Categorie
ENEN
Sintesi di circRNA personalizzata

Sintesi di circRNA personalizzata

Casa >  RNA dell'IVT  >  Sintesi di RNA personalizzata  >  Sintesi di circRNA personalizzata

RNA dell'IVT

Sintesi di circRNA personalizzata

L'mRNA circolare (circRNA) è stato ampiamente utilizzato nello studio delle funzioni di geni o proteine. Nel frattempo, è popolare nello sviluppo di prodotti biologici profilattici e terapeutici, simili all’mRNA.

Yaohai Bio-Pharma ha creato una serie di tecnologie di sintesi del circRNA per fornire RNA di alta qualità, come la progettazione e l'ottimizzazione delle sequenze, la trascrizione in vitro (IVT), la circolarizzazione/ciclizzazione, la purificazione e l'incapsulamento di nanoparticelle lipidiche (LNP). Tutti i prodotti vengono rilasciati secondo rigorosi standard di controllo qualità (QC).

Applicazioni CircRNA

Rispetto all'mRNA lineare, l'RNA circolare (circRNA) ha una struttura più stabile ed è un importante punto caldo nell'attuale ricerca sui farmaci sugli acidi nucleici. Ha una vasta gamma di applicazioni in diversi campi, sia come circRNA codificante che non codificante, compresi vaccini profilattici per malattie infettive, vaccini oncologici terapeutici, farmaci oncologici terapeutici, terapia sostitutiva proteica, medicina rigenerativa, terapia cellulare e genica (CGT). , ruolo della spugna molecolare e aptamero dell'RNA.

i dettagli del servizio
Processo Servizio opzionale i dettagli del servizio Periodo di consegna (giorno)
Progettazione e ottimizzazione della sequenza circRNA Progettazione e ottimizzazione delle sequenze di codifica Ottimizzazione del codone CDS 1
Progettazione e ottimizzazione di sequenze non codificanti Sequenza di introni ed esoni, progettazione e ottimizzazione di bracci omologhi e spaziatori 1-2
Preparazione del plasmide circolare Sintesi genica Sintesi genica (di terze parti) 7-10
Amplificazione plasmidica Amplificazione plasmidica 2
Estrazione del plasmide
Preparazione del plasmide linearizzato Linearizzazione e purificazione dei plasmidi Linearizzazione dei plasmidi 1
Linearizzazione Purificazione del DNA
Trascrizione e ciclizzazione in vitro Trascrizione e ciclizzazione in vitro Reazioni di trascrizione e ciclizzazione in vitro 1-2
Digestione della RNasi R
Ottimizzazione facoltativa Composizione della reazione, ottimizzazione dei tempi 2-5
Purificazione del circRNA Metodo di purificazione convenzionale Precipitazioni del cloruro di litio 1
Purificazione delle perle magnetiche 1
Purificazione del circRNA altamente pura Cromatografia liquida preparativa ad alta prestazione (HPLC) 1-2
Scambio di buffer Ultrafiltrazione 1
Liofilizzazione del circRNA Riempimento del campione Ripieno 2-3
liofilizzazione Precongelamento
Essiccazione primaria (sublimazione)
Essiccazione secondaria (desorbimento)
Incapsulamento circRNA-LNP Incapsulamento LNP Pretrattamento materiali e liquidi 2
Miscelazione di dispositivi microfluidici
Scambio di buffer Filtrazione a flusso tangenziale 1
Sterilizzare Filtrazione
Controllo di qualità del DNA plasmidico Concentrazione/purezza Spettrofotometria ultravioletta (UV). 1-2
Conformazione plasmidica Elettroforesi su gel di agarosio (AGE)
Elettroforesi capillare (CE)-Opzionale
Identificazione del plasmide Identificazione degli enzimi di restrizione/AGE
Controllo di qualità del circRNA Concentrazione/purezza Spettrofotometria ultravioletta (UV). -
Purezza Elettroforesi su gel di agarosio (AGE)/E-Gel 0.5
HPLC opzionale 1
Controllo di qualità del circRNA-LNP Efficienza di incapsulamento Metodo RiboGreen 1
Dimensione delle particelle Dispersione dinamica della luce (DLS) 1
Indice di polidispersità Dispersione dinamica della luce (DLS) 1
Potenziale Zeta Dispersione dinamica della luce (DLS) 1
Saggio di potenza basato su cellule Trasfezione cellulare Placcatura cellulare, trasfezione cellulare 4
Rilevamento delle proteine ​​target Osservazione della fluorescenza, Western Blot/ELISA 1-3
Argomento di studio

Abbiamo trasfettato il circRNA della proteina fluorescente verde potenziata (circRNA eGFP), il circRNA mCherry, il circRNA luciferasi in cellule 293T e abbiamo rilevato la proteina bersaglio attraverso fluorescenza, segnale luminescente o colorato, western blot (WB), test immunoassorbente legato a enzimi (ELISA).

Saggi di potenza basati su cellule di campioni di circRNA di Yaohai Bio-Pharma

Ottieni un preventivo gratuito

Mettiti in contatto