L’ARNm a été largement utilisé dans l’étude des fonctions des gènes ou des protéines. Parallèlement, cette pratique est courante dans le développement de produits biologiques prophylactiques et thérapeutiques. En tant que stratégie de synthèse courante pour les molécules d'ARN, la transcription in vitro (IVT) nous permet d'obtenir efficacement des transcriptions personnalisées.
Yaohai Bio-Pharma a mis au point un ensemble de technologies de synthèse d'ARNm pour fournir un ARN de haute qualité, telles que la conception et l'optimisation de séquences, l'IVT, la purification, la lyophilisation et l'encapsulation de nanoparticules lipidiques (LNP). Tous les produits sont commercialisés sous des normes strictes de contrôle de qualité (CQ).
Avec l'apparition de la pandémie de COVID-19 en 2020, la technologie de l'ARNm a progressé à pas de géant, et ses recherches et applications connexes ont connu un développement sans précédent, notamment les vaccins prophylactiques pour la prévention des maladies infectieuses, les vaccins et médicaments thérapeutiques en oncologie, la thérapie tumorale, les protéines. thérapie de remplacement, médecine régénérative et thérapie cellulaire et génique (CGT).
Vaccin à ARNm | Thérapeutique à base d'ARNm |
Thérapeutique à base d'ARNm comme remplacement des protéines |
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Processus | Service en option | Détails du service | Délai de livraison (jour ouvrable) | Livrable |
Conception et optimisation de séquences d'ARNm | Conception et optimisation de séquences de codage | Conception de séquences CDS et optimisation des codons | 1-3 | Fichier de séquence |
Conception et optimisation de séquences non codantes | Conception et optimisation de séquences UTR, polyA | |||
Préparation du plasmide du modèle de transcription | Préparation de plasmide recombinant | Synthèse des gènes | 7-10 | |
Amplification et extraction de plasmides | 4 | |||
Linéarisation et purification des plasmides | ||||
Transcription in vitro de l'ARNm | Coiffage co-transcriptionnel (méthode en une étape) | Transcription in vitro (IVT) / Analogue Cap | 1-2 | N/D |
Modifications nucléotidiques (modifications UTP/CTP) | ||||
Suppression de la matrice d'ADN (DNase I) | ||||
Coiffage enzymatique (processus en deux étapes) | IVT | 2-3 | ||
Modifications nucléotidiques (modifications UTP/CTP) | ||||
Suppression de la matrice d'ADN (DNase I) | ||||
Purification de l'ARNm (chlorure de lithium/billes magnétiques) | ||||
Coiffage enzymatique | ||||
Purification de l'ARNm | Schéma d'épuration conventionnel | Précipitation du chlorure de lithium | 1 | substance médicamenteuse à ARNm |
Purification par billes magnétiques | ||||
Schéma de purification de la colonne de chromatographie | Combinaison de plusieurs méthodes de chromatographie | 1-2 | ||
Échange de tampon | Ultrafiltration | 1 | ||
Lyophilisation de l'ARNm | Lyophilisation | Pré-congélation | 2-3 | Poudre lyophilisée d'ARNm |
Séchage primaire (sublimation) | ||||
Séchage secondaire (désorption) | ||||
ARNmEncapsulation | Encapsulation LNP | Encapsulation LNP | 2-3 | ARNm-LNPProduit médicamenteux |
Concentration et échange de tampon | ||||
Analyse de la qualité de l'ARNm | Substance médicamenteuse à ARNm/poudre lyophilisée | Concentration, pureté | 1 | Rapport d'essai |
Intégrité, efficacité de coiffage, distribution de queue polyA | 2-5 | |||
Produit médicamenteux ARNm-LNP | Efficacité de l'encapsulation | 1 | ||
Taille et distribution des particules | ||||
Charge superficielle | ||||
Validation de l'expression de l'ARNm | Évaluation des