosticiranje genetskih poremećaja.
in vitro Transcript Protocol je vodeći u oblasti CDMO za mikrobiološke biologike. Naš fokus je bio na cijeplima i terapijama proizvedenim mikroorganizmima koji su prilagođeni upravljanju zdravljem ljudi, veterinarskom zdravstvu te zdravju kućnih ljubimaca. Posjedujemo najmodernije Razi platforme i tehnologiju proizvodnje koje obuhvataju cjelokupan postupak, počevši od razvoja mikrobioloških štrijela i bankarstva stanica, preko razvoja procesa i metoda, do komercijalne i kliničke proizvodnje što osigurava uspješno dostavljanje inovativnih rješenja. Tijekom vremena nagomilali smo obiman znanstveni kapital vezan uz mikrobiološku obradu. Uspešno smo završili više od 200 projekata i pomažemo svojim klijentima da se pridrže propisima poput onih američke FDA i europske EMA. Također ih pomažemo da se orijentiraju u australskoj TGA i kineskoj NMPA. Naše profesionalno stručnjaci i obiman iskustvo omogućuju nam brzu reakciju na tržišne potrepštine i pružanje prilagođenih CDMO usluga.
Yaohai Bio-Pharma ima iskustva u proizvodnji bioloških sredstava stvorenih preko in vitro Transkript Protokola. Ponudimo prilagođena rješenja za razvoj i proizvodnju, osiguravajući da nema rizika. Bili smo angažirani u različitim modalitetima poput podjediničnih cjepiva rekombinantnih, peptidskih hormona, citoquina, rasta faktora, jednodomenskih antitijela enzima, plazmidne DNA MRNA-a i mnogih drugih. Stručnjaci smo za mnoge mikroorganizme, uključujući kvasinu izvanćeljsku i unutarćeljsku sekreciju (dobiveno do 15g/L) te bakterije unutarćeljsku rastvorivu i inkluzijsko tijelo (dobiveno do 10g/L). Također smo stvorili BSL-2 fermentacijsku platformu za stvaranje bakterijskih cjepiva. Fokusiramo se na poboljšanje procesa, povećanje dobivenosti produkta i smanjenje troškova proizvodnje. Korištenjem jačeg tima tehnologa možemo osigurati brzu i pouzdanu dostavu projekata koja će vaš produkt donijeti na tržište brže.
Yaohai Bio-Pharma, jedan od deset vodećih proizvođača bioloških proizvoda, se posebno bavi mikrobijskom fermentacijom. Izgradili smo savremenu biljku s jačanim mogućnostima za razvoj i inovacije te naprednim opremom. Imamo pet linija za proizvodnju farmaceutske tvari koje odgovaraju GMP zahtjevima za mikrobijsku fermentaciju i čišćenje. Također imamo dvije automatske linije za ispunjavanje kartridža, flašica i prenapunjivih šprica. Kapacitet fermentacije rasponje se od in vitro Transkripcije Protokola do 2000L. Specificiranja za ispunjavanje flašice rasponju se od 1ml do 25ml. Specificiranja za ispunjavanje prenapunjive šprice ili kartridža rasponju se od približno 1-3ml. Naše cGMP-saglasne proizvodnje osiguravaju stalnu dostavu kliničkih uzoraka kao i trgovinskih artikala. Naša biljka proizvodi velike molekule koje se šalju širom svijeta.
Yaohai BioPharma je u vrhu 10 mikrobioloških CDMO-ova koji uključuju protokol in vitro transkripcije te regulativne poslove. Imamo sustav upravljanja kvalitetom koji je u skladu s trenutnim GMP standardima i globalnim propisima. Naš tim stručnjaka za regulativne poslove vješto radi s globalnim regulativnim okviriima kako bi ubrzao izlazak bioloških proizvoda na tržište. Osiguravamo praćenje procesa proizvodnje, kvalitetne proizvode te poštivanje pravila US FDA i EU EMA. Australia TGA i Kina NMPA su također zadovoljni. Yaohai BioPharma je uspješno prošla reviziju na terenu od strane kvalificirane osobe (QP) Europske unije za naš sustav kvalitete GMP i našu proizvodnu jedinicu. Nadalje, prošli smo prvu certifikacijsku reviziju Sustava upravljanja kvalitetom ISO9001, Sustava upravljanja okolišem ISO14001 i Sustava upravljanja zdravljem i sigurnošću na radu ISO45001.