mRNA luciferaze kresničke (F-Luc). izraža protein luciferaze, prvotno izoliran iz kresničke, Photinus pyralis. Ta protein oddaja bioluminiscenco v prisotnosti substrata, luciferina.
MRNA luciferaze kresničke se običajno uporablja kot pozitivna kontrola pri transfekciji mRNA in razvoju dostavnih sistemov. Luciferazo kresnic lahko uporabimo tudi v celični kulturi sesalcev za merjenje izražanja genov in sposobnosti preživetja celic.
Yaohai Bio-Pharma ponuja nespremenjen ali spremenjen N1Ψ mRNA luciferaze kresničke, s strukturo Cap1, optimiziranimi kodoni, zasnovanim UTR in 110nt polyA repom, za izboljšanje stabilnosti mRNA in učinkovitosti prevajanja.
Izdelek
mRNA luciferaze kresnice, Cap1, poli(A) rep, nemodificirana ali modificirana mRNA
Podrobnosti
| Izdelek |
mRNA luciferaze kresničke |
| Mačka. Ne |
mP003 |
| Vsebnost RNA |
100 µg~10 mg (OD260) |
| Čistost |
A260 / A280 |
| Identifikacija in čistost |
Elektroforeza v agaroznem gelu (AGE) |
| 5'Cap |
Kapica 1 |
| 3' poli(A) rep |
110±5 nt |
| Osnovna sprememba |
Nespremenjeno, N1Ψ |
| Omilitev |
Voda brez RNaze (tekočina) |
| Dostava |
Ladja s suhim ledom; ali pod temperaturo okolja |
| skladiščenje |
Tekočina, pri -20 °C ali manj; Liofiliziran prašek, pri 4°C |
| uporaba |
Reporterski geni, pozitivna kontrola |
Druge prilagodljive možnosti
| 5' Cap |
● Neobremenjeno
● Cap0, so-capped
● Cap1, so-capped
● Cap1, encimsko zapiranje
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Zaporedje Nature UTR
● Mutant/skonstruirano UTR zaporedje
|
| 3' PolyA rep |
● 100A ~120A rep (priporočeno)
● Segmentiran poliA rep
● Drugi rep po meri
|
| Modificirani nukleozidi |
● Nespremenjene baze,
● psevdouridin (Ψ),
● N1-metilpsevdouridin (N1Ψ),
● 5-metilcitozin (m5C),
● 5-metiluridin (m5U),
● 5-metoksiuridin (5moU),
● 2-tiouridin (s2U),
● 2'-O-metil-U
● drugi
|
Priprava mRNA in celična ekspresija
Zadrževanje linearizirane plazmidne DNA (pDNA). F-Luc mRNA kodiranje genov kot šablone IVT, smo pridobili čiste transkripte mRNA F-Luc s ko-transkripcijskim zapiranjem in čiščenjem, s strukturo cap1 in modifikacijo N1Ψ.
Čista F-Luc mRNA (1 μg), pomešana s komercialnim transfekcijskim reagentom, je bila transfektirana v celice 293T v plošči s 96 jamicami. Test luciferaze je bil izveden po 24 urah.
Ekspresija mRNA luciferaze Firefly v celicah 293T
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
