Bok. Jeste li se ikada zapitali kako znanstvenici mogu klonirati RNK? RNA je ova posebna molekula koju nalazimo u našim stanicama i koja čini hrpu stvari za stvaranje proteina, a proteini su tu kako bi naše tijelo moglo raditi sve što je potrebno. U ovom nastavku, proći ćemo kroz mnogo zanimljiviji protokol koji koriste istraživači: in vitro transkript. A sve to znači da znanstvenici uzimaju RNK i stvaraju puno toga u epruveti (koju laboratoriji koriste u ovoj maloj staklenci) pa krenimo ovdje na svaki korak.
Nakon što sam završio svoju prethodnu objavu, shvatio sam da je posljednja možda bila malo suhoparna, pridružite se zabavi-u-mokrom-laboratoriju; dakle, u skladu s formom sada kada ste dobro i uistinu na zabavnom (sic RNA-stvaranje) vlaku: Koji reagensi ic će biti potrebni za vaš EF?? Da bismo to postigli, trebat će nam posebni proteini zvani enzimi, identični Yaohaijevom proizvodu Rekombinantna Midkine proizvodnja. Katalizira kemijske reakcije, ti enzimi pomažu u razgradnji. Sada nam samo treba naš djelić DNK. Ova funkcija je DNK koju koristimo kao predložak za kopiranje naše RNK. Potrebne su i dodatne regulatorne sekvence u RNA, naime nukleotidi. Ovi nukleotidi su poput sićušnih građevnih blokova koji se moraju sastaviti da bi se napravila RNK. Također koristimo kratke cijevi malog promjera kako bismo ocjenu okusa premjestili u druge. Na kraju, potreban nam je stroj (termocikler) koji osigurava da su naše reakcije na pravoj temperaturi. Osim toga, možda ćemo trebati nekoliko alata i proizvoda za bilo koje eksperimente.
Dakle, ovdje se stvari razlikuju, imamo jedan RNA lanac i sada želimo imati više njegovih kopija, također Proizvodnja konjugiranih VLP cjepiva razvio Yaohai. Način postizanja korištenja drugog enzima; T7 RNA polimeraza. Ovaj jedinstveni enzim, na primjer, prepoznaje određena područja unutar RNK. skačući stožac za izradu mnogo više kopija RNK u postupku. U ovoj će točki RNK lancu T7 RNK polimeraza dodati više sve dok se ne stvori masa prijepisa ili dok mu ne kažemo da prestane.
Nakon što smo izolirali RNK što je više moguće, pomaknite se dalje prema dolje da vidite kako očistiti i pohraniti RNK za buduću upotrebu. Rhoades: Neke od tih metoda su malo ekstremnije u smislu izolacije RNK — to ne biste uvijek koristili, ali ponekad je potrebno za određene vrste eksperimenata. Nakon što se naša RNK oslobodi bilo kakvih kontaminanata, može se pohraniti zamrznuta. Na ovaj način ovo je sigurno i možemo ga koristiti kasnije u raznim eksperimentima.
Kvaliteta početnog materijala: provjerite je li vaša DNK šablona čista i nije sva izgorjela. Također možete dodati svježe rekonstituirane nukleotide i nedavno odmrznute enzime kako biste maksimalno povećali šanse za uspješan eksperiment.
Uvjeti finog podešavanja Svi enzimi i njihovi nukleotidi rade bolje na određenoj temperaturi i pH unutar vašeg tijela, kao i kod Yaohaijevih Crvena fluorescentna mRNA. Sada malo prilagodite nijanse između uvjeta dok ne dođete do mjesta gdje je ključ vaše jedinstvene postavke.
Reverzna transkriptaza je neobičan enzim, jer stvara DNK kopiju iz RNK molekule. Koristili smo i DNA i DNA predložak (cDNA) kao ulaz za našu in vitro transkript metodu za generiranje RNA. Međutim, u većini eksperimenata znanstvenici bi htjeli prepisati DNK u RNK. Obrnutom transkripcijom dobiva isto ime kao Ispitivanje distribucije mRNA poli-A izradio Yaohai. To je neprocjenjiv alat u cijeloj znanosti - od proučavanja RNA molekula unutar stanica do proizvodnje komplementarnih DNA lanaca za daljnje eksperimente.
