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Services de préparation de protéines sans étiquette

Services de préparation de protéines sans étiquette

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Services de préparation de protéines sans étiquette

Les étiquettes protéiques, en tant que partenaires de fusion utilisés dans les technologies d’ADN recombinant, permettent une purification par affinité efficace en une seule étape pour diverses protéines/peptides présentant des caractéristiques différentes. Malgré cet avantage important, les acides aminés exogènes peuvent altérer la structure des protéines et leurs fonctions biologiques. Par conséquent, les protéines ou peptides non marqués (sans tag) sont davantage préférés pour garantir la sécurité et l’efficacité, en particulier dans le domaine biopharmaceutique. Une protéine recombinante avec une étiquette de fusion a des possibilités limitées d'obtenir une autorisation auprès des agences médicales/d'administration des médicaments.

Basé sur la plateforme de R&D de produits biologiques microbiens, Yaohai Bio-Pharma propose des services personnalisés de préparation de protéines non étiquetées (Tag-free) dédiés à la réalisation d'objectifs uniques de recherche, de développement et de fabrication à usage clinique.

Mots clés : production de protéines sans étiquette, purification de protéines non marquées, préparation de protéines basée sur des étiquettes libres, expression et purification de protéines sans étiquette, protéine cible hautement sans étiquette. Application : recherche en médecine humaine, développement de la médecine animale, développement de vaccins recombinants, grosse molécule recombinante. production de produits biologiques


Notre plateforme de R&D microbienne

Nous sommes expérimentés dans l’ingénierie des souches microbiennes, la fermentation et la purification des produits.

Bactéries : Escherichia coli (E. coli)

Levure : Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Options personnalisées

ModalitéProtéine recombinante
Matières premièresSéquences génétiques, plasmides recombinants ou souches modifiées
(produits) livrablesPurifier : >80%, >85%, >90% Quantité : 0.2~10 g (à déterminer par le projet)
Système d'expression et formationSécrétion périplasmique d'E. coli, expression du corps soluble et d'inclusion ; Expression intracellulaire ou sécrétion de levure
Méthodes d'analyseTest d'ultraviolet (UV), d'acide bicinchoninique (BCA), Bradford ou Lowry pour la quantité Électrophorèse sur gel de polyacrylamide de dodécyl-sulfate de sodium (SDS-PAGE) pour les tests de purification En option : Western blot (WB), test immuno-enzymatique (ELISA), haute performance chromatographie liquide (HPLC)
Impuretés résiduellesEndotoxine (facultatif)

Détails des services

ServicesDétails du serviceDélai minimal (jour ouvrable)
Synthèse des gènesOptimisation des codons pour un hôte d'expression spécifique7 ~ jours 10
Synthèse des gènes
Construction plasmidique/vecteurClonage dans un plasmide/vecteur2 jours
Transformation plasmidique
Vérification par réaction en chaîne par polymérase (PCR), digestion par enzymes de restriction, séquençage de gènes3 jours
Expression des protéines dans E. coliTransformation plasmidique,2 jours
Culture en shake flask3 jours
Fermentation en sac 7L, optimisation4 jours/lot
Purification et optimisation des protéines sans étiquette5 ~ 10 jours/lot
Test par électrophorèse sur gel de polyacrylamide et de dodécylsulfate de sodium (SDS-PAGE)
Expression des protéines dans la levurePréparation de cellules compétentes de levure4 jours
Linéarisation et électrotransformation des plasmides
Fermentation en sac 7L, optimisation5 jours
Purification et optimisation des protéines sans étiquette7 jours/lot
Purification des protéines sans étiquette5 ~ 10 jours/lot
CQ par SDS-PAGE

Services supplémentaires (facultatifs)

Développement de processus de fermentation

Développement de processus de purification de protéines sans étiquette

Mise à l’échelle pilote et fabrication GMP

Analyse et tests

Nos offres

Nous avons travaillé sur plus de 300 souches microbiennes modifiées, notamment E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21 ; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115 ; Souche PichiaPink1/2/3/4 ; et H. polymorpha.

Nous sommes expérimentés dans la sécrétion périplasmique d'E. coli, l'expression des corps solubles et d'inclusion, ainsi que l'expression intracellulaire ou par sécrétion de levure.

Nous établissons une plateforme de criblage à haut débit pour cribler des souches stables et hautement productives parmi plus d’une centaine de souches candidates.

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