การเปิดเผยปริมาณที่เหมาะสมของ eGFP Reporter RNA

ในชีววิทยาโมเลกุลและเทคโนโลยีชีวภาพ โปรตีนเรืองแสงสีเขียวที่ปรับปรุงแล้ว (eGFP) ได้กลายมาเป็นยีนรายงานที่สำคัญเนื่องจากความสามารถในการสร้างแสงสีเขียวสดใสที่ 509 นาโนเมตร โปรตีนนี้ซึ่งแยกได้จากแมงกะพรุน Aequorea victoria ในตอนแรก เป็นเครื่องหมายตรวจจับโดยตรงในวัฒนธรรมเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม ช่วยให้ติดตามและเพิ่มประสิทธิภาพการถ่ายโอนยีนได้ดีขึ้น อย่างไรก็ตาม คำถามที่เกิดขึ้นคือ ปริมาณที่เหมาะสมของ eGFP reporter RNA เพื่อให้ได้ระดับการแสดงออกที่ต้องการคือเท่าใด

งานวิจัยแสดงให้เห็นว่าประสิทธิภาพของ eGFP reporter RNA ขึ้นอยู่กับปริมาณยาเป็นอย่างมาก โดยเฉพาะอย่างยิ่งในบริบทของระบบ circular RNA (circRNA) และระบบ self-amplifying mRNA (saRNA) การศึกษาที่ดำเนินการโดยทีม Katrien Remaut จากกลุ่มวิจัย Nanomedicine ของมหาวิทยาลัย Ghent ได้เน้นย้ำถึงความสัมพันธ์ที่ซับซ้อนระหว่างปริมาณ saRNA และประสิทธิภาพในการแปลในเซลล์จอประสาทตา พวกเขาค้นพบว่า saRNA ปริมาณต่ำ ซึ่งต่ำกว่าเกณฑ์สำหรับการกระตุ้นภูมิคุ้มกันโดยกำเนิด จะช่วยให้การแสดงออกของโปรตีนมีประสิทธิภาพมากขึ้น ซึ่งเน้นย้ำถึงความสำคัญของการควบคุมปริมาณยาที่แม่นยำในการใช้ประโยชน์จากศักยภาพทั้งหมดของ eGFP reporter RNA

ในทางปฏิบัติ ความเข้มข้นของ mRNA ของ eGFP ที่ใช้กันทั่วไปสามารถอยู่ในช่วงตั้งแต่ไมโครกรัม (μg) ถึงนาโนกรัมต่อไมโครลิตร (ng/μL) ตัวอย่างเช่น ในการทดลองถ่ายโอนยีน ปริมาณตั้งแต่ 0.05 μg ถึง 0.5 μg ของ eGFP mRNA ได้รับการพิสูจน์แล้วว่าให้ระดับการแสดงออกที่สำคัญในเซลล์ประเภทต่างๆ โดยเปอร์เซ็นต์เซลล์เชิงบวกอาจสูงถึง 99-100% ในบางกรณี โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ในปริมาณต่ำกว่า 0.1 μg saRNA แสดงให้เห็นระดับการแสดงออกที่เหนือกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับ mRNA เชิงเส้น ซึ่งแสดงให้เห็นถึงข้อได้เปรียบในการขยายตัวเอง

ความคล่องตัวของ eGFP reporter RNA นั้นไม่ได้มีแค่ความสว่างและเสถียรภาพของฟลูออเรสเซนต์เท่านั้น แต่ยังสามารถปรับใช้กับการทดลองต่างๆ ได้อีกด้วย นักวิจัยสามารถปรับปริมาณยาให้เหมาะกับความต้องการเฉพาะของตนเองได้ ทำให้ควบคุมระดับการแสดงออกของยีนได้อย่างแม่นยำ คุณสมบัตินี้ทำให้ eGFP เป็นเครื่องมือที่มีค่าอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาการทำงานของยีน การตรวจสอบชะตากรรมของเซลล์ และการปรับโปรโตคอลการถ่ายโอนยีนให้เหมาะสมที่สุด

สรุปได้ว่าขนาดยาที่เหมาะสมของ eGFP reporter RNA นั้นขึ้นอยู่กับบริบทของการทดลองและผลลัพธ์ที่ต้องการเป็นอย่างมาก โดยการเลือกขนาดยาที่เหมาะสมอย่างรอบคอบ นักวิจัยสามารถใช้ประโยชน์จากศักยภาพทั้งหมดของยีน reporter ที่มีประโยชน์หลากหลายนี้ ซึ่งจะช่วยให้เราเข้าใจกลไกของโมเลกุลได้ดีขึ้น และขับเคลื่อนให้เกิดนวัตกรรมในด้านเทคโนโลยีชีวภาพ

Yaohai Bio-Pharma เป็นผลิตภัณฑ์ชีวภาพรายแรกและรายใหญ่ที่สุดที่มุ่งเน้นที่ระบบการแสดงออกของจุลินทรีย์ (CRDMO) ในจีนแผ่นดินใหญ่ เรามุ่งมั่นที่จะตอบสนองความต้องการทางคลินิกและเชิงพาณิชย์ของลูกค้าทั่วโลกสำหรับยาชีวภาพ วัคซีน และการวินิจฉัยโรคสำหรับมนุษย์และสัตวแพทย์

นอกจากนี้เรายังกระตือรือร้นในการแสวงหาพันธมิตรระดับสถาบันหรือรายบุคคลทั่วโลก เราเสนอค่าตอบแทนที่แข่งขันได้มากที่สุดในอุตสาหกรรม หากคุณมีคำถามใด ๆ โปรดติดต่อเรา: [email protected]