สนับสนุนวิธีการแก้ไข Reporter RNA

เมื่อเลือกวิธีการแก้ไข mRNA ของผู้รายงานว่าแบบใดเหมาะสมกว่า ไม่มีคำตอบที่แน่นอน เพราะแต่ละวิธีและยีนผู้รายงานมีข้อดีและสถานการณ์ที่เหมาะสมเป็นของตัวเอง นี่คือวิธีการแก้ไข mRNA และยีนผู้รายงานทั่วไปพร้อมกับลักษณะเฉพาะและความเหมาะสมของแต่ละอย่าง

วิธีการแก้ไข mRNA

การเมธิเลชัน:

1. m6A : เกี่ยวข้องกับเสถียรภาพของ mRNA การตัดต่อ การแปลรหัส และการประมวลผล miRNA ความท้าทายในการตรวจจับรวมถึงการเลือกแอนติบอดีและการระบุตำแหน่ง
2. 5' Cap Nm : เพิ่มเสถียรภาพ การตัดต่อ การเพิ่มหางโพลีอะเดนิล และการส่งออกนิวเคลียส ช่วยแยก RNA ของตนเองออกจาก RNA ของสิ่งแปลกปลอม
3. พซูโดยูริดิลเลชัน : เปลี่ยนโคดอน เพิ่มเสถียรภาพ และตอบสนองต่อความเครียด โดยได้รับการกระตุ้นจากเอนไซม์ pseudouridine synthases

การนำนิวคลีโอไทด์ที่ไม่ธรรมชาติมาใช้:

1. นำเสนอระหว่างการถอดรหัสโดยใช้กลยุทธ์การดัดแปลงทางเคมีสองแบบ เพื่อเพิ่มความเสถียร ประสิทธิภาพ และการแสดงออกของโปรตีน

ยีนรายงานผล

1. ยีนโปรตีนเรืองแสงสีเขียว (GFP) : ข้อดี: ตรวจจับง่าย มีคุณสมบัติการเรืองแสงที่เสถียร ไม่มีพิษต่อเซลล์ เหมาะสำหรับการถ่ายภาพเซลล์ที่ยังมีชีวิต ข้อเสีย: ความเข้มของแสงเรืองอาจจำกัด
2. โปรตีนเรืองแสงสีเขียวที่ได้รับการปรับปรุง (eGFP) : ข้อดี: สว่างกว่า GFP ชนิดป่ามากกว่า 6 เท่า ทำให้เหมาะสมกว่าสำหรับใช้เป็นยีนรายงานในการศึกษาการแสดงออกของยีน การควบคุม การแบ่งเซลล์ และการระบุตำแหน่งและการขนส่งโปรตีนภายในสิ่งมีชีวิต
3. โปรตีนเรืองแสงสีแดง (เช่น mCherry) : ข้อดี: มีความยาวคลื่นการกระตุ้นและปล่อยแสงที่ยาวกว่า ส่งผลให้มีพื้นหลังต่ำในระหว่างการถ่ายภาพภายในเซลล์ มีความสว่างและความเสถียรของแสงเรืองที่ยอดเยี่ยม และมีพิษต่อเซลล์น้อยกว่า ข้อเสีย: อาจไม่ถูกใช้งานอย่างแพร่หลายเท่ากับ GFP ในบางเงื่อนไขการทดลอง
4. ลูซิเฟสจากแมลงวัน : ข้อดี: ในกรณีที่มี ATP ไอออนแมกนีเซียม และออกซิเจน มันสามารถกระตุ้นการออกซิเดชันของลูซิเฟอรินให้กลายเป็นออกซิลูซิเฟอริน โดยปล่อยแสงไบโอลูมิเนสเซนส์ออกมาได้ เหมาะสำหรับใช้เป็นตัวควบคุมในการศึกษาประสิทธิภาพของการแปลรหัสยีนเป้าหมายในเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม การทดสอบความเป็นอยู่ของเซลล์ และการทดลองถ่ายภาพในร่างกาย

สรุป

เมื่อเลือกว่าจะใช้วิธีการแก้ไข mRNA แบบใดให้เหมาะสมขึ้นอยู่กับวัตถุประสงค์เฉพาะของการทดลอง พื้นหลังการวิจัย และเงื่อนไขการทดลอง เช่น หากต้องการความไวสูง eGFP อาจเป็นทางเลือกที่ดีกว่า หากจำเป็นต้องถ่ายภาพด้วยคลื่นความยาวมากกว่าเพื่อลดการรบกวนจากพื้นหลัง โปรตีนสีแดงที่ให้แสงฟลูออเรสเซนต์ เช่น mCherry อาจเหมาะสมกว่า นอกจากนี้ ตามความต้องการเฉพาะของการแก้ไข mRNA (เช่น การเพิ่มเสถียรภาพ การปรับปรุงประสิทธิภาพการแปลรหัส) สามารถเลือกวิธีการแก้ไขที่เหมาะสมได้

ในฐานะผู้ให้บริการ CRDMO ชีวภัณฑ์จุลชีพรายแรกและรายใหญ่ที่สุดในจีนแผ่นดินใหญ่ Yaohai Bio-Pharma มอบโซลูชันแบบครบวงจรที่ปรับแต่งได้หรือบริการแยกเป็นอิสระตั้งแต่การสังเคราะห์ RNA, การวิศวกรรมและการสร้างเชื้อพันธุ์, การพัฒนากระบวนการทางท้ายน้ำและก่อนน้ำ, การผลิตสารยาตามมาตรฐาน GMP หรือ non-GMP และบริการบรรจุขวดสำเร็จรูปสำหรับรูปแบบต่างๆ เช่น mRNA, circRNA, พลาสมิด RNA, โปรตีน рекомбинант, เปปไทด์, เอนไซม์, แอนติบอดีโดเมนเดียว และ VLPs สำหรับใช้ในมนุษย์และสัตวแพทย์

Yaohai Bio-Pharma กำลังมองหามาตรฐานหรือพันธมิตรรายบุคคลทั่วโลกอย่างแข็งขัน และเสนอค่าตอบแทนที่แข่งขันได้มากที่สุดในอุตสาหกรรม หากท่านมีคำถามใด ๆ กรุณาติดต่อเราได้ทุกเวลา: [email protected]