Использование бактериальных IB для производства рекомбинантных белков

Бактериальные включения (IB) в производстве рекомбинантных белков обеспечивают простоту разделения, стабильность, высокую экспрессию и устойчивость к деградации, а также могут экспрессировать токсичные белки с биологической активностью. Достижения в понимании IB открывают новые возможности для обработки, с выявленными проблемами и решениями для будущих исследований.

Yaohai Bio-Pharma имеет более чем 10-летний опыт производства рекомбинантных белков с использованием систем микробной ферментации. Наша сильная и профессиональная команда экспертов гарантирует, что очищенный рефолдированный белок может достигать 1.5 г/л.

Стратегии обработки и проблемы IB

Разделение IB Методы разделения IB зависят от структуры-функции белка и потребностей применения. Физические методы разрушают клетки, но могут нанести вред качеству белка. Ферментативные методы улучшают чистоту, но являются дорогостоящими. Мягкие детергенты работают для классических IB, но не для неклассических. Контроль pH имеет решающее значение для растворимости. Электрофорезное осаждение просто, но не масштабируется для биологически активных белков.

Растворение IB Солюбилизация IB имеет решающее значение для восстановления активных белков. Сильные денатуранты повреждают нативную структуру, в то время как неденатуранты не подходят для классических IB. Мягкие солюбилизаторы могут растворять IB, защищая при этом структуру белка, но не все белки. Для дальнейшей работы необходимы более совершенные алгоритмы для выбора солюбилизаторов.

Стратегии ренатурации Ренатурация белка жизненно важна для функциональности. Ренатурация in vitro сталкивается с трудностями. Выбор солюбилизатора, концентрация белка, условия и методы влияют на результат. Мягкие солюбилизаторы защищают нативную структуру и улучшают качество. Умеренные концентрации и оптимизированные условия снижают агрегацию. Методы на основе колонок с монолитными матрицами обеспечивают более высокую чистоту и выход.

Очистка ренатурированных белков Дальнейшая очистка отделяет неправильно свернутые белки от правильно свернувшихся. Традиционная хроматография борется с похожими белками. Альтернативные методы предлагают преимущества, но требуют специфического выбора целевого белка. Разработка универсального метода очистки остается сложной задачей.

Заключение

IBs предлагают преимущества в производстве рекомбинантных белков, но создают проблемы в обработке. С более глубоким пониманием структуры-функции белка в IBs и достижениями в разделении, солюбилизации, ренатурации и очистке, вскоре может быть достигнуто высокопроизводительное извлечение активных белков. Это снизит затраты и ускорит биофармацевтические НИОКР, стимулируя рост отрасли.

Yaohai Bio-Pharma также активно ищет институциональных или индивидуальных глобальных партнеров и предлагает самую конкурентоспособную компенсацию в отрасли. Если у вас есть вопросы, пожалуйста, свяжитесь с нами: [email protected]

Более подробную информацию о компании Yaohai Bio-Pharma можно найти на веб-сайте: www.yaohaibio-pharma.com