Uporaba bakterijskih IB-jev za proizvodnjo rekombinantnih proteínov

Bakterijske inkluzijske telesa (IBs) pri proizvodnji rekombinantnih белksov ponujajo enostavno ločevanje, stabilnost, visoko izražanje in oduporobnost pred razgradnjo, ter lahko izražajo toksične beležine z biološko aktivnostjo. Napredek v razumevanju IB-jev odpira nove poti za obdelavo, pri čemer so za prihodnja raziskovanja identificirane izzive in rešitve.

Yaohai Bio-Pharma ima več kot deset let izkušenj s proizvodnjo rekombinantnih belksov z uporabo mikrobijskih fermentacijskih sistemov. Naš močan in strokovni ekspertski tim jamči, da bo očiščeni preloženi beljak dosegal 1,5 g/L.

Strategije in izzivi obdelave IB-jev

Ločevanje IB-jev Metode za ločevanje IB odvisijo od strukture-funkcije beljakovin in potreb aplikacij. Fizične metode poškodujejo celice, vendar pa lahko škodijo kvaliteti beljakovin. Enzimatične metode izboljšajo čistoto, vendar so stroškovne. Mekani detergenti delujejo za klasične IB-je, ne pa za neklasične. Nadzor pH je ključen za raztopljivost. Elektroforetska depositacija je preprosta, vendar se ne da skalirati za biološko aktivne beljakovine.

Raztopljanje IB Raztopljanje IB je ključno za pridobitev aktivnih beljakovin. Močni denaturančni srednji poškodujejo naravno strukturo, medtem ko niso ne-denaturančni primereni za klasične IB-je. Meki raztopljalci lahko raztopijo IB, hkrati pa zaščitijo strukturo beljakovin, vendar ne vseh. Prihodnja dela potrebujejo boljše algoritme za izbiro raztopljalcev.

Strategije za renatracijo Renaturation beljakvinskih struktur je ključna za funkcionalnost. V procesu renaturation v laboratoriju se srečujemo z izzivi. Izbor solubilizatora, koncentracija beljakvina, pogoji in metode vplivajo na izid. Mirovi solubilizatori zaščitijo naravno strukturo in izboljšajo kakovost. Umerne koncentracije in optimizirani pogoji zmanjšajo agregacijo. Stolpcne metode z monolitičnimi matrikami ponujajo višjo čistość in učinkovitost.

Čiščenje renaturiranih beljakvin Dodatno čiščenje loči napačno zložene od pravilno zloženih beljakvin. Tradična hromatografija težko razlikuje podobne beljakvine. Alternativne metode ponujajo prednosti, vendar zahtevajo izbiro specifično za ciljno beljakvino. Razvoj univerzalne metode za čiščenje ostaja izziv.

Zaključek

IB-ji ponujajo prednosti v proizvodnji rekombinantnih beljakovin, vendar postavljajo tudi izide pri obdelavi. S globljim razumevanjem strukturo-funkcijo beljakovin znotraj IB-jev in napredkom v ločevanju, raztopljanju, renatraciji in očiščenju bo morda kmalu dosežena visoko-kapacitetska izdelava aktivnih beljakovin. To bo zmanjšalo stroške in pospešilo R&D v biotehničnem sektorju, kar bo spodbudilo rast industrije.

Yaohai Bio-Pharma aktivno išče tudi institucionalne ali posamezne globalne partnerje in ponuja najbolj konkurenčno nakazilo v industriji. Če imate katere koli vprašanje, prosimo, da nas kontaktirate: [email protected]

Za več podrobnosti o Yaohai Bio-Pharma se prosimo obrnite na spletno stran: www.yaohaibio-pharma.com