mRNA lucyferazy świetlika (F-Luc). wykazuje ekspresję białka lucyferazy, pierwotnie wyizolowanego z świetlika Photinus pyralis. Białko to emituje bioluminescencję w obecności substratu, lucyferyny.
mRNA lucyferazy świetlika jest powszechnie stosowany jako kontrola pozytywna w transfekcji mRNA i rozwoju systemu dostarczania. Lucyferazę świetlika można również wykorzystać w hodowli komórek ssaków do pomiaru zarówno ekspresji genów, jak i żywotności komórek.
Yaohai Bio-Pharma oferuje produkty niezmodyfikowane lub zmodyfikowane N1Ψ mRNA lucyferazy świetlika, ze strukturą Cap1, zoptymalizowanymi kodonami, zmodyfikowanym UTR i 110-ntowym ogonem poliA, w celu poprawy stabilności mRNA i wydajności translacji.
Produkt
mRNA lucyferazy świetlika, Cap1, ogon poli(A), mRNA niezmodyfikowany lub zmodyfikowany
Szczegóły Produktu
| Produkt |
mRNA lucyferazy świetlika |
| Kot. Nie |
mP003 |
| Zawartość RNA |
100 µg ~ 10 mg (OD260) |
| Czystość |
A260 / A280 |
| Identyfikacja i czystość |
Elektroforeza w żelu agarozowym (AGE) |
| 5'Cap |
Cap1 |
| Ogon 3' z poli(A). |
110±5 nt |
| Modyfikacja bazy |
Niezmodyfikowany, N1Ψ |
| Bufor |
Woda wolna od RNaz (płyn) |
| Wysyłka |
Statek z suchym lodem; lub poniżej temperatury otoczenia |
| Magazynowanie |
Ciecz o temperaturze -20°C lub niższej; Liofilizowany proszek, w temperaturze 4°C |
| Zastosowanie |
Geny reporterowe, kontrola pozytywna |
Inne konfigurowalne opcje
| 5' Czapka |
● Bez ograniczeń
● Cap0, współograniczony
● Cap1, współograniczony
● Cap1, czapeczka enzymatyczna
|
| 5'UTR/3'UTR |
● Sekwencja natury UTR
● Zmutowana/zmodyfikowana sekwencja UTR
|
| 3' ogon PolyA |
● Ogon 100A ~120A (zalecany)
● Segmentowany ogon z poliA
● Inny niestandardowy ogon
|
| Zmodyfikowane nukleozydy |
● Niemodyfikowane podstawy,
● Pseudourydyna (Ψ),
● N1-metylopseudourydyna (N1Ψ),
● 5-metylocytozyna (m5C),
● 5-metylourydyna (m5U),
● 5-metoksyurydyna (5moU),
● 2-tiourydyna (s2U),
● 2′-O-metylo-U
● Pozostałe
|
Przygotowanie mRNA i ekspresja komórkowa
Pobranie linearyzowanego plazmidowego DNA (pDNA). mRNA F-Luc kodując geny jako matrycę IVT, otrzymaliśmy czyste transkrypty mRNA F-Luc poprzez kotranskrypcyjne kapowanie i oczyszczanie, ze strukturą cap1 i modyfikacją N1Ψ.
Czysty mRNA F-Luc (1 µg) zmieszany z dostępnym w handlu odczynnikiem do transfekcji transfekowano komórki 293T na 96-studzienkowej płytce. Po 24 godzinach przeprowadzono test lucyferazy.
Ekspresja mRNA lucyferazy Firefly w komórkach 293T
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NIE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
