Использование бактериальных IB для производства рекомбинантных белков

Бактериальные инклюзионные тела (IBs) при производстве рекомбинантных белков обеспечивают легкость разделения, стабильность, высокое выражение и устойчивость к деградации, а также могут выражать токсичные белки с биологической активностью. Прогресс в понимании IB открывает новые возможности для обработки, с выявленными вызовами и решениями для будущих исследований.

Yaohai Bio-Pharma имеет более 10 лет опыта в производстве рекомбинантных белков с использованием микробных ферментационных систем. Наша сильная и профессиональная команда экспертов гарантирует, что очищенный и переформированный белок может достигать 1,5 г/л.

Стратегии обработки и вызовы IBs

Разделение IBs Методы разделения ИБ зависят от структуры-функции белка и потребностей приложения. Физические методы разрушают клетки, но могут повредить качество белка. Энзиматические методы улучшают чистоту, но дороги. Мягкие моющие средства работают для классических ИБ, но не для неклассических. Контроль pH критически важен для растворимости. Электрофоретическое осаждение просто, но не масштабируемо для биологически активных белков.

Солюбилизация ИБ Солюбилизация ИБ критически важна для восстановления активных белков. Сильные денатуранты повреждают нативную структуру, в то время как неденатурирующие вещества непригодны для классических ИБ. Мягкие солюбилизаторы могут растворять ИБ, защищая структуру белка, но не все белки. Будущие исследования требуют лучших алгоритмов для выбора солюбилизаторов.

Стратегии ренатурации Восстановление белковой функции критически важно. В vitro восстановление сталкивается с трудностями. Выбор солюбилизатора, концентрация белка, условия и методы влияют на результат. Мягкие солюбилизаторы защищают природную структуру и улучшают качество. Умеренные концентрации и оптимизированные условия снижают агрегацию. Колонковые методы с монолитными матрицами обеспечивают более высокую чистоту и выход.

Очистка восстановленных белков Дополнительная очистка отделяет неправильно сложенные белки от правильно сложенных. Традиционная хроматография сталкивается с проблемами при разделении похожих белков. Альтернативные методы имеют преимущества, но требуют специфического выбора для целевого белка. Разработка универсального метода очистки остаётся вызовом.

Заключение

ИБ предлагают преимущества в производстве рекомбинантных белков, но создают проблемы обработки. С более глубоким пониманием структура-функция белка внутри ИБ и достижениями в области разделения, растворимости, ренатурации и очистки вскоре может быть достигнута высокопроизводительная изоляция активных белков. Это снизит затраты и ускорит НИОКР биофармацевтических продуктов, стимулируя рост отрасли.

Yaohai Bio-Pharma также активно ищет глобальных партнеров среди учреждений или частных лиц и предлагает наиболее конкурентоспособное вознаграждение в отрасли. Если у вас есть вопросы, пожалуйста, не стесняйтесь обращаться к нам: [email protected]

Для получения дополнительной информации о Yaohai Bio-Pharma, пожалуйста, посетите сайт: www.yaohaibio-pharma.com