Plazmidová DNA je důležitým nosičem v oboru buněčné a genové terapie (CGT), která se používá jako samostatná plazmidová DNA léčiva, DNA vakcíny a výchozího materiálu pro produkci virálního vektoru nebo mRNA. Na základě mikrobiální platformy pro výzkum a vývoj nabízí Yaohai Bio-Pharma služby vlastní přípravy plazmidu zaměřené na splnění jedinečných cílů. Máme zkušenosti v Escherichia coli (E. coli) genetickém inženýrství šťávy, fermentaci a čištění plazmidu.
Klíčová slova: extrakce plazmidu, čištění plazmidu, příprava poly(A)-plazmidu, pomoc při produkci plazmidu
Aplikace: buněčná a genová terapie (CGT), DNA vakcína, produkce mRNA, příprava saRNA, balení AAV, virózní vektor
Přizpůsobené možnosti
Modalita |
Plasmidová DNA |
Výrazový systém |
E. coli DH5α, TOP10, Trans10 atd. |
Délka plazmidu |
~10 000 nt (10 kb) |
Dodávané výsledky |
Čistota nadpojitých plazmidů: 80%, 90%, 95%
Množství: 0,2~5 g
|
Metody analýzy |
Obsah: Ultrafialové (UV, A260) Čištění: UV (A260/A280) a elektroforeze v agárovém gélu (AGE) Volitelné: kapilární elektroforeze (CE), vysoko-výkonná kapalinová chromatografie (HPLC)
|
Zbytkové nečistoty |
Buněčné proteiny nositele (HCP), DNA nosičových buněk (HCD), endotoxiny (volitelné) |
Detaily služby
Služby |
Detaily služby |
Minimální časový rámec (pracovní den) |
Syntéza genu |
Syntéza genu |
7~10 dní |
Konstrukce plazmidu/vektoru |
Klonování do plazmidi/vektoru |
2 dny |
Transformace plazmidu |
Ověření polymerační řetězovou reakcí (PCR), digestí příměry enzymbem, sekvenování genu |
3 dny |
Amplifikace plazmidu v E. coli |
Kultivace ve víře v kolbičce |
3 dny |
Kultivace v 7L fermentéru |
4 dny |
Čištění plazmidu |
5 dní |
Kontrola kvality pomocí UV, AGE a dalších metod |
Další služby (volitelné)