toate categoriile
ENEN
Servicii de preparare a proteinelor fără etichete

Servicii de preparare a proteinelor fără etichete

Acasă >  Servicii de preparare a proteinelor fără etichete

Servicii de preparare a proteinelor fără etichete

Etichetele de proteine, ca parteneri de fuziune utilizați în tehnologiile ADN recombinant, permit purificarea eficientă, într-o singură etapă, prin afinitate pentru diferite proteine/peptide cu diferite caracteristici. În ciuda acestui avantaj important, etichetele ca aminoacizi exogeni pot modifica structura proteinelor și funcțiile biologice. Prin urmare, proteinele sau peptidele nemarcate (fără etichete) sunt mai preferate pentru a asigura siguranța și eficacitatea, în special în domeniul biofarmaceutic. O proteină recombinată cu o etichetă de fuziune are posibilități limitate de obținere a autorizației de la agențiile medicale/de administrare a medicamentelor.

Bazat pe platforma de cercetare și dezvoltare în domeniul microbian biologic, Yaohai Bio-Pharma oferă servicii personalizate de preparare a proteinelor fără etichete (tag-free) dedicate îndeplinirii obiectivelor unice de cercetare, dezvoltare și producție pentru uz clinic.

Cuvinte cheie: producție de proteine ​​​​fără etichete, purificare de proteine ​​fără etichete, preparare gratuită de proteine ​​pe bază de etichete, exprimare și purificare a proteinelor fără etichete, proteină țintă extrem de fără etichete Aplicație: cercetare în medicină umană, dezvoltare în medicină animală, dezvoltare de vaccin recombinant, moleculă mare recombinată producția de substanțe biologice


Platforma noastră de cercetare și dezvoltare microbiană

Avem experiență în ingineria tulpinilor microbiene, fermentație și purificarea produselor.

Bacterii: Escherichia coli (E. coli)

Drojdie: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Opțiuni personalizate

ModalitateaProteine ​​recombinante
Materiale de pornireSecvențe de gene, plasmidă recombinată sau tulpini modificate
livrabilePurificare: >80%, >85%, >90% Cantitate: 0.2~10 g (a fi determinat de proiect)
Sistemul de expresie și formareaSecreția periplasmatică de E. coli, expresia corporală solubilă și de incluziune; Drojdie intracelulară sau expresie secretie
Metode de analizăAnaliza cu ultraviolete (UV), acid bicinconinic (BCA), Bradford sau Lowry pentru Electroforeză pe gel de poliacrilamidă cu dodecil-sulfat de sodiu (SDS-PAGE) pentru testarea purificatăOpțional: Western blot (WB), test imunosorbant legat de enzime (ELISA), de înaltă performanță cromatografie lichidă (HPLC)
Impurități rezidualeEndotoxină (opțional)

Detalii despre servicii

serviciiDetalii despre serviciiCronologie minimă (zi lucrătoare)
Sinteza genelorOptimizarea codonilor pentru o anumită gazdă de expresie7 ~ 10 zile
Sinteza genelor
Construcție plasmidă/vectorClonarea în plasmidă/vector2 de zile
Transformarea plasmidei
Verificarea reacției în lanț a polimerazei (PCR), digestia cu enzime de restricție, secvențierea genelor3 de zile
Exprimarea proteinelor în E. coliTransformarea plasmidei,2 de zile
Cultivare în balon de agitare3 de zile
7L-sac fermentare, optimizare4 zile/lot
Purificarea proteinelor fără etichete, optimizare5 ~ 10 zile / lot
Testare prin electroforeză pe gel de poliacrilamidă cu dodecil-sulfat de sodiu (SDS-PAGE)
Expresia proteinelor în drojdiePrepararea celulelor competente de drojdie4 zile
Linearizarea plasmidelor și electro-transformarea
7L-sac fermentare, optimizare5 zile
Purificarea proteinelor fără etichete, optimizare7 zile/lot
Purificarea proteinelor fără etichete5 ~ 10 zile / lot
QC prin SDS-PAGE

Servicii suplimentare (optional)

Dezvoltarea procesului de fermentație

Dezvoltarea procesului de purificare a proteinelor fără etichete

Pilot Scale up și GMP Manufacturing

Analiză și Testare

Caracteristicile noastre

Am lucrat la peste 300 de tulpini microbiene proiectate, inclusiv E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115; Tulpina PichiaPink1/2/3/4; şi H. polymorpha.

Avem experiență cu secreția periplasmatică de E. coli, expresia corporală solubilă și de incluziune, precum și expresia intracelulară sau de secreție de drojdie.

Stabilim o platformă de screening cu randament ridicat pentru a verifica tulpinile producătoare de mare și stabile din peste o sută de tulpini candidate.

Obțineți o Consultație Gratuită

Contactați-ne