مرحبًا. هل سبق لك أن تساءلت كيف يمكن للعلماء تك隆 الحمض النووي الريبوزي (RNA)؟ RNA هو جزيء خاص نجده في خلايانا يقوم بعدة وظائف لصنع البروتينات، والبروتينات موجودة حتى يتمكن جسمنا من القيام بكل الأمور الصحيحة. في هذا الجزء، سنقوم بشرح خطوة بخطوة لإحدى البروتوكولات الأكثر فضولية التي يستخدمها الباحثون: النسخ المختبري (In vitro transcript). وكل ما يعنيه هو أن العلماء يأخذون RNA ويصنعون كميات كبيرة منه في أنبوب اختبار (وهو إناء صغير تستخدمه المختبرات)، فلنبدأ إذن بكل خطوة هنا.
بعد إكمالي للمشاركة السابقة، أدركت أن الأخيرة قد تكون كانت قليلة الإثارة - انضم إلى المرح في المختبر الرطب؛ لذلك، وبما أنك الآن على متن القطار الممتع (صحيح صنع RNA): ما هي المواد الكيميائية التي ستحتاجها لعملك التفاعلي؟ لتحقيق ذلك، سنحتاج إلى بروتينات خاصة تُدعى الإنزيمات، وهي متطابقة مع منتج Yaohai تصنيع Midkine إعادة التركيب إنها تُحفّز التفاعلات الكيميائية، هذه الإنزيمات تساعد في عملية التحلل. الآن نحن بحاجة فقط إلى قطعة من الحمض النووي (DNA). هذه الوظيفة هي الحمض النووي الذي نستخدمه كقالب لنسخ الحمض النووي الريبوزي (RNA). كما أننا نحتاج إلى تسلسل تنظيمي إضافي في RNA، ألا وهو النوكليوتيدات. هذه النوكليوتيدات تشبه القطع الصغيرة التي يجب جمعها لصنع RNA. نحن نستخدم أيضًا أنابيب قصيرة ذات قطر صغير لتحضير تقييم النكهة في التجارب الأخرى. وأخيرًا، نحتاج إلى جهاز (مُدورة حرارية) يضمن أن réactions تكون عند درجة الحرارة المناسبة. بالإضافة إلى ذلك، قد نحتاج إلى بعض الأدوات والمنتجات لأي تجارب معينة.
إذن هنا تختلف الأمور، لدينا سلسلة RNA واحدة ونريد الآن الحصول على المزيد من النسخ منها، أيضًا تصنيع لقاحات VLP المرتبطة تم تطويرها بواسطة ياوهاي. الطريقة لتحقيق ذلك هي باستخدام إنزيم آخر؛ البوليميراز RNA T7. هذا الإنزيم الفريد، على سبيل المثال، يعترف بمناطق معينة داخل RNA. مثل مخروط القفز لصنع المزيد من نسخ RNA أثناء الاستمرار. في هذه المرحلة، سيتم إضافة المزيد إلى سلسلة RNA بواسطة البوليميراز RNA T7 حتى يتم إنشاء كمية كبيرة من النسخ، أو حتى نخبره بالتوقف.
بعد أن نقوم بعزل الحمض النووي الريبي RNA قدر الإمكان، تصفح لأسفل لمعرفة كيفية تنظيفه وتخزينه للاستخدام المستقبلي. رودس: بعض هذه الطرق تكون أكثر تطرفاً من حيث عزل RNA - لن تستخدمها دائماً، لكن أحياناً تحتاج لها في أنواع معينة من التجارب. بمجرد أن يصبح RNA خالياً من أي ملوثات يمكن تخزينه مجمداً. بهذه الطريقة يكون آمناً ويمكننا استخدامه لاحقاً في مختلف التجارب.
جودة المادة الأساسية: تأكد من أن قالب DNA الخاص بك نظيف وليس محترقاً بالكامل. يمكنك أيضاً إضافة نوكليوتيدات مُعاد تكوينها حديثاً وانزيمات تم إذابتها للتو لتحصل على فرصة أكبر لنجاح التجربة.
ضبط الشروط: تعمل جميع الإنزيمات والنوكليوتيدات بشكل أفضل عند درجة حرارة وpH محددين داخل جسمك وكذلك داخل جسم Yaohai MRNA Florescent أحمر . الآن قم بتعديل التفاصيل الدقيقة بين الشروط حتى تصل إلى المفتاح المناسب لتجربتك الفريدة.
إن إنزيم الترانسكريبتاز العكسي هو إنزيم غير عادي، لأنه يقوم بصنع نسخة من الحمض النووي (DNA) من جزيء الحمض النووي الريبوزي (RNA). استخدمنا كلًا من DNAs وقالب DNA (cDNA) كمدخلات لطريقتنا المعملية لإنتاج RNA. ومع ذلك، في معظم التجارب سيرغب العلماء في تحويل الحمض النووي (DNA) إلى حمض نووي ريبوزي (RNA). الترجمة العكسية هي ما يُطلق عليه هذا الاسم نفسه. اختبار توزيع poly-A للـ mRNA تم صنعه بواسطة Yaohai. إنه أداة لا غنى عنها في جميع أنحاء العلوم - من دراسة جزيئات RNA داخل الخلايا إلى إنتاج سلاسل الحمض النووي المplementary لأغراض التجارب الإضافية.
