Deamidarea lanțurilor laterale de glutamina și asparagină este o modificare comună în ceea ce privește impactul asupra proprietăților biofarmaceutice proteice. Deamidarea poate apărea în reziduurile de glutamină, dar de obicei la o rată mult mai mică. Ratele de deamidare sunt influențate de temperatură, pH, structura locală a proteinei și reziduurile de aminoacil înconjurătoare.
Yaohai BioPharma oferă serviciul de testare a deamidarii aminoacizilor, care vă permite să detectați dezamidarea aminoacizilor prin cromatografie lichidă-spectrometrie de masă (LC-MS).
Am fost implicați în caracterizarea structurală a proteinelor a diferitelor molecule mari, inclusiv vaccinuri subunități recombinante, nanocorpi/VHH/anticorpi cu un singur domeniu (sdAbs), fragmente de anticorpi, hormoni/peptide, citokine, factori de creștere (CF), enzime, colageni, etc.
Cerințe de reglementare pentru deamidarea aminoacizilor
Conform ghidurilor ICH Q6B, formele deamidate pot fi detectate și caracterizate prin metode cromatografice, electroforetice și/sau alte metode analitice relevante.
Metode de analiză
| Analiză |
Metode |
| Deamidarea |
Cromatografie lichidă-spectrometrie de masă (LC-MS) |
Proceduri
de exemplu, deamidarea aspartică
1. Digestia enzimatică
2. LC-MS în condiția de cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC).
3. Analiza datelor
Deamidarea asparaginei are loc prin intermediul unui intermediar succinimid (Suc), care este susceptibil de racemizare și hidroliză, producând patru izomeri Asp, inclusiv L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp și D-IsoAsp.
În teorie, deamidarea Gln ar putea genera patru izomeri Glu corespunzători printr-un proces similar cu deamidarea Asn.
Spectrometria de masă cu rezoluție înaltă identifică cu ușurință diferența de masă 1-Da dintre peptidele care conțin Asn/Gln și omologii lor deamidați corespunzători Asp/Glu.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NU
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
