Cześć. Czy kiedykolwiek zastanawiałeś się, jak naukowcy mogą sklonować RNA? RNA to specjalna cząsteczka, którą znajdujemy w naszych komórkach i która robi mnóstwo rzeczy, aby produkować białka, a te białka są potrzebne, aby nasze ciało mogło wykonywać wszystkie niezbędne funkcje. W tym odcinku przeprowadzimy przegląd znacznie bardziej ciekawego protokołu stosowanego przez badaczy: in vitro transcript. A to oznacza, że naukowcy biorą RNA i produkują dużo go w probówce (która to mała szklanka, której używają laboratoria), więc przejdźmy do każdego kroku.
Po zakończeniu mojego poprzedniego wpisu uświadomiłem sobie, że ostatni mógł być trochę suchy - czas na przyłączenie się do zabawy w mokrym laboratorium; więc, zachowując formę, teraz gdy już naprawdę jesteś na pociągu zabawy (takiej, co polega na produkcji RNA): Jakie reagenty i co będziecie potrzebować dla waszego EF?? Aby to osiągnąć, będziemy potrzebować specjalnych białek nazywanych enzymami, identycznych z produktem Yaohai Produkcja rekombinacyjnego Midkine . Katalizuje reakcje chemiczne, te enzymy pomagają w rozkładowaniu. Więc teraz potrzebujemy tylko naszego kawałka DNA. Ta funkcja to DNA, które używamy jako szablon do kopiowania na nasze RNA. Dodatkowe sekwencje regulacyjne w RNA, mianowicie nukleotydy, są również potrzebne. Te nukleotydy są jak małe klocki budowlane, które muszą zostać złożone, aby utworzyć RNA. Używamy również krótkich rurek o małej średnicy, aby przeprowadzić ocenę smaku w inny sposób. Na koniec potrzebujemy maszyny (termocyklera), która zapewnia, że nasze reakcje mają odpowiednią temperaturę. Dodatkowo możemy potrzebować kilku narzędzi i produktów dla niektórych eksperymentów.
Tutaj rzeczy się rozchodzą, mamy jedną łańcuch RNA i teraz chcemy mieć więcej kopii tego łańcucha, również Produkcja Szczepionek VLP Związkowych został opracowany przez Yaohai. Sposób na osiągnięcie tego wyniku polega na użyciu innego enzymu; polimerazy RNA T7. Ten unikalny enzym, na przykład, rozpoznaje określone obszary wewnątrz RNA. Skakany konus do produkcji wielu kopii RNA w dalszym ciągu procesu. W tym punkcie, do łańcucha RNA będzie dodawany materiał przez polimerazę RNA T7, aż do stworzenia dużego transkryptu, lub aż powiemy jej, aby przestała.
Po izolowaniu RNA w jak największym stopniu przewiń dalej, aby zobaczyć, jak go oczyścić i przechowywać na przyszłe użycie. Rhoades: Niektóre z tych metod są nieco bardziej ekstremalne pod względem izolacji RNA — nie zawsze ich używasz, ale czasami dla niektórych typów eksperymentów jest to konieczne. Gdy nasz RNA będzie wolny od wszelkich zanieczyszczeń, może być przechowywany w stanie zamrożonym. W ten sposób jest bezpieczny i możemy go później wykorzystać w różnych eksperymentach.
Jakość materiału wyjściowego: upewnij się, że twój szablon DNA jest czysty i nie jest zniszczony. Możesz również uzupełnić свieżo przygotowane nukleotydy i nowo odtawione enzymy, aby maksymalizować szanse powodzenia eksperymentu.
Dopasowywanie warunków: Wszystkie enzymy i ich nukleotydy lepiej działają przy określonej temperaturze i pH w Twoim ciele, a także w ciele Yaohai Czerwona fluorescencyjna mRNA . Teraz delikatnie dostosuj subtelności między warunkami, aż dotrzesz do klucza dla Twojego unikalnego układu.
Odwracająca tranptykasa jest nietypowym enzymem, ponieważ tworzy kopię DNA z cząsteczki RNA. Użyliśmy zarówno DNK, jak i szablonu DNA (cDNA) jako wejścia dla naszej metody in vitro transkrypcji do generowania RNA. Jednak w większości eksperymentów naukowcy chcieliby przeprowadzić transkrypcję DNA na RNA. Odwrotna transkrypcja to stąd pochodzi jej nazwa. testowanie dystrybucji poli-A mRNA wyprodukowana przez Yaohai. Jest niezastąpionym narzędziem w całej nauce - od badania cząsteczek RNA w komórkach po produkcję komplementarnych łańcuchów DNA dla dalszych eksperymentów.
