ARNm a fost utilizat pe scară largă în studiul funcțiilor genelor sau proteinelor. Între timp, este obișnuit în dezvoltarea de produse biologice profilactice și terapeutice. Ca strategie comună de sinteză pentru moleculele de ARN, transcripția in vitro (IVT) ne permite să obținem transcrieri personalizate în mod eficient.
Yaohai Bio-Pharma a stabilit un set de tehnologii de sinteză a ARNm pentru a oferi ARN de înaltă calitate, cum ar fi proiectarea și optimizarea secvenței, IVT, purificarea, liofilizarea și încapsularea nanoparticulelor lipidice (LNP). Toate produsele sunt lansate conform standardelor stricte de control al calității (QC).
Odată cu izbucnirea pandemiei COVID-19 în 2020, tehnologia ARNm a avansat cu pasi, iar cercetările și aplicațiile aferente au câștigat o dezvoltare fără precedent, inclusiv vaccinuri profilactice pentru prevenirea bolilor infecțioase, vaccinuri și medicamente oncologice terapeutice, terapie tumorală, proteine. terapia de substituție, medicina regenerativă și terapia celulară și genică (CGT).
Vaccin ARNm | Terapeutică ARNm |
|
Proces | Service optional | Detalii despre servicii | Perioada de livrare (zi lucratoare) | livrabil |
Proiectarea și optimizarea secvenței ARNm | Proiectarea si optimizarea secventelor de codare | Proiectarea secvenței CDS și optimizarea codonilor | 1-3 | Fișierul secvenței |
Proiectarea si optimizarea secventelor necodante | Proiectarea și optimizarea secvențelor UTR, polyA | |||
Șablon de transcriere Prepararea plasmidei | Prepararea plasmidei recombinante | Sinteza genelor | 7-10 | |
Amplificarea și extracția plasmidelor | 4 | |||
Linearizarea și purificarea plasmidelor | ||||
ARNm Transcriere in vitro | Limitare co-transcripțională (metoda într-un singur pas) | Transcriere in vitro (IVT) / Analog Cap | 1-2 | - |
Modificări ale nucleotidelor (modificări UTP/CTP) | ||||
Îndepărtarea șablonului ADN (DNaza I) | ||||
Limitare enzimatică (proces în două etape) | IVT | 2-3 | ||
Modificări ale nucleotidelor (modificări UTP/CTP) | ||||
Îndepărtarea șablonului ADN (DNaza I) | ||||
Purificarea ARNm (clorură de litiu/perle magnetice) | ||||
Capacul enzimatic | ||||
Purificarea ARNm | Schema convențională de purificare | Precipitarea clorurii de litiu | 1 | substanță medicamentoasă ARNm |
Purificarea mărgele magnetice | ||||
Schema de purificare a coloanei de cromatografie | Combinarea mai multor metode de cromatografie | 1-2 | ||
Schimb tampon | Ultrafiltrarea | 1 | ||
Liofilizarea ARNm | Liofilizare | Pre-congelare | 2-3 | pulbere liofilizată de ARNm |
Uscarea primară (sublimare) | ||||
uscare secundară (desorbție) | ||||
Încapsularea ARNm | încapsularea LNP | încapsularea LNP | 2-3 | mRNA-LNPProdus medicament |
Concentrarea și schimbul tampon | ||||
Analiza calității ARNm | substanță medicamentoasă ARNm/ pulbere liofilizată | Concentrare, puritate | 1 | Raport de testare |
Integritate, eficiență de limitare, distribuție poliA coadă | 2-5 | |||
produs medicamentos ARNm-LNP | Eficiența încapsulării | 1 | ||
Dimensiunea particulelor și distribuția | ||||
Încărcare de suprafață | ||||
Validarea expresiei ARNm | Evaluarea celulelor 293T | Placarea celulelor | 4 | |
Transfecția tranzitorie a celulelor | ||||
Observarea semnalului fluorescent | 1-3 | |||
Western blot (WB)/ Test imunosorbent legat de enzime (ELISA) |
5' Cap | ▪ Necapsulat ▪ Cap0, co-capped ▪ Cap1, co-capped ▪ Cap1, acoperire enzimatică |
5' UTR/3' UTR | ▪ Secvența UTR de natură ▪ Secvență UTR mutantă/procesată |
3' Coada PolyA | ▪ 100A ~120A coadă (recomandat) ▪ Coadă poliA segmentată ▪ Alte cozi personalizate |
Nucleozide modificate | ▪ Baze nemodificate ▪ Pseudouridină (Ψ) ▪ N1-Metilpseudouridină (N1Ψ) ▪ 5-metilcitozină (m5C) ▪ 5-metiluridină (m5U) ▪ 5-metoxiuridină (5 moU) ▪ 2-tiouridină (s2U) ▪ 2′-O-metil-U ▪ Alte modificări |
Fluxul de servicii integrat
Furnizați o serie de servicii de la proiectarea secvenței front-end până la prepararea mARN-ului back-end, controlul calității și validarea expresiei.
Proiectare și optimizare a secvenței internaționale de ultimă oră
Proiectarea și optimizarea profesională a secvenței ARNm facilitează expresia eficientă a ARNm.
Modificări diversificate de nucleotide
Crește în mod eficient expresia ARNm și reduce răspunsurile imune adverse ARNm.
Platformă de purificare matură
Prin combinarea unei metode de purificare convenționale și autoproiectate, probele de ARNm sunt obținute cu puritate ridicată
Platformă QC completă
Îmbogățiți opțiunile QC pentru a îndeplini cerințele testelor de rutină, cum ar fi concentrația, puritatea A260/280 și integritatea, precum și cerințele de control de înaltă calitate, cum ar fi limitarea eficienței/distribuția poliA.
Livrare rapida
ARNm personalizat poate fi livrat în doar 7 zile, cu excepția sintezei secvenței externalizate.