Шаблоны плазмид мРНК: ключевые элементы и стратегии проектирования

Создание мРНК для вакцин или терапии начинается с хорошо разработанного шаблона плазмиды. Вот краткое руководство по ключевым элементам и тому, как они оптимизированы для успеха.

Промоутер: где начинается транскрипция

Промотор T7 является наиболее популярным выбором для запуска синтеза мРНК. Его классическая последовательность «TAATACGACTCACTATAGGG» обеспечивает эффективную транскрипцию. Со временем ученые разработали вариации, такие как шаблоны GG, AG и AT/AU, для работы с передовыми системами кэпирования, такими как CleanCap или самоамплифицирующиеся РНК-платформы.

Линеаризация: разрезание плазмиды для точности

Чтобы остановить бесконечную транскрипцию плазмиды, ее нужно разрезать в определенном месте. Ферменты типа IIS, такие как BspQⅠ или BsaⅠ, идеально подходят для этой работы. Они разрезают ДНК за пределами своей последовательности распознавания, не оставляя лишних битов и сохраняя важный полиА-хвост.

Схема мРНК: строительные блоки успеха

Последовательность мРНК включает 5'-кэп, нетранслируемые области (UTR), кодирующую последовательность (CDS) и полиА-хвост. Вот как устроена каждая часть:

• UTR-ы: Их можно заимствовать из высокоэкспрессируемых природных генов (например, генов вирусов) или разработать индивидуально с использованием передовых алгоритмов для повышения производительности.
• CDS: Сначала ученые проектируют последовательность белка, а затем оптимизируют код ДНК для эффективной экспрессии.
• ПолиА Хвост: Участок из 100–120 аденинов или сегментированная версия, такая как 30А + линкер + 70А, обеспечивает стабильность и функциональность мРНК.

Освоив эти элементы, исследователи могут создавать мощные шаблоны мРНК для всего: от вакцин до передовых методов лечения. Будущее медицины начинается здесь!

Yaohai Bio-Pharma — это платформенное предприятие, специализирующееся на услугах для систем микробной экспрессии. Опираясь на десятилетний опыт, Yaohai разработала комплексный набор технологий, соответствующих требованиям GMP, для синтеза линейной и кольцевой мРНК, предлагая высококачественные продукты РНК, которые охватывают проектирование и оптимизацию последовательностей, синтез генов, транскрипцию in vitro (IVT), кольцевание, очистку РНК и инкапсуляцию LNP.

Мы также активно ищем институциональных или индивидуальных глобальных партнеров. Мы предлагаем самую конкурентоспособную компенсацию в отрасли. Если у вас есть какие-либо вопросы, пожалуйста, свяжитесь с нами: [email protected]