Categorie
ENEN
Servizi di preparazione delle proteine ​​senza tag

Servizi di preparazione delle proteine ​​senza tag

Casa >  Servizi di preparazione delle proteine ​​senza tag

Servizi di preparazione delle proteine ​​senza tag

I tag proteici, come partner di fusione utilizzati nelle tecnologie del DNA ricombinante, consentono un'efficace purificazione di affinità in un unico passaggio per varie proteine/peptidi con caratteristiche diverse. Nonostante questo importante vantaggio, i tag degli amminoacidi esogeni possono alterare la struttura proteica e le funzioni biologiche. Pertanto, proteine ​​o peptidi non marcati (privi di tag) sono maggiormente preferiti per garantire sicurezza ed efficacia, soprattutto nel campo biofarmaceutico. Una proteina ricombinante con un tag di fusione ha possibilità limitate di ottenere l'autorizzazione da parte di agenzie mediche/di somministrazione di farmaci.

Basandosi sulla piattaforma di ricerca e sviluppo di prodotti biologici microbici, Yaohai Bio-Pharma offre servizi personalizzati di preparazione di proteine ​​senza tag (senza tag) dedicati a soddisfare obiettivi unici di ricerca, sviluppo e produzione per uso clinico.

Parole chiave: produzione di proteine ​​senza tag, purificazione di proteine ​​senza tag, preparazione di proteine ​​basata su tag liberi, espressione e purificazione di proteine ​​senza tag, proteina bersaglio altamente priva di tag Applicazione: ricerca sulla medicina umana, sviluppo di medicina animale, sviluppo di vaccini ricombinanti, grande molecola ricombinante produzione di prodotti biologici


La nostra piattaforma di ricerca e sviluppo microbico

Abbiamo esperienza nell'ingegneria dei ceppi microbici, nella fermentazione e nella purificazione dei prodotti.

Batteri: Escherichia coli (E. coli)

Lievito: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Opzioni personalizzate

Modalità Proteina ricombinante
Materiali di partenza Sequenze genetiche, plasmidi ricombinanti o ceppi ingegnerizzati
Risultati finali Purificazione: >80%, >85%, >90% Quantità: 0.2~10 g (da determinare in base al progetto)
Sistema di espressione e formazione Secrezione periplasmatica di E. coli, espressione di corpi solubili e inclusi; Espressione intracellulare o di secrezione del lievito
Metodi di analisi Ultravioletto (UV), test dell'acido bicinconinico (BCA), Bradford o Lowry per la quantitàElettroforesi su gel di poliacrilammide con sodio dodecil-solfato (SDS-PAGE) per test di purificazioneOpzionale: Western blot (WB), test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA), ad alte prestazioni cromatografia liquida (HPLC)
Impurità residue Endotossina (opzionale)

Dettagli sui servizi

Servizi i dettagli del servizio Tempistica minima (giorno lavorativo)
Sintesi genica Ottimizzazione del codone per host di espressioni specifiche 7 ~ 10 giorni
Sintesi genica
Costruzione di plasmidi/vettori Clonazione in plasmide/vettore 2 giorni
Trasformazione plasmidica
Verifica della reazione a catena della polimerasi (PCR), digestione con enzimi di restrizione, sequenziamento genico 3 giorni
Espressione proteica in E. coli Trasformazione plasmidica, 2 giorni
Coltivazione in agitazione 3 giorni
Fermentazione in sacchi da 7 litri, ottimizzazione 4 giorni/lotto
Purificazione delle proteine ​​senza tag, ottimizzazione 5~10 giorni/lotto
Test mediante elettroforesi su gel di poliacrilammide con sodio dodecil-solfato (SDS-PAGE)
Espressione delle proteine ​​nel lievito Preparazione delle cellule competenti del lievito 4 giorni
Linearizzazione ed elettrotrasformazione dei plasmidi
Fermentazione in sacchi da 7 litri, ottimizzazione 5 giorni
Purificazione delle proteine ​​senza tag, ottimizzazione 7 giorni/lotto
Purificazione delle proteine ​​senza tag 5~10 giorni/lotto
Controllo qualità tramite SDS-PAGE

Servizi aggiuntivi (facoltativi)

Sviluppo del processo di fermentazione

Sviluppo del processo di purificazione delle proteine ​​senza tag

Sviluppo pilota e produzione GMP

Analisi e test

Le nostre caratteristiche

Abbiamo lavorato su più di 300 ceppi microbici ingegnerizzati, tra cui E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115; Ceppo PichiaRosa1/2/3/4; e H. polymorpha.

Abbiamo esperienza con la secrezione periplasmatica di E. coli, l'espressione di corpi solubili e inclusi, nonché l'espressione intracellulare o di secrezione di lievito.

Creiamo una piattaforma di screening ad alto rendimento per selezionare ceppi stabili e ad alta produzione da oltre cento ceppi candidati.

Ottieni un preventivo gratuito

Mettiti in contatto