Semnificația ingineriei tulpinilor
Ingineria tulpinilor își propune să facă expresia gazdă cu caracteristici de așteptări, ceea ce este necesar pentru dezvoltarea CMC biologice și determină calitatea și consistența produsului și a procesului de fabricație.
Cuvinte cheie: ingineria genetică a tulpinilor și screening-ul, construcția tulpinilor de expresie a proteinelor, ingineria celulelor microbiene, ingineria tulpinilor de bacterii, ingineria tulpinilor de drojdie, construcția microorganismelor procariote, ingineria microorganismelor eucariote, tulpina modificată
Aplicație: medicina umană, medicina animală, vaccin, biologie sintetică, substanțe biologice recombinate cu molecule mari, reactiv biologic
Servicii de inginerie a tulpinilor Yaohai Bio-Pharma
Beneficiind de peste 10 ani de experiență CDMO în biologie microbiană, am acumulat experiență bogată în proiectarea și selecția diferitelor tipuri de vectori plasmidii și gazde microbiene (bacterii, drojdie). Putem găsi cel mai bun sistem de exprimare pentru produsele dumneavoastră biologice unice.
Am colectat diverse gazde microbiene cu surse clare și CoA standard, inclusiv
Bacterii: Escherichia coli (E. coli)
Drojdie: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Detalii despre servicii
Servicii
|
Detalii despre servicii
|
Cronologie minimă/zi
|
livrabile
|
Ingineria tulpinilor
|
Eliminarea genelor sau ștergerea genei
|
TBD
|
Raport de inginerie a tulpinilor
|
Knock-in de genă sau inserție de genă
|
Construcție de tulpini (E. coli)
|
Transformarea plasmidei (multi-gazde)
|
5
|
COA al gazdelor comerciale,
Raport de construcție a tensiunii
|
verificare PCR
|
Purificarea tulpinilor
|
Conservarea tulpinii
|
Construcția tulpinii (drojdie)
|
Prepararea celulelor de drojdie competente
|
10
|
Linearizarea plasmidelor
|
Transformare electro
|
Screeningul rezistenței/deficiențelor nutriționale
|
Purificarea tulpinilor
|
Conservarea tulpinii
|
Screening adecvat pentru gazdă
|
Extracția ADN-ului de plasmide sau genom
|
15-20
|
Procesul de screening al gazdei,
Raport de testare a tulpinilor proiectate
|
Verificare PCR, digestia cu enzime de restricție
|
Secvențierea genei țintă
|
Screeningul gazdelor cu expresie ridicată
|
Screeningul gazdelor cu stabilitate genetică
|
Conservarea tulpinii
|
Studiu de caz
Hansenula polymorpha proiectată a îmbunătățit randamentul de expresie HPV L1 VLP.
Am stabilit drojdie Hansenula polymorpha (H. polymorpha) platformă de inginerie și screening pentru exprimarea proteinelor/peptidelor recombinante. În primul rând, am generat H. polymorpha tulpini cu deficit de protează prin deleția țintită a genei. În al doilea rând, un vector care poartă gena HPV L1 a fost transformat în competent H. polymorpha celulă. În cele din urmă, analizăm cea mai bună clonă din sute de opțiuni, cu stabilitate genetică și proprietăți de mare producție.
Caracteristicile serviciului nostru
Am demonstrat expertiză în diverse gazde microbiene, de exemplu, Escherichia coli (E. coli) DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, tulpină PichiaPink 1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) și Hansenula polymorpha (H. polymorpha).
Avem experiență cu E. coli secreția periplasmatică, expresia solubilă și a corpului de incluziune, precum și expresia intracelulară sau de secreție de drojdie.
Nu adăugăm antibiotice sau adăugăm antibioticele sub îndrumări de reglementare.
Stabilim o platformă de screening cu randament ridicat pentru a verifica tulpinile cu producție mare și stabile din peste o sută de tulpini candidate.
Ne asigurăm că procesul de inginerie a tulpinilor și de screening este trasabil, în conformitate cu Managementul bun al datelor și al înregistrărilor.