Plazmidová DNA je dôležitým vektorm v oblasti bunecných a genových terapií (CGT), ktorý sa dá použiť ako samostatné plazmidové DNA lieky, DNA vakcíny a výchoďové materiály na výrobu virálnych vektorov alebo mRNA. Na základe mikrobiálneho výskumného a vývojového platformy ponúka Yaohai Bio-Pharma špecifické služby prípravy plazmidov odedinene na splnenie jedinečných cieľov. Máme skúsenosti v Escherichia coli (E. coli) ingenierstve štamu, fermentácii a čistení plazmidov.
Kľúčové slová: extrakcia plazmidu, čistenie plazmidu, poly(A)-príprava plazmidu, pomoc pri produkcií plazmidu
Aplikácia: bunková a genetická terapia (CGT), DNA vakcína, produkcia mRNA, príprava saRNA, balenie AAV, virus-vektor balenie
Prispôsobené možnosti
Modalita |
Plazmidová DNA |
Výrazný systém |
E. coli DH5α, TOP10, Trans10, atď. |
Dĺžka plazmidu |
~10,000 nt (10 kb) |
Výstupy |
Čistota nadpozičovaného plazmidi: 80%, 90%, 95%
Množstvo: 0,2~5 g
|
Metódy analýzy |
Obsah: Ultraviolettové (UV, A260) Čistenie: UV (A260/A280) a elektroforeza v agárovom geľovi (AGE) Voliteľné: kapilárna elektroforeza (CE), vysokoefektívna kapalinová chromatografia (HPLC)
|
Zostávajúce nečistoty |
Bunkové proteiny nosiča (HCP), bunkové DNA nosiča (HCD), endotoxín (voliteľné) |
Podrobnosti služby
Služby |
Podrobnosti služby |
Minimálny časový rámec (pracovný deň) |
Syntéza genu |
Syntéza genu |
7~10 dní |
Konštrukcia plazmidu/vektora |
Klonovanie do plazmidu/vektora |
2 dni |
Transformácia plazmidu |
Verifikácia polymerázou rečnou reakciou (PCR), digestia obmedzovacím enzymom, sekvenovanie génu |
3 dni |
Amplifikácia plazmidu v E. coli |
Výživa v otáčajúcom sa fľaši |
3 dni |
Kultivácia v 7L-fermentéri |
4 dni |
Čistenie plazmidov |
5 dní |
QC pomocou UV, AGE a iné |
Ďalšie služby (voliteľné)