Выявление оптимальной дозировки RNA репортера eGFP

В молекулярной биологии и биотехнологии, усиленный зеленый флуоресцентный белок (eGFP) стал ключевым репортерным геном благодаря способности производить ярко-зеленую флуоресценцию на длине волны 509 нм. Этот белок, изначально выделенный из медузы Aequorea victoria, является прямым маркером обнаружения в культурах млекопитающих клеток, что облегчает мониторинг и оптимизацию эффективности трансфекции. Однако возникает вопрос: какова оптимальная дозировка РНК репортерного белка eGFP для достижения желаемых уровней экспрессии?

Исследования показали, что эффективность репортерной РНК eGFP сильно зависит от её дозировки, особенно в контексте круглой РНК (circRNA) и самовоспроизводящейся РНК (saRNA). Исследования, проведённые группой Катриен Ремаут из Лаборатории Наномедицины Университета Гента, подчеркнули сложную связь между дозировкой saRNA и её переводной эффективностью в клетках сетчатки. Они обнаружили, что низкие дозы saRNA, ниже порога активации врождённого иммунитета, способствуют эффективному синтезу белка. Это подчёркивает важность точного контроля дозировки для полного раскрытия потенциала репортерной РНК eGFP.

На практике часто используемые концентрации mRNA eGFP могут варьироваться от микрограммов (μg) до нанограммов на микролитр (ng/μL). Например, в экспериментах по трансфекции дозы от 0,05 μg до 0,5 μg mRNA eGFP показали значительные уровни экспрессии в различных типах клеток, с процентом положительных клеток достигающим 99-100% в некоторых случаях. Заметно, что при дозах ниже 0,1 μg saRNA демонстрирует более высокие уровни экспрессии по сравнению с линейной mRNA, подтверждая свое преимущество самовоспроизводства.

Гибкость репортерной RNA eGFP заключается не только в её яркой и стабильной флуоресценции, но и в её адаптивности к различным экспериментальным установкам. Исследователи могут точно настраивать дозировку для удовлетворения своих конкретных потребностей, обеспечивая точный контроль над уровнями генной экспрессии. Эта особенность делает eGFP бесценным инструментом для изучения функции генов, мониторинга судьбы клеток и оптимизации протоколов трансфекции.

Подводя итог, оптимальная дозировка репортерной РНК eGFP сильно зависит от экспериментального контекста и желаемых результатов. Тщательно выбирая подходящую дозу, исследователи могут использовать весь потенциал этого универсального гена-репортера, углубляя наше понимание молекулярных механизмов и способствуя инновациям в биотехнологии.

Yaohai Bio-Pharma является первой и крупнейшей биотехнологической компанией, специализирующейся на микробной системе экспрессии CRDMO в Великом Китае. Мы стремимся удовлетворить клинические и коммерческие потребности наших глобальных клиентов в биопрепаратах, вакцинах и диагностических средствах для использования в медицине и ветеринарии.

Мы также активно ищем глобальных партнеров среди организаций или частных лиц. Мы предлагаем самое конкурентоспособное вознаграждение в отрасли. Если у вас есть вопросы, не стесняйтесь обращаться к нам: [email protected]