تجارب الحياة الواقعية التي يتم فيها استخدام RNA كأحد الأدوات الجزيئية الأكثر شيوعًا، إلى جانب منتج Yaohai. إنتاج لقاح VLP في E. coli الاختبارات الكمية: يمكن لهذه الاختبارات كشف كمية أي جزيء معين موجود في العينة. على سبيل المثال، يمكن للعلماء تكوين تحضير نسخ RNA في المختبر المستخرج من جين مستهدف داخل الخلية. يمكن بعد ذلك إجراء التحليل للكشف عن تلك النسخ، وفي حالة البحث عن RNA، يمكن تشغيل تفاعل سلسلة البوليميراز (PCR) لتكبير تلك النسخ في العينة. هذا يجعل من الممكن للعلماء رؤية كيفية تعبير الجينات على الخلايا، بل ويجعل بعض الاختبارات عالية الإنتاجية ممكنة للغاية، مثل وجود عدوى بكتيرية أو فيروسية، وتشخيص الأمراض الوراثية.
إن فيترو ترانسクリبت بروتوكول هي رائدة في مجال CDMO للمنتجات الحيوية الدقيقة. تركيزنا كان دائمًا على اللقاحات والعلاجات المicrobial المنتجة التي تناسب إدارة الصحة البشرية، البيطرية وكذلك صحة الحيوانات الأليفة. لدينا أكثر منصات RD تقدمًا وتقنيات التصنيع التي تغطي العملية بأكملها بدءًا من تطوير سلالات دقيقة وبنوك الخلايا، إلى تطوير العمليات والطرق، وحتى الإنتاج السريري والتجاري مما يضمن تسليم حلول مبتكرة بنجاح. مع مرور الوقت، تراكم لدينا معرفة واسعة حول معالجة المواد الحيوية القائمة على الكائنات الدقيقة. تم إكمال أكثر من 200 مشروع بنجاح، ونساعد عملائنا على الامتثال للوائح مثل US FDA و EU EMA. نساعد أيضًا في التنقل عبر TGA الأسترالية و NMPA الصينية. يسمح لنا خبرتنا المهنية وخبرتنا الواسعة بالاستجابة السريعة لاحتياجات السوق وتقديم خدمات CDMO مخصصة.
لدى Yaohai Bio-Pharma خبرة في إنتاج الأدوية البيولوجية المصنوعة من بروتوكول النسخ الاصطناعي. نقدم حلولًا مخصصة للبحث والتطوير والإنتاج مع التأكد من عدم وجود أي مخاطر. كنا متورطين في أنماط متنوعة مثل لقاحات الوحدات الفرعية المركبة، والهرمونات الببتيدية، والسيتوكينات، وعوامل النمو، والمضادات الجسدية ذات المجال الواحد، والإنزيمات، وDNA البلازميدي، والمُرَنَة RNA والعديد من المنتجات الأخرى. نحن متخصصون في العديد من الكائنات الدقيقة، بما في ذلك سكرتير الخلايا الداخلية والخارجية للخميرة (الإنتاج يصل إلى 15 جم/لتر) وكذلك البكتيريا القابلة للذوبان داخل الخلية وجسم الشمولية (الإنتاج يصل إلى 10 جم/لتر). كما قمنا بإنشاء منصة تخمير BSL-2 لإنتاج اللقاحات البكتيرية. نركز على تحسين العمليات، زيادة إنتاج المنتجات وتقليل تكاليف الإنتاج. باستخدام فريق تقني قوي، يمكننا ضمان تسليم المشاريع بشكل سريع وموثوق مما يساعد على إدخال منتجك إلى السوق بشكل أسرع.
ياوهاي بيو-فارما، واحدة من أكبر 10 مصنعي المنتجات البيولوجية، تخصصت في التخمير المجهرى. لقد بنينا منشأة حديثة ذات قدرات بحث وتطوير قوية ومعدات متقدمة. لدينا خمس خطوط تصنيع المواد الدوائية التي تتوافق مع متطلبات GMP للتخمير والتنقية الميكروبية. كما أن لدينا خطين آليين لإكمال التعبئة للكرtridges، الزجاجات وحقن مسبقة التعبئة. تتراوح أحجام التخمير المتاحة بين بروتوكول النسخ الرباعي داخل المختبر إلى 2000 لتر. فيما تتراوح مواصفات تعبئة الزجاجة من 1 مل إلى 25 مل. أما بالنسبة لتعبئة الحقن المسبقة التعبئة أو الكرtridges فهي تتراوح تقريبًا من 1-3 مل. منشأتنا الإنتاجية conforme لمعايير cGMP تضمن توفير العينات السريرية والمنتجات التجارية بشكل مستمر. مصنعنا ينتج الجزيئات الكبيرة التي يتم شحنها حول العالم.
ياوهاي بيوفارما هي واحدة من أكبر 10 شركات CDMO الميكروبية التي تدمج بروتوكول النسخ في المختبر وكذلك الشؤون التنظيمية. لدينا نظام إدارة جودة يتماشى مع معايير GMP الحالية واللوائح العالمية. فريق خبراء تنظيمي لدينا على دراية بالأنظمة التنظيمية العالمية لتسريع إطلاق المنتجات البيولوجية. نحن نضمن عمليات إنتاج قابلة للتعقب، ومنتجات ذات جودة عالية، مع الالتزام بقواعد FDA الأمريكية وEMA الأوروبية. كما أن TGA الأسترالية وNMPA الصينية راضية أيضًا. لقد نجحت ياويهاي بيوفارما في اجتياز التدقيق الميداني لشخص المؤهل (QP) في الاتحاد الأوروبي لنظام الجودة الخاص بنا حسب معايير GMP وللمصنع الخاص بنا. بالإضافة إلى ذلك، قد مررنا بنجاح أول تدقيقات الحصول على شهادات أنظمة إدارة الجودة ISO9001، وأنظمة إدارة البيئة ISO14001، وأنظمة إدارة الصحة والسلامة المهنية ISO45001.