шаблоны плазмид mRNA: ключевые элементы и стратегии проектирования

Создание mRNA для вакцин или терапий начинается с хорошо спроектированного плазмидного шаблона. Вот краткое руководство по ключевым элементам и тому, как они оптимизируются для успеха.

Промотор: Начало транскрипции

Промотор T7 является наиболее популярным выбором для начала синтеза mRNA. Его классическая последовательность «TAATACGACTCACTATAGGG» обеспечивает эффективную транскрипцию. Со временем учёные разработали вариации, такие как шаблоны GG, AG и AT/AU, совместимые с продвинутыми системами закрытия, такими как CleanCap или самореплицирующиеся RNA-платформы.

Линеаризация: Точечный разрез плазмида

Чтобы остановить бесконечную транскрипцию плазмида, его необходимо резать в определённом месте. Ферменты типа IIS, такие как BspQⅠ или BsaⅠ, идеально подходят для этой задачи. Они разрезают ДНК вне своей узнаваемой последовательности, не оставляя лишних фрагментов и сохраняя важный полимерный хвост A.

Голуб der mRNA: Основные составляющие успеха

Последовательность mRNA включает 5'-кап, немодифицированные регионы (UTR), кодирующую последовательность (CDS) и полипуриновый хвост. Вот как каждый элемент проектируется:

• UTR : Их можно заимствовать из высокоэкспрессируемых природных генов (например, из вирусов) или разработать с помощью продвинутых алгоритмов для лучшей производительности.
• CDS : Учёные сначала проектируют последовательность белка, затем оптимизируют ДНК-код для эффективного выражения.
• Полипуриновый хвост : Последовательность из 100–120 аденинов, либо сегментированная версия, например, 30A + Соединитель + 70A, обеспечивает стабильность и функциональность mRNA.

Овладев этими элементами, исследователи могут создавать мощные шаблоны mRNA — от вакцин до передовых методов лечения. Будущее медицины начинается здесь!

Yaohai Bio-Pharma — это платформенная компания, специализирующаяся на услугах в области микробных систем выражения. Опираясь на десятилетний опыт, Yaohai разработала комплексный набор технологий, соответствующих стандартам GMP, для синтеза линейной и циркулярной mRNA, предлагая высококачественные РНК-продукты, охватывающие проектирование и оптимизацию последовательностей, синтез генов, транскрипцию in vitro (IVT), циркуляризацию, очистку РНК и инкапсуляцию ЛНП.

Мы также активно ищем глобальных партнеров среди организаций или частных лиц. Мы предлагаем самое конкурентоспособное вознаграждение в отрасли. Если у вас есть вопросы, не стесняйтесь обращаться к нам: [email protected]