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Sviluppo plasmidico

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RNA dell'IVT

Sviluppo plasmidico

DNA plasmidico, come in vitro modello di trascrizione (IVT), è una materia prima importante per la produzione di mRNA. L'elevata resa, l'elevata purificazione e l'elevato recupero del DNA plasmidico sono i principali obiettivo durante lo sviluppo del processo plasmidico.

Yaohai Bio-Pharma fornisce una soluzione completa per lo sviluppo di plasmidi, compreso lo sviluppo del processo a monte (fermentazione), a valle (purificazione), la caratterizzazione del processo e la convalida del processo. Abbiamo una vasta esperienza nel migliorare la resa del plasmide e isolarlo da matrici complesse sviluppando e ottimizzando i processi di fermentazione, purificazione e rimozione delle impurità. 

i dettagli del servizio

Il bioprocesso di base per la produzione di plasmidi include: Escherichia coli (E. coli) fermentazione, raccolta cellulare e lisi alcalina, chiarificazione, concentrazione, processo cromatografico in tre fasi (cattura, purificazione intermedia e lucidatura) e concentrazione.

i dettagli del servizio Operazioni di unità parametri
E. coli fermentazione
 Agitare la boccetta Composizioni dei terreni, antibiotico, volume dell'inoculo, temperatura di crescita, ecc.

fermentatore (7 L)

Antibiotico, volume dell'inoculo, temperatura di crescita, pH, ossigeno disciolto (DO), modalità di alimentazione (ad esempio, fed-batch), terreno di alimentazione, tempo di fermentazione, ecc.
Raccolta di cellule microfiltrazione Standard E. coli processo di raccolta
Lisi cellulare Risospensione cellulare, lisi alcalina, neutralizzazione Rapporto alcali, tempo di lisi
Chiarificazione Filtrazione Filtrazione grezza, treno di filtri da 20 µm e 5 µm (preferibile)
Concentrazione Ultrafiltrazione, filtrazione a flusso tangenziale Dimensione dei pori (o NMWC), pressione transmembrana (TMP), flusso, rapporto tra volume del filtrato e area della membrana  
Cromatografia in tre fasi Cromatografia di esclusione dimensionale (SEC) o cromatografia di filtrazione su gel (GFC)  Lunghezza e diametro della colonna, composizione del tampone, volume di iniezione, composizione della fase mobile (adsorbimento e desorbimento), pH, portata, condizioni di equilibrazione, legame, lavaggio ed eluizione.
Cromatografia di affinità (AF)
Cromatografia a scambio anionico (AEX)
Concentrazione Ultrafiltrazione, filtrazione a flusso tangenziale Dimensione dei pori (o NMWC), pressione transmembrana (TMP), flusso, rapporto tra volume del filtrato e area della membrana 
Altre soluzioni per il processo di purificazione dei prodotti biologici
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