Eksperimenti u stvarnom životu u kojima je RNA jedan od najčešće korištenih molekularnih alata, uz Yaohaijev proizvod Proizvodnja VLP cjepiva u E. coli. Kvantitativni testovi: Ovi testovi mogu otkriti količinu bilo koje specifične molekule prisutne u uzorku. Na primjer, znanstvenici mogu sintetizirati in vitro pripravak prijepisa RNK kopija izvedenih iz ciljanog gena smještenog unutar stanice. Dijagnostika zatim može analizirati te kopije, u slučaju da postoje. tražeći RNA, dijagnostika može pokrenuti lančanu reakciju polimerazom (PCR) za umnožavanje tih kopija u uzorku. To omogućuje znanstvenicima da vide kako se geni eksprimiraju na stanicama, pa čak omogućuje i neke iznimno visoke propusnosti testova, kao što je prisutnost bakterijske ili virusne infekcije, i dijagnosticiranje genetskih poremećaja.
Protokol transkripta in vitro vodeći je CDMO u mikrobnim biološkim lijekovima. Naš fokus je bio na mikrobiološki proizvedenim cjepivima i terapiji koji su prikladni za upravljanje zdravljem ljudi, veterinara, kao i kućnih ljubimaca. Imamo najsuvremenije RD platforme i proizvodnu tehnologiju koja pokriva cijeli postupak, počevši od razvoja sojeva mikroba i stanične banke, do razvoja procesa i metoda, do komercijalne i kliničke proizvodnje koja osigurava uspješnu isporuku inovativnih rješenja. S vremenom smo prikupili golemo znanje o biološkoj obradi na bazi mikroba. Više od 200 projekata uspješno je dovršeno, a mi pomažemo našim klijentima u usklađivanju s propisima poput onih US FDA i EU EMA. Također im pomažemo u navigaciji u Australiji TGA i Kini NMPA. Naša profesionalna stručnost i veliko iskustvo omogućuje nam da brzo odgovorimo na zahtjeve tržišta i pružimo CDMO usluge po mjeri.
Yaohai Bio-Pharma ima iskustva u proizvodnji bioloških lijekova stvorenih iz in vitro Transkript Protokola. Nudimo prilagođena rješenja za RD i proizvodnju, osiguravajući da nema rizika. Bili smo uključeni u različite modalitete kao što su rekombinantna podjedinična cjepiva, peptidni hormoni, citokini, faktori rasta, enzimi protutijela s jednom domenom, plazmidna DNA MRNA i još mnogo toga. Stručnjaci smo za mnoge mikroorganizme, uključujući izvanstaničnu i unutarstaničnu sekreciju kvasca (prinos do 15 g/L), kao i unutarstanična topljiva i inkluzijska tijela bakterija (prinos čak do 10 g/L). Također smo stvorili BSL-2 fermentacijsku platformu za stvaranje bakterijskih cjepiva. Usredotočeni smo na poboljšanje procesa, povećanje prinosa proizvoda i smanjenje troškova proizvodnje. Koristeći snažan tehnološki tim, možemo osigurati brzu i pouzdanu isporuku projekta koja će brže dovesti vaš proizvod na tržište.
Yaohai Bio-Pharma, top 10 proizvođača bioloških proizvoda, specijalizirana je za mikrobnu fermentaciju. Izgradili smo moderan objekt sa snažnim RD mogućnostima i naprednom opremom. Imamo pet linija za proizvodnju ljekovitih tvari koje su u skladu s GMP zahtjevima za mikrobnu fermentaciju i pročišćavanje. Također imamo dvije automatizirane linije za završno punjenje za uloške, bočice i napunjene štrcaljke. Dostupne fermentacijske ljestvice za upotrebu kreću se od in vitro Transkript Protokola do 2000L. Specifikacije za punjenje bočice kreću se od 1 ml do 25 ml. specifikacije punjenja napunjene štrcaljke ili uloška kreću se od približno 1-3 ml. Naš proizvodni pogon usklađen s cGMP-om osigurava stalnu opskrbu kliničkim uzorcima kao i komercijalnim artiklima. Naša tvornica proizvodi velike molekule koje se šalju u svijet.
Yaohai BioPharma je 10 najboljih mikrobnih CDMO-a koji uključuje in vitro protokol prijepisa kao i regulatorne poslove. Imamo sustav upravljanja kvalitetom koji je u skladu s važećim GMP standardima kao i svjetskim propisima. Naš tim regulatornih stručnjaka vješt je u globalnim regulatornim okvirima za ubrzavanje bioloških lansiranja. Osiguravamo sljedivi proizvodni proces kvalitetnih proizvoda, kao i usklađenost s pravilima US FDA i EU EMA. Australijski TGA i kineski NMPA također su zadovoljni. Yaohai BioPharma uspješno je prošla provjeru na licu mjesta od strane kvalificirane osobe Europske unije (QP) za naš GMP sustav kvalitete kao i naše proizvodne pogone. Nadalje, prošli smo prve certifikacijske revizije ISO9001 sustava upravljanja kvalitetom, ISO14001 sustava upravljanja okolišem i ISO45001 sustava upravljanja zdravljem i sigurnošću na radu.