Sinteză saRNA personalizată
ARNm cu autoamplificare (saRNA), cunoscut și ca ARN replicon, codifică secvențe de ARNm de transcripție in vitro (IVT) și gene de replicază virală derivate din alfavirus sau flavivirusuri. Genele replicaze virale permit autoamplificarea ARNm, ceea ce are ca rezultat creșterea expresiei proteinei și o doză minimă necesară de ARN în comparație cu ARNm care nu se amplifica. Un alt aspect este că saRNA este o moleculă relativ mare (mai mult de 14 kb).
Yaohai Bio-Pharma a stabilit un set de tehnologii de sinteză a ARNm pentru a oferi ARNm neamplificator și ARNm autoamplificator (1000 nt~14000 nt), cum ar fi proiectarea și optimizarea secvenței, IVT, purificarea, liofilizarea și încapsularea nanoparticulelor lipidice (LNP). . Toate produsele sunt lansate conform standardelor stricte de control al calității.
Fig.1 Caracteristicile structurale ale ARNm IVT: ARNm convențional, circular și cu autoamplificare.
Caracteristicile secvenței ARNm cu autoamplificare
ARN-ul cu autoamplificare cuprinde patru proteine nestructurale (denumite nsP1, nsP2, nsP3 și nsP4), care sunt derivate din alfavirusuri, virusul encefalitei ecvine venezuelene (VEEV). Printre acestea, nsP1 prezintă activități enzimatice duale, și anume GTază și N7MTază, în timp ce nsP2 posedă activitate RTPază, esențială pentru limitarea ARNm IVT pentru a genera structura Cap 0. În plus, nsP2 servește ca protează și helicază, facilitând procesarea complexă a întregului complex nsP. Funcția precisă a nsP3 rămâne evazivă, dar se angajează în interacțiuni cu diverse proteine celule gazdă, contribuind astfel la atenuarea răspunsului antiviral montat de gazdă.
O regiune promotor subgenomic al alfavirusului (SGP) este localizată înaintea genei de interes (GOI). Elementul SGP facilitează inițierea transcripției GOI prin ocolirea citirii secvenței care codifică proteinele virale nsP.
Fig.2 Sinteza și testele celulare ale saRNA eGFP ale platformei Yaohai Bio-Pharma RNASci.
Soluții personalizate de saRNA
Protocolul de sinteză al saRNA este similar cu ARNm: Sinteza mARN personalizată
- Proiectarea secvenței
- Pregătirea șablonului plasmidic
- transcriere in vitro (IVT)
- Capsul enzimatic al ARNm
- ARNm Co-transcripție Plasare
- Purificarea ARNm
- Liofilizarea ARNm
- Încapsularea LNP
- Analiză și Testare
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NU
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