Rzeczywiste eksperymenty, w których RNA jest jednym z najczęściej używanych narzędzi molekularnych, wraz z produktem Yaohai Produkcja szczepionek VLP w E. coli testy ilościowe: Te badania mogą ujawnić ilość jakiegokolwiek określonego czynnika obecnego w próbie. Na przykład, naukowcy mogą syntetycznie przygotować transkrypcję in vitro, zawierającą kopie RNA pochodzące od wybranego genu zlokalizowanego w komórce. Diagnostyka może następnie przeprowadzić analizę tych kopii – w przypadku poszukiwania RNA, diagnostyka może wykonać reakcję łańcuchową polimerazy (PCR), aby wzmacniać te kopie w próbie. To sprawia, że naukowcy mogą zobaczyć, jak geny są ekspresowane w komórkach, a nawet umożliwia przeprowadzenie niektórych ekstremalnie szybkich testów, takich jak obecność infekcji bakteryjnej lub wirusowej oraz diagnozowanie zaburzeń genetycznych.
in vitro Transcript Protocol to przywódcza firma w dziedzinie CDMO biologicznych mikrobiologicznych. Skupiamy się na szczepionkach i lekach produkowanych drogą mikrobiologiczną, które są odpowiednie do zastosowań w medycynie ludzkiej, weterynarii oraz zarządzaniu zdrowiem zwierząt domowych. Dysponujemy najnowocześniejszymi platformami R&D oraz technologią produkcyjną, która obejmuje cały proces, od rozwoju szczepów mikrobiologicznych i banków komórkowych, po rozwój procedur i metod, aż do produkcji klinicznej i komercyjnej, co gwarantuje udane dostarczanie innowacyjnych rozwiązań. W ciągu czasu zgromadziliśmy ogromną wiedzę dotyczącą przetwarzania biolek mikrobiologicznych. Pomyślnie ukończyliśmy ponad 200 projektów i wspomagamy naszych klientów w zgodzie z regulacjami takimi jak US FDA i EU EMA. Pomagamy im również radzić sobie z wymaganiami Australia TGA i China NMPA. Nasze profesjonalne kompetencje i szeroki doświadczenie pozwalają nam szybko reagować na potrzeby rynku i oferować usługi CDMO dopasowane do indywidualnych potrzeb.
Yaohai Bio-Pharma ma doświadczenie w produkcji biologicznych stworzonych na podstawie protokołu transkrypcji in vitro. Ofiarowujemy niestandardowe rozwiązania w dziedzinie B+D i produkcji, jednocześnie zapewniając brak ryzyka. Byliśmy zaangażowani w różne modalności, takie jak szczepionki subjednostkowe rekombinowane, peptydy hormonów, cytokiny, czynniki wzrostu, antytopy jednodomenowe enzymy, DNA plazmidowe MRNA oraz wiele innych. Specjalizujemy się w wielu mikroorganizmach, w tym drożdżach sekrecji zewnętrznej i wewnętrznej (wydajność do 15g/L) oraz bakteriach rozpuszczalnych wewnątrzkomórkowych i ciałach inkluzyjnych (wydajność aż do 10g/L). Stworzyliśmy również platformę fermentacji BSL-2 do produkcji szczepionek bakteryjnych. Skupiamy się na poprawie procesów, zwiększeniu wydajności produktów i obniżeniu kosztów produkcji. Korzystając z silnego zespołu technologicznego, możemy zagwarantować szybkie i niezawodne realizację projektu, co przyspieszy wprowadzenie Twojego produktu na rynek.
Yaohai Bio-Pharma, jedna z 10 największych firm produkujących biopreparaty, specjalizuje się w fermentacji mikrobiologicznej. Zbudowaliśmy nowoczesną infrastrukturę z mocnymi możliwościami R&D oraz zaawansowanym wyposażeniem. Dysponujemy pięcioma liniami produkcji substancji czynnych, które spełniają wymagania GMP w zakresie fermentacji i oczyszczania mikrobiologicznego. Posiadamy również dwie zautomatyzowane linie wypełniania na kartridże, fiolki i szprycze prewypełnione. Skala fermentacji dostępna do użytku wynosi od protokołu in vitro Transcript do 2000L. Specyfikacje wypełniania fiolka obejmują objętości od 1ml do 25ml. Specyfikacje wypełniania szprytów prewypełnionych lub kartridży oscylują w przybliżeniu między 1-3ml. Nasza cGMP-zgodna placówka produkcyjna zapewnia stały dopływ próbek klinicznych oraz produktów komercyjnych. Nasza fabryka produkuję duże cząsteczki, które są dystrybuowane na całym świecie.
Yaohai BioPharma to jedna z 10 największych firm CDMO w zakresie mikrobiologii, która wykorzystuje protokół in vitro Transcript oraz zajmuje się sprawami regulacyjnymi. Dysponujemy systemem zarządzania jakością zgodnym z obecnymi standardami GMP oraz międzynarodow globalnymi regulacjami. Nasz zespół ekspertów w sprawach regulacyjnych jest kompetentny w globalnych ramach prawnych, aby przyspieszyć wprowadzanie biopreparatów na rynek. Zapewniamy śledzenie procesów produkcyjnych, jakość produktów oraz zgodność z przepisami US FDA i EU EMA. Australia TGA i Chiny NMPA są również zadowolone. Yaohai BioPharma pomyślnie przeszła inspekcję na miejscu przez Kwalifikowaną Osobę (QP) Unii Europejskiej w odniesieniu do naszego systemu jakości GMP oraz zakładu produkcyjnego. Ponadto uzyskaliśmy pozytywne wyniki podczas pierwszych audytów certyfikacyjnych Systemu Zarządzania Jakością ISO9001, Systemu Zarządzania Środowiskiem ISO14001 oraz Systemu Zarządzania Bezpieczeństwem i Higieną Pracy ISO45001.