Az in vitro ciklizálással és az RNáz R dúsításával nyert termékeket tovább kell eltávolítani az in vitro transzkripcióból (IVT), beleértve a ciklizációs reakcióban fel nem használt szubsztrátokat, a reakció melléktermékeit és a bevágott RNS-t.
A Yaohai Bio-Pharma kiforrott LiCl kicsapással, mágneses gyöngy tisztítással, saját fejlesztésű tisztítással és más változatos tisztító megoldásokkal rendelkezik a különféle szennyeződések hatékony eltávolítására és a nagy tisztaságú cirkRNS előállítására.
Tisztító oldat kis mennyiségű cirkRNS-hez sejttranszfekcióhoz és állatkísérletek részeként.
Tisztító oldat kis mennyiségű cirRNS-hez sejttranszfekcióhoz és állatkísérletek részeként.
Alkalmazási forgatókönyvek magasabb minőségben;
Stabil és méretezhető tisztítási folyamat, hogy megfeleljen a GMP gyártási követelményeknek.
folyamat | Választható szolgáltatás | Szolgáltatás részletei | Szállítási időszak (nap) | teljesítések |
cirRNS-tisztítás | Hagyományos tisztító oldat | Lítium-kloridos kicsapás | 1 | cirkRNS gyógyszeranyag |
Mágneses gyöngy tisztítás | ||||
Nagy tisztaságú cirRNS tisztítás | Preparatív nagy teljesítményű folyadékkromatográfia (HPLC) | 1-2 | ||
Puffercsere | Ultrafiltráció | 1 | ||
cirRNS minőségellenőrzés | Koncentrálás/tisztítás | Ultraibolya (UV) spektrofotometria | 0.5 | Vizsgálati jelentés |
Tisztaság | Agaróz gél elektroforézis (AGE)/E-gél | |||
HPLC opcionális | 1 |
Alkalmazási forgatókönyvek megvalósíthatók.
90%-nál nagyobb tisztaságú cirkRNS;
A kísérleti környezetben és a fogyóeszközökben az RNázok szigorú szabályozása révén az RNS lebomlása hatékonyan megelőzhető.
A Yaohai Bio-Pharma kifejlesztett egy érett cirRNS-tisztító oldatot, amely hatékonyan képes eltávolítani a különféle folyamatokkal kapcsolatos szennyeződéseket.
A hagyományos oldattal tisztított cirkuláris RNS-termékek még mindig nyilvánvalóan keverednek a bemetszett RNS-sel és intronokkal.
A Yaohai Bio-Pharma által kifejlesztett tisztítóoldat után a különböző lineáris RNS-szennyeződések, mint például a bemetszett RNS és az intronok sikeresen eltávolíthatók.
circRNS Expression Validation
Hagyományos liposzóma alkalmazásával a tisztított eGFP cirRNS-t 293T-sejtekbe transzfektáljuk, és 24 óra elteltével fluoreszcens jelet figyelünk meg, amely 48 óra elteltével tovább erősödik. A fluoreszcencia jel a transzfekciót követő 7. és 14. napon még kimutatható.