Все категории
Статья

Погрузитесь в Увлекательный Мир Осаждения Хлоридом Лития

Oct 28, 2024

Осадение хлоридом лития широко используется для разделения РНК из раствора.

Вот разбивка процесса:

1. Подготовка образца: Начните с образца, содержащего РНК, например in-vitro смесь транскриптов.

2. Добавление хлорида лития: Добавьте подходящий объем концентрированного раствора хлорида лития в раствор РНК.

3. Инкубация: После добавления хлорида лития раствор инкубируют при низкой температуре, обычно около -20°C. Это приводит к выпадению молекул РНК из раствора.

4. Центрифугирование: После инкубации раствор центрифугируют на высокой скорости. Это отделяет осажденную РНК от остальной части раствора, которая содержит примеси.

5. Промывание: После завершения центрифугирования аккуратно удалите надосадочную жидкость, не нарушая осаждения РНК. Промойте частицы РНК холодным этанолом или изопропиловым спиртом, чтобы удалить оставшиеся примеси.

6. Восстановление РНК: После промывки осадок РНК кратковременно высушивается на воздухе, а затем растворяется в подходящем буфере, таком как буфер TE (буфер тристи-ЭДТА) или дистиллированной воде. Для достаточного восстановления РНК может потребоваться аккуратное пипетирование или вихревые токи.

7. Количественная оценка и анализ: Наконец, изолированная РНК количественно определяется с помощью ультрафиолетовой спектроскопии или флуоресцентного метода. Это позволяет определить концентрацию и чистоту образца РНК, что важно для последующих применений, таких как инкапсуляция ЛНП и трансфекция клеток.

Yaohai Bio-Pharma обладает навыками использования метода выпадения в осадок хлоридом лития в производственном процессе, поскольку он прост, недорог и даёт высококачественную РНК, пригодную для различных молекулярно-биологических применений. Однако важно оптимизировать условия (например, концентрацию хлорида лития, время инкубации, скорость центрифугирования), чтобы достичь наилучших результатов для конкретного образца.

Опираясь на наш мощный и собственный платформенный RNASci, мы также предоставляем услуги по индивидуальному синтезу РНК, а также продукты каталога mRNA (до 10 кб), circRNA (до 4 кб) и ЛНП. Мы разработали полный набор технологий синтеза mRNA/circRNA для предоставления высококачественной РНК, такой как проектирование и оптимизация последовательностей, ИВТ, циклизация, очистка и оболочка ЛНП. Все продукты выпускаются при строгом соблюдении стандартов контроля качества.

Yaohai Bio-Pharma — первая и крупнейшая биотехнологическая CRDMO, специализирующаяся на микробных системах выражения в Большом Китае. Мы предлагаем комплексные индивидуальные решения или отдельные услуги, охватывающие синтез РНК, инженерию штаммов и их создание, разработку upstream и downstream процессов, производство субстанций лекарственных средств по стандартам GMP или non-GMP, а также услуги по фасовке и упаковке для различных модальностей, таких как мРНК, circRNA, плазмидная РНК, рекомбинантные белки, пептиды, энзимы, однодоменные антитела (sdAbs) и ВЧК. Мы стремимся удовлетворить потребности глобальных клиентов в клинической и коммерческой биологической продукции, вакцинах и диагностических средствах как для человека, так и для ветеринарии.

Yaohai Bio-Pharma также активно ищет глобальных партнеров среди учреждений или частных лиц и предлагает наиболее конкурентоспособное вознаграждение в отрасли. Если у вас есть вопросы, не стесняйтесь обращаться к нам: [email protected]