mRNK češnje izraža fluorescentni protein, mCherry, prvotno izpeljan iz DsRed, proteina, ki ga najdemo v Discosoma sp. Protein mCherry pokaže monomerni fluorofor, ko je izpostavljen svetlobi z vrhom emisij pri 610 nm. Ta mRNA se običajno uporablja kot pozitivna kontrola pri transfekciji in razvoju dostavnih sistemov.
eGFP mRNA izraža izboljšan zeleni fluorescentni protein (eGFP), prvotno pridobljen iz meduze, Aequorea victoria. Protein eGFP kaže svetlo zeleno fluorescenco, ko je izpostavljen svetlobi v modrem do ultravijoličnem območju, z vrhom emisij pri 509 nm. eGFP mRNA se običajno uporablja kot pozitivna kontrola pri transfekciji in razvoju dostavnih sistemov.
mRNA mCherry-eGFP soizraža oboje mCherry in eGFP.
Yaohai Bio-Pharma ponuja nespremenjen ali spremenjen N1Ψ mRNA mCherry-eGFP, s strukturo Cap1, optimiziranimi kodoni, zasnovanim UTR in 110nt polyA repom, za izboljšanje stabilnosti mRNA in učinkovitosti prevajanja.
Izdelek
mRNA mCherry-eGFP, Cap1, poli(A) rep, nemodificirana ali modificirana mRNA
Podrobnosti
| Izdelek |
mRNA mCherry-eGFP
|
| Mačka. Ne |
mP004 |
| Vsebnost RNA |
100 µg~10 mg (OD260) |
| Čistost |
A260 / A280 |
| Identifikacija in čistost |
Elektroforeza v agaroznem gelu (AGE) |
| 5'Cap |
Kapica 1 |
| 3' poli(A) rep |
110±5 nt |
| Osnovna sprememba |
Nespremenjeno, N1Ψ |
| Omilitev |
Voda brez RNaze (tekočina) |
| Dostava |
Ladja s suhim ledom; ali pod temperaturo okolja |
| skladiščenje |
Tekočina, pri -20 °C ali manj; Liofiliziran prašek, pri 4°C
|
| uporaba |
Reporterski geni, pozitivna kontrola |
Druge prilagodljive možnosti
| 5' Cap |
● Neobremenjeno
● Cap0, so-capped
● Cap1, so-capped
● Cap1, encimsko zapiranje
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Zaporedje Nature UTR
● Mutant/skonstruirano UTR zaporedje
|
| 3' PolyA rep |
● 100A ~120A rep (priporočeno)
● Segmentiran poliA rep
● Drugi rep po meri
|
| Modificirani nukleozidi |
● Nespremenjene baze,
● psevdouridin (Ψ),
● N1-metilpsevdouridin (N1Ψ),
● 5-metilcitozin (m5C),
● 5-metiluridin (m5U),
● 5-metoksiuridin (5moU),
● 2-tiouridin (s2U),
● 2'-O-metil-U
● drugi
|
Priprava mRNA in celična ekspresija
Zadrževanje linearizirane plazmidne DNA (pDNA). mRNA mCherry-eGFP kodiranje genov kot predloge IVT, smo pridobili čiste transkripte mRNA mCherry-eGFP s kotranskripcijskim omejevanjem in čiščenjem, s strukturo cap1 in modifikacijo N1Ψ.
Čista mRNA mCherry-eGFP (1 μg), pomešana s komercialnim transfekcijskim reagentom, je bila transfektirana v celice 293T v plošči s 96 jamicami. Po 48 urah je bila izvedena fluorescenčna fotografija.
Izražanje mRNA mCherry-eGFP v celicah 293T
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
