Cześć. Czy kiedykolwiek zastanawiałeś się, jak naukowcy mogą klonować RNA? RNA to specjalna cząsteczka, którą znajdujemy w naszych komórkach, która wykonuje wiele czynności, aby wytwarzać białka, a białka są tam, aby nasze ciało mogło robić wszystkie właściwe rzeczy. W tej części przejdziemy przez o wiele ciekawszy protokół stosowany przez naukowców: transkrypt in vitro. A wszystko to oznacza, że naukowcy pobierają RNA i wytwarzają go w dużej ilości w probówce (czyli w tym małym słoiczku, którego używają laboratoria), więc przyjrzyjmy się każdemu krokowi tutaj.
Po skończeniu poprzedniego posta, zdałem sobie sprawę, że ostatni mógł być trochę suchy w stylu „dołącz do zabawy w mokrym laboratorium”; więc zgodnie z formą, teraz, gdy jesteś już w pociągu zabawy (sic RNA-making): Jakie odczynniki itp. będą potrzebne do twojego EF? Aby to osiągnąć, będziemy potrzebować specjalnych białek zwanych enzymami, identycznych z produktem Yaohai Produkcja rekombinowanych midkinów. Katalizuje reakcje chemiczne, te enzymy pomagają w rozkładzie. Więc teraz potrzebujemy tylko naszego kawałka DNA. Ta funkcja to DNA, którego używamy jako szablonu do skopiowania dla naszego RNA. Dodatkowe sekwencje regulacyjne w RNA, mianowicie nukleotydy, są również potrzebne. Te nukleotydy są jak maleńkie klocki, które muszą zostać złożone, aby utworzyć RNA. Wykorzystujemy również krótkie rurki o małej średnicy, aby wcisnąć ocenę smaku do innych. Na koniec potrzebujemy maszyny (termocyklera), która upewni się, że nasze reakcje przebiegają w odpowiedniej temperaturze. Dodatkowo możemy potrzebować kilku narzędzi i produktów do wszelkich określonych eksperymentów.
Tutaj sprawy się rozchodzą, mamy jedną nić RNA i teraz chcielibyśmy mieć więcej jej kopii, także Produkcja koniugowanych szczepionek VLP opracowany przez Yaohai. Sposób na wykorzystanie innego enzymu; polimerazy RNA T7. Ten unikalny enzym, na przykład, rozpoznaje określone obszary w RNA. stożek skokowy do tworzenia wielu kolejnych kopii RNA w trakcie. W tym momencie więcej zostanie dodanych do nici RNA przez polimerazę RNA T7, aż powstanie masa transkryptu lub dopóki nie powiemy jej, żeby przestała.
Po wyizolowaniu RNA tak bardzo, jak to możliwe, przewiń niżej, aby zobaczyć, jak oczyścić i przechowywać RNA do wykorzystania w przyszłości. Rhoades: Niektóre z tych metod są nieco bardziej ekstremalne pod względem izolowania RNA — nie zawsze byś ich używał, ale czasami w przypadku pewnych typów eksperymentów jest to potrzebne. Gdy nasze RNA jest wolne od zanieczyszczeń, można je przechowywać zamrożone. W ten sposób jest bezpieczne i możemy go później wykorzystać w różnych eksperymentach.
Jakość materiału wyjściowego: upewnij się, że Twój szablon DNA jest czysty i nie jest całkowicie spalony. Możesz również uzupełnić go świeżo zrekonstruowanymi nukleotydami i nowo rozmrożonymi enzymami, aby zmaksymalizować szanse na udany eksperyment.
Warunki precyzyjnego dostrajania Wszystkie enzymy i ich nukleotydy działają lepiej w określonej temperaturze i pH wewnątrz organizmu, podobnie jak Yaohai Czerwony fluorescencyjny mRNA. Teraz trochę dostosuj niuanse między warunkami, aż dojdziesz do miejsca, w którym jest klucz dla Twojej unikalnej konfiguracji.
Odwrotna transkryptaza to niezwykły enzym, ponieważ tworzy kopię DNA z cząsteczki RNA. Użyliśmy zarówno DNA, jak i matrycy DNA (cDNA) jako danych wejściowych do naszej metody transkryptu in vitro w celu generowania RNA. Jednak w większości eksperymentów naukowcy chcieliby przepisać DNA na RNA. Odwrotna transkrypcja jest tym, skąd wzięła się jej nazwa, tak samo jak Testowanie dystrybucji mRNA poly-A stworzone przez Yaohai. Jest to nieocenione narzędzie w nauce - od badania cząsteczek RNA wewnątrz komórek do produkcji komplementarnych nici DNA do dalszych eksperymentów.
