ADN plasmidic, ca in vitro șablonul de transcripție (IVT), este o materie primă importantă pentru fabricarea ARNm. Randamentul ridicat, purificarea ridicată și recuperarea ridicată a ADN-ului plasmidic este principala obiectiv în timpul dezvoltării procesului plasmidic.
Yaohai Bio-Pharma oferă o soluție unică pentru dezvoltarea plasmidelor, inclusiv dezvoltarea procesului în amonte (fermentare), în aval (purificare), caracterizarea procesului și validarea procesului. Avem o experiență vastă în îmbunătățirea randamentului plasmidelor și izolarea acesteia din matrice complexe prin dezvoltarea și optimizarea proceselor de fermentație, purificare și îndepărtare a impurităților.
Bioprocesul de bază pentru fabricarea plasmidelor include: Escherichia coli (E. coli) fermentație, recoltare celulară și liză alcalină, clarificare, concentrare, proces de cromatografie în trei etape (capturare, purificare intermediară și lustruire) și concentrare.
Detalii despre servicii | Operațiuni de unitate | parametrii |
E. coli fermentaţie |
Se agită balonul | Compozițiile mediilor, antibioticul, volumul inoculului, temperatura de creștere etc. |
fermentator (7 L) |
Antibiotic, volumul inoculului, temperatura de creștere, pH-ul, oxigenul dizolvat (DO), modul de alimentare (de exemplu, fed-batch), mediul de alimentare, timpul de fermentație etc. |
|
Recoltarea celulelor | microfiltrare | Standard E. coli procesul de recoltare |
Liza celulară | Resuspendare celulară, liză alcalină, neutralizare | Raport alcalin, timp de liză |
Clarificare | Filtrare | Filtrare brută, 20 µm și un tren de filtru de 5 µm (de preferat) |
Concentrare | Ultrafiltrare, filtrare cu flux tangențial | Dimensiunea porilor (sau NMWC), presiunea transmembranară (TMP), fluxul, raportul dintre volumul filtratului și suprafața membranei |
Cromatografia în trei etape | Cromatografia de excludere a mărimii (SEC) sau cromatografia de filtrare pe gel (GFC) | Lungimea și diametrul coloanei, compoziția tamponului, volumul de injectare, compoziția fazei mobile (adsorbție și desorbție), pH, debit, echilibrare, legare, spălare și condiții de eluare. |
Cromatografia de afinitate (AF) | ||
Cromatografia cu schimb de anioni (AEX) | ||
Concentrare | Ultrafiltrare, filtrare cu flux tangențial | Dimensiunea porilor (sau NMWC), presiunea transmembranară (TMP), fluxul, raportul dintre volumul filtratului și suprafața membranei |
Mai multe soluții pentru procesele de purificare a produselor biologice |