เปิดเผยปริมาณที่เหมาะสมที่สุดของ RNA ตัวรายงาน eGFP

ในทางชีววิทยาเชิงโมเลกุลและการชีวเทคโนโลยี โปรตีนที่เรืองแสงสีเขียวแบบเพิ่มประสิทธิภาพ (eGFP) ได้กลายเป็นยีนตัวบ่งชี้ที่สำคัญเนื่องจากความสามารถในการสร้างแสงเรืองสีเขียวสดใสที่ความยาวคลื่น 509 นาโนเมตร โปรตีนนี้ซึ่งถูกแยกออกมาจากแมงกะพรุน Aequorea victoria เดิม เป็นตัวชี้วัดการตรวจจับโดยตรงในวัฒนธรรมเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม ช่วยให้สามารถติดตามและปรับปรุงประสิทธิภาพของการ transfected อย่างไรก็ตาม คำถามที่เกิดขึ้นคือ: ขนาดยาที่เหมาะสมของ eGFP reporter RNA คือเท่าใด เพื่อให้ได้ระดับการแสดงออกตามที่ต้องการ?

งานวิจัยแสดงให้เห็นว่าประสิทธิภาพของ eGFP reporter RNA ขึ้นอยู่กับปริมาณที่ใช้อย่างมาก โดยเฉพาะในบริบทของ RNA วงกลม (circRNA) และ self-amplifying mRNA (saRNA) ระบบ การศึกษาที่ดำเนินการโดยทีมของ Katrien Remaut ที่คณะ Nanomedicine Research Group แห่งมหาวิทยาลัยเกนต์ ได้เน้นย้ำถึงความสัมพันธ์ที่ซับซ้อนระหว่างปริมาณ saRNA และประสิทธิภาพของการแปลรหัสในเซลล์จอประสาทตา พวกเขาค้นพบว่าปริมาณ saRNA ที่ต่ำกว่าระดับที่กระตุ้นภูมิคุ้มกันตามธรรมชาติ จะช่วยให้มีการสร้างโปรตีนอย่างมีประสิทธิภาพ สิ่งนี้ชี้ให้เห็นถึงความสำคัญของการควบคุมปริมาณอย่างแม่นยำในการใช้ประโยชน์จากศักยภาพเต็มที่ของ eGFP reporter RNA

ในการประยุกต์ใช้งานจริง ความเข้มข้นของ mRNA eGFP ที่ใช้บ่อยสามารถอยู่ในช่วงระหว่างไมโครกรัม (μg) ถึงนาโนกรัมต่อลิตร (ng/μL) ตัวอย่างเช่น ในการทดลองการ transfected ปริมาณที่ใช้ตั้งแต่ 0.05 μg ถึง 0.5 μg ของ mRNA eGFP แสดงให้เห็นถึงระดับการแสดงออกที่สำคัญในเซลล์หลากหลายชนิด โดยเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ที่แสดงผลอาจสูงถึง 99-100% ในบางกรณี นอกจากนี้ เมื่อใช้ปริมาณต่ำกว่า 0.1 μg saRNA มีการแสดงออกที่ดีกว่า mRNA แบบเส้นตรง ซึ่งแสดงถึงข้อได้เปรียบของการขยายตัวเอง

ความสามารถหลากหลายของ RNA ตัวชี้วัด eGFP ไม่เพียงแค่มาจากแสงเรืองแสงที่สว่างและคงที่ แต่ยังมาจากความสามารถในการปรับตัวให้เหมาะสมกับการตั้งค่าการทดลองที่แตกต่างกัน นักวิจัยสามารถปรับปริมาณตามความต้องการเฉพาะ เพื่อควบคุมระดับการแสดงออกของยีนอย่างแม่นยำ สิ่งนี้ทำให้ eGFP เป็นเครื่องมือที่มีค่ามากสำหรับการศึกษาฟังก์ชันของยีน การติดตามสภาพของเซลล์ และการปรับปรุงโปรโตคอลการ transfected

สรุปได้ว่า ขนาดยาที่เหมาะสมที่สุดของ eGFP reporter RNA ขึ้นอยู่กับบริบทของการทดลองและความต้องการผลลัพธ์ โดยการเลือกขนาดยาอย่างระมัดระวัง นักวิจัยสามารถใช้ศักยภาพเต็มที่ของยีนรายงานที่หลากหลายนี้ เพื่อเพิ่มความเข้าใจเกี่ยวกับกลไกระดับโมเลกุลและผลักดันนวัตกรรมในชีวเทคโนโลยี

Yaohai Bio-Pharma เป็นบริษัทแรกและใหญ่ที่สุดที่เชี่ยวชาญด้านระบบการแสดงออกของจุลินทรีย์ CRDMO ในภูมิภาคจีนใหญ่ เรามุ่งมั่นที่จะตอบสนองความต้องการทางคลินิกและการพาณิชย์ของลูกค้าทั่วโลกสำหรับยาชีวภาพ วัคซีน และการตรวจวินิจฉัยสำหรับมนุษย์และสัตวแพทย์

เราได้ดำเนินการค้นหาพันธมิตรระดับโลกทั้งหน่วยงานหรือบุคคลทั่วไปอย่างแข็งขัน เราเสนอค่าตอบแทนที่แข่งขันได้มากที่สุดในอุตสาหกรรม หากคุณมีคำถามใด ๆ กรุณาติดต่อเราได้โดยตรง: [email protected]