เทมเพลต mRNA Plasmid: องค์ประกอบสำคัญและการออกแบบกลยุทธ์

การสร้าง mRNA สำหรับวัคซีนหรือการรักษาเริ่มต้นจากพลาสมิดเทมเพลตที่ออกแบบอย่างดี นี่คือคู่มือย่อ ๆ เกี่ยวกับองค์ประกอบสำคัญและวิธีที่พวกมันถูกปรับให้เหมาะสมสำหรับความสำเร็จ

โปรเมอเรเตอร์: จุดเริ่มต้นของการทรานสคริปชัน

โปรเมอเรเตอร์ T7 เป็นตัวเลือกยอดนิยมสำหรับการเริ่มต้นการสังเคราะห์ mRNA ลำดับคลาสสิกของมัน “TAATACGACTCACTATAGGG” ช่วยให้มีการทรานสคริปชันอย่างมีประสิทธิภาพ ในเวลาต่อมา นักวิทยาศาสตร์ได้พัฒนาตัวแปรต่าง ๆ เช่น GG, AG และ AT/AU เพื่อใช้งานกับระบบการใส่หมวกขั้นสูง เช่น CleanCap หรือแพลตฟอร์ม RNA ที่สามารถขยายตัวเองได้

การตัดเชิงเส้น: การตัดพลาสมิดเพื่อความแม่นยำ

เพื่อหยุดไม่ให้พลาสมิดทรานสคริปต์ไปเรื่อย ๆ มันจำเป็นต้องถูกตัดที่ตำแหน่งเฉพาะ เอนไซม์ชนิด Type IIS เช่น BspQⅠ หรือ BsaⅠ เหมาะสมสำหรับงานนี้มาก เพราะพวกมันจะตัด DNA นอกลำดับการรู้จำ ทำให้ไม่มีเศษส่วนใดเหลืออยู่และรักษา polyA tail ที่สำคัญไว้

แบบแปลน mRNA: องค์ประกอบพื้นฐานของความสำเร็จ

ลำดับ mRNA ประกอบด้วยหมวก 5', ภูมิภาคที่ไม่ถอดรหัส (UTRs), ลำดับการถอดรหัส (CDS), และหาง polyA นี่คือวิธีการออกแบบแต่ละส่วน:

• UTRs : ส่วนนี้สามารถยืมมาจากยีนตามธรรมชาติที่แสดงออกอย่างมาก (เช่น จากไวรัส) หรือออกแบบเองโดยใช้ขั้นตอนวิธีขั้นสูงเพื่อประสิทธิภาพที่ดีขึ้น
• CDS : นักวิทยาศาสตร์ออกแบบลำดับโปรตีนก่อน แล้วปรับปรุงรหัส DNA เพื่อการแสดงผลที่มีประสิทธิภาพ
• PolyA Tail : ชุดของอะดีนีน 100–120 ตัว หรือแบบแบ่งส่วน เช่น 30A + Linker + 70A เพื่อให้มั่นใจว่า mRNA จะคงทนและทำงานได้ดี

ด้วยการเข้าใจองค์ประกอบเหล่านี้ นักวิจัยสามารถสร้างแม่พิมพ์ mRNA ที่ทรงพลังสำหรับทุกอย่างตั้งแต่วัคซีนไปจนถึงการบำบัดขั้นสูงในอนาคตของวงการแพทย์เริ่มต้นจากตรงนี้!

ยาโอไฮ ไบโอ-ฟาร์มา เป็นบริษัทแพลตฟอร์มที่เชี่ยวชาญในการให้บริการระบบการแสดงออกของจุลชีพ โดยอาศัยความเชี่ยวชาญกว่าสิบปี ยาโอไฮได้พัฒนาเทคโนโลยีครบวงจรที่สอดคล้องกับ GMP สำหรับการสังเคราะห์ mRNA แบบเส้นตรงและวงกลม มอบผลิตภัณฑ์ RNA คุณภาพสูงที่ครอบคลุมตั้งแต่การออกแบบและปรับแต่งลำดับ การสังเคราะห์ยีน การถอดรหัสในหลอดทดลอง (IVT) การทำเป็นวงกลม การกรอง RNA และการห่อหุ้ม LNP

เราได้ดำเนินการค้นหาพันธมิตรระดับโลกทั้งหน่วยงานหรือบุคคลทั่วไปอย่างแข็งขัน เราเสนอค่าตอบแทนที่แข่งขันได้มากที่สุดในอุตสาหกรรม หากคุณมีคำถามใด ๆ กรุณาติดต่อเราได้โดยตรง: [email protected]