Eksperymenty w warunkach rzeczywistych, w których RNA jest jednym z najczęściej stosowanych narzędzi molekularnych, wraz z produktem Yaohaia Produkcja szczepionki VLP u E. coli. Badania ilościowe: Te testy mogą ujawnić ilość dowolnej konkretnej cząsteczki obecnej w próbce. Na przykład naukowcy mogą syntetyzować preparat transkryptu in vitro kopii RNA pochodzących z docelowego genu zlokalizowanego w komórce. Diagnostyka może następnie zbadać te kopie, w przypadku gdy są one. szukając RNA, diagnostyka może uruchomić reakcję łańcuchową polimerazy (PCR), aby wzmocnić te kopie w próbce. Umożliwia to naukowcom zobaczenie, w jaki sposób geny są wyrażane na komórkach, a nawet pozwala na niektóre niezwykle wydajne testy, takie jak obecność infekcji bakteryjnej lub wirusowej, i diagnozowanie zaburzeń genetycznych.
in vitro Transcript Protocol jest wiodącym producentem biologicznych środków mikrobiologicznych CDMO. Skupiamy się na szczepionkach i terapiach wytwarzanych przy użyciu mikroorganizmów, które są odpowiednie dla ludzi, zwierząt, a także dla zwierząt domowych. Dysponujemy najnowocześniejszymi platformami RD i technologią produkcji, które obejmują całą procedurę, począwszy od rozwoju szczepów mikroorganizmów i bankowania komórek, przez rozwój procesów i metod, po produkcję komercyjną i kliniczną, co zapewnia pomyślne dostarczanie innowacyjnych rozwiązań. Z biegiem czasu zgromadziliśmy ogromną wiedzę na temat przetwarzania biologicznego opartego na mikroorganizmach. Ponad 200 projektów zostało pomyślnie ukończonych, a my pomagamy naszym klientom w przestrzeganiu przepisów, takich jak przepisy US FDA i EU EMA. Pomagamy im również poruszać się po australijskich TGA i chińskich NMPA. Nasza profesjonalna wiedza specjalistyczna i bogate doświadczenie pozwalają nam szybko reagować na zapotrzebowanie rynku i świadczyć niestandardowe usługi CDMO.
Yaohai Bio-Pharma ma doświadczenie w produkcji leków biologicznych tworzonych na podstawie protokołu transkryptu in vitro. Oferujemy dostosowane rozwiązania RD i produkcyjne, dbając jednocześnie o to, aby nie było żadnego ryzyka. Byliśmy zaangażowani w różne modalności, takie jak szczepionki podjednostkowe rekombinowane, peptydy, hormony, cytokiny, czynniki wzrostu, przeciwciała jednodomenowe, enzymy, DNA plazmidowe, mRNA i wiele innych. Specjalizujemy się w wielu mikroorganizmach, w tym w wydzielaniu zewnątrzkomórkowym i wewnątrzkomórkowym drożdży (wydajność do 15 g/l), a także w rozpuszczalnych wewnątrzkomórkowych ciałach bakteryjnych i ciałach inkluzyjnych (wydajność do 10 g/l). Stworzyliśmy również platformę fermentacji BSL-2 w celu tworzenia szczepionek bakteryjnych. Skupiamy się na ulepszaniu procesów, zwiększaniu wydajności produktu i obniżaniu kosztów produkcji. Wykorzystując silny zespół technologiczny, możemy zapewnić szybką i niezawodną realizację projektu, która szybciej wprowadzi Twój produkt na rynek.
Yaohai Bio-Pharma, jeden z 10 najlepszych producentów produktów biologicznych, specjalizuje się w fermentacji mikrobiologicznej. Zbudowaliśmy nowoczesny zakład z solidnymi możliwościami RD i zaawansowanym sprzętem. Posiadamy pięć linii produkcyjnych substancji leczniczych, które są zgodne z wymogami GMP dotyczącymi fermentacji mikrobiologicznej i oczyszczania. Posiadamy również dwie zautomatyzowane linie napełniania i wykańczania dla wkładów, fiolek i wstępnie napełnionych strzykawek. Dostępne do użytku skale fermentacji wahają się od protokołu in vitro Transcript do 2000L. Specyfikacje napełniania fiolki wahają się od 1 ml do 25 ml. Specyfikacje napełniania wstępnie napełnionych strzykawek lub wkładów wahają się od około 1 do 3 ml. Nasz zakład produkcyjny zgodny z cGMP zapewnia stałe dostawy próbek klinicznych, jak również artykułów komercyjnych. Nasz zakład produkuje duże cząsteczki, które są wysyłane na cały świat.
Yaohai BioPharma to jedna z 10 najlepszych mikrobiologicznych firm CDMO, która obejmuje protokół transkryptu in vitro, a także kwestie regulacyjne. Posiadamy system zarządzania jakością zgodny z obowiązującymi normami GMP, a także przepisami globalnymi. Nasz zespół ekspertów regulacyjnych jest biegły w globalnych ramach regulacyjnych, aby przyspieszyć wprowadzanie produktów biologicznych. Zapewniamy identyfikowalne procesy produkcyjne, produkty wysokiej jakości, a także zgodność z przepisami amerykańskiej FDA i unijnej EMA. Australia TGA i chiński NMPA są również zadowolone. Yaohai BioPharma pomyślnie przeszła audyt na miejscu przez Kwalifikowaną Osobę (QP) Unii Europejskiej dla naszego systemu jakości GMP, a także naszego zakładu produkcyjnego. Ponadto, zaliczyliśmy pierwsze audyty certyfikacyjne systemu zarządzania jakością ISO9001, systemu zarządzania środowiskowego ISO14001 i systemu zarządzania bezpieczeństwem i higieną pracy ISO45001.