การสนับสนุนวิธีการดัดแปลง RNA ของ Reporter

เมื่อต้องเลือกวิธีการดัดแปลง mRNA ของรีพอร์ตเตอร์ที่เหมาะสม ไม่มีคำตอบที่ชัดเจน เนื่องจากแต่ละวิธีและยีนรีพอร์ตเตอร์มีข้อดีและสถานการณ์ที่สามารถใช้ได้แตกต่างกัน ต่อไปนี้เป็นวิธีการดัดแปลง mRNA และยีนรีพอร์ตเตอร์ทั่วไปบางส่วน พร้อมด้วยลักษณะเฉพาะและความเหมาะสม

วิธีการดัดแปลง mRNA

เมทิลเลชั่น:

1. เอ็ม6เอ:เกี่ยวข้องกับเสถียรภาพของ mRNA การตัดต่อ การแปล และการประมวลผล miRNA ความท้าทายในการตรวจจับได้แก่ การคัดเลือกและการระบุตำแหน่งของแอนติบอดี
2. 5' แคป นาโนเมตร: เพิ่มความเสถียร การต่อกัน โพลีอะดีไนเลชัน และการส่งออกนิวเคลียส ช่วยแยกอาร์เอ็นเอของตนเองจากอาร์เอ็นเอจากภายนอก
3. การสังเคราะห์เทียม: เปลี่ยนแปลงโคดอน เพิ่มความเสถียร และตอบสนองต่อความเครียด เร่งปฏิกิริยาด้วยซูโดยูริดีนซินเทส

การแนะนำนิวคลีโอไทด์ที่ไม่ใช่จากธรรมชาติ:

1. นำมาใช้ระหว่างการถอดรหัสโดยใช้กลยุทธ์การดัดแปลงทางเคมีแบบคู่ ซึ่งจะช่วยเพิ่มเสถียรภาพ ประสิทธิภาพ และการแสดงออกของโปรตีน

ยีนนักข่าว

1. ยีนโปรตีนเรืองแสงสีเขียว (GFP):ข้อดี: ตรวจจับได้ง่าย มีคุณสมบัติการเรืองแสงที่เสถียร ไม่เป็นพิษต่อเซลล์ เหมาะสำหรับการถ่ายภาพเซลล์ที่มีชีวิต ข้อเสีย: ความเข้มของการเรืองแสงจำกัด
2. โปรตีนเรืองแสงสีเขียวเสริมประสิทธิภาพ (eGFP):ข้อดี: มีความสว่างมากกว่า GFP ชนิดป่าถึง 6 เท่า ทำให้เหมาะสมกว่าในการใช้เป็นยีนรายงานสำหรับศึกษาการแสดงออกของยีน การควบคุม การแบ่งตัวของเซลล์ การแปลตำแหน่งและการขนส่งโปรตีนภายในสิ่งมีชีวิต
3. โปรตีนเรืองแสงสีแดง (เช่น mCherry):ข้อดี: มีความยาวคลื่นการกระตุ้นและการแผ่รังสีที่ยาวขึ้น ส่งผลให้พื้นหลังน้อยลงในระหว่างการถ่ายภาพภายในเซลล์ มีความสว่างของฟลูออเรสเซนต์และความคงตัวของแสงที่ยอดเยี่ยม และความเป็นพิษต่อเซลล์ที่ต่ำ ข้อเสีย: อาจไม่ค่อยได้ใช้เหมือนกับ GFP ในสภาวะการทดลองบางอย่าง
4. หิ่งห้อยลูซิเฟอเรส:ข้อดี: เมื่อมี ATP ไอออนแมกนีเซียม และออกซิเจน มันสามารถเร่งปฏิกิริยาออกซิเดชันของลูซิเฟอรินให้เป็นออกซิลูซิเฟอริน ซึ่งจะทำให้เกิดการเรืองแสง เหมาะสำหรับใช้เป็นตัวควบคุมเพื่อศึกษาประสิทธิภาพการแปลของยีนเป้าหมายในเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม ความสามารถในการมีชีวิตของเซลล์ และการทดสอบการถ่ายภาพในร่างกาย

สรุป

เมื่อต้องเลือกวิธีการดัดแปลง mRNA ของรีพอร์เตอร์ที่เหมาะสม จะต้องพิจารณาจากวัตถุประสงค์ในการทดลอง ประวัติการวิจัย และเงื่อนไขการทดลองที่เฉพาะเจาะจง ตัวอย่างเช่น หากต้องการความไวสูง eGFP อาจเป็นตัวเลือกที่ดีกว่า หากต้องการการถ่ายภาพที่ความยาวคลื่นที่ยาวขึ้นเพื่อลดการรบกวนพื้นหลัง โปรตีนเรืองแสงสีแดง เช่น mCherry อาจเหมาะสมกว่า นอกจากนี้ สามารถเลือกวิธีการดัดแปลงที่เกี่ยวข้องได้ตามความต้องการเฉพาะของ mRNA (เช่น การเพิ่มเสถียรภาพ การปรับปรุงประสิทธิภาพการแปล)

ในฐานะ CRDMO ด้านชีวจุลินทรีย์แห่งแรกและใหญ่ที่สุดในจีนแผ่นดินใหญ่ Yaohai Bio-Pharma นำเสนอโซลูชันแบบครบวงจรที่ปรับแต่งได้ตามความต้องการหรือบริการแบบแยกส่วนตั้งแต่การสังเคราะห์ RNA การออกแบบและการสร้างสายพันธุ์ การพัฒนาขั้นตอนต้นน้ำและปลายน้ำ ไปจนถึงการผลิตสารออกฤทธิ์ในระดับ GMP หรือที่ไม่ใช่ GMP และบริการบรรจุและตกแต่งสำหรับรูปแบบต่างๆ เช่น mRNA, circRNA, plasmid RNA, โปรตีนรีคอมบิแนนท์, เปปไทด์, เอนไซม์, แอนติบอดีโดเมนเดี่ยว และ VLP เพื่อการใช้ในมนุษย์และสัตวแพทย์

นอกจากนี้ Yaohai Bio-Pharma ยังแสวงหาพันธมิตรระดับสถาบันหรือระดับบุคคลทั่วโลกอย่างแข็งขัน และเสนอค่าตอบแทนที่แข่งขันได้มากที่สุดในอุตสาหกรรม หากคุณมีคำถามใดๆ โปรดติดต่อเราได้ที่: [email protected]