mRNA se sintetizira s pomočjo transkripcije v vitro (IVT) iz linearnega plazmidnega DNA (pDNA). Med postopkom IVT se tudi nekatere stranske produkte, vključno z dvodiplasto RNA (dsRNA), ki je bila identificirana kot glavni okličnik za innate imunski pot. Ključno je odstraniti onesnažbe in dobiti visoke količine čiste mRNA za raziskave mRNA v vitro/vivo in terapevtske uporabe.
Yaohai Bio-Pharma je vzpostavila skupino tehnologij za sintezo mRNA, da ponudi visoko čistotno mRNA , kot so načrtovanje in optimizacija zaporedja, IVT, očiščevanje, liofilizacija in zapolitev s lipidskimi nanocelicami (LNP). Vsi izdelki se izdajajo pod strogi standardi nadzora kakovosti. Afinitetna kromatografija (AC), ki temelji na močni in izbirni interakciji med 3′ poliA repom mRNA in stacionarnim faznim oligo dT, je učinkovita in skalabilna strategija očiščevanja mRNA.
Rezultati
| Produkt |
Prilagojena visoko čistotna mRNA
|
| Dolžina |
100~10.000 nukleotidov |
| Vsebina RNA |
100 µg~10 mg (OD260) |
| Čistota |
A260/A280 |
| Identifikacija in čistota |
Elektroforeza v agarosovem gelu (AGE)
Kapilarna elektroforeza (CE)
|
| Amortizator |
Voda brez RNase (tekoča) |
| Dostava |
Prevozi z suho ledom; ali pri okoljski temperaturi |
| SHRANJEVANJE |
● Tekojča, pri ali pod -20°C
● Liofiliziran prah, pri 4°C
|
| Uporaba |
Razvoj formulacije LNP,
Celinska testiranja, Živalske poskuse
|
Druge prilagodljive možnosti
| 5' Kap |
● Nezaklenjeno
● Cap0, skupaj zaklenjeno
● Cap1, skupaj zaklenjeno
● Zapiranje z enzimom, enzymatic capping
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Naravna UTR sekvenca
● Mutirana/inženirska UTR sekvenca
|
| 3' PolyA rep |
● 100A ~120A rep (priporočeno)
● Segmentiran polyA rep
● Drugi prilagojeni rep
|
| Spremenjene nukleozide |
● Neizmenjene baze,
● Pseudouridin (Ψ),
● N1-Metilpseudouridin (N1Ψ),
● 5-metilcitozin (m5C),
● 5-metiluridin (m5U),
● 5-metoksipuridin (5moU),
● 2-tioruridin (s2U),
● 2′-O-metil-U
● Drugo
|
Studija primerov
Razvili smo večfazni proces kromatografske počistitve in pripravili mRNA z visoko čistočnostjo in integriteto (> 95 %).
Slika. Analiza mRNA z visoko čistočnostjo (＞98%)
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
