Všechny kategorie
Příprava bílkovin bez tagu

Příprava bílkovin bez tagu

Bílkovinné tagy, jakožto fúzní partneři používaní v technologiích rekombinantní DNA, umožňují efektivní jednokrokovou afinní čistění různých bílkovin/peptidů s různými vlastnostmi. Přestože má tento důležitý výhodou, mohou tagy jako exogenní aminokyseliny měnit strukturu bílkoviny a její biologické funkce. Proto jsou bílkoviny nebo peptidy bez tagu více preferovány pro zajištění bezpečnosti a účinnosti, zejména v oboru biofarmaceutik. Rekombinantní bílkovina s fúzním tagem má omezené možnosti získání schválení od lékařských/nefarmaceutických orgánů.

Na základě platformy výzkumu a vývoje mikrobiologických biologických látek nabízí Yaohai Bio-Pharma přizpůsobené služby přípravy bílkovin bez tagu (Tag-free), věnované splnění unikátních cílů pro výzkum, vývoj a výrobu pro klinické použití.

Klíčová slova: produkce bílkovin bez tagu, čištění bílek bez tagu, příprava bílek na bázi volných tagů, expresní a čištění bílek bez tagu, cílové bílky vysoko bez tagu

Aplikace: výzkum lidské medicíny, vývoj veterinární medicíny, vývoj rekombinantních vakcín, produkce rekombinantních velkomolekulárních biologických látek

Naše mikrobiologická platforma pro výzkum a vývoj

Máme zkušenosti s inženýrstvím mikroorganismů, fermentací a čištěním produktu.

Bakterie: Escherichia coli (E. coli)

Kvasinky: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Přizpůsobené možnosti
Modalita Rekombinantní bílkovina
Výchozí materiály Sekvence genů, rekombinantní plazmidy nebo inženýřované štiny
Dodávané výsledky Očištění: >80%, >85%, >90% Množství: 0,2~10 g (bude určeno projektem)
Výrazy systému a formace

E. coli periplazmatická sekrece, rozpustný a inkluzeový výraz;

Kvasinky intracelulární nebo sekretní výrazy

Metody analýzy Ultrafialové (UV), asocena bicinchoninová (BCA), Bradford, nebo Lowry pro množství
Elektroforeze v polyakrylamidovém gele s dodecylsulfát sodným (SDS-PAGE) pro test očištění
Volitelné: Western blot (WB), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), vysokorychlostní kapalná chromatografie (HPLC)
Zbytkové nečistoty Endotoxiny (volitelné)
Detaily služby

Služby

Detaily služby

Minimální časový rámec (pracovní den)

Syntéza genu

Optimalizace kodonů pro specifického nositele výrazy

7~10 dní

Syntéza genu

Konstrukce plazmidu/vektoru

Klonování do plazmidi/vektoru

2 dny

Transformace plazmidu

Ověření polymerační řetězovou reakcí (PCR), digestí příměry enzymbem, sekvenování genu

3 dny

Výraz bílkovin v E. coli

Transformace plazmidu,

2 dny

Kultivace ve víře v kolbičce

3 dny

fermentace v 7L měřítku, optimalizace

4 dny/batch

Očištění bílkovin bez tagu, optimalizace

5~10 dní/batch

Testování elektroforezí v polyacrylamidovém geлу s natrium lauryl sulfátem (SDS-PAGE)

Výraz bílkovin v kvasinkách

Příprava transformačních kvasinky

4 dny

Linearizace plazmidu a elektrotransformace

fermentace v 7L měřítku, optimalizace

5 dní

Očištění bílkovin bez tagu, optimalizace

7 dní / dávka

Očištění bílkovin bez tagu

5~10 dní/batch

Kontrola kvality pomocí SDS-PAGE

Další služby (volitelné)
Získejte zdarma nabídku

Get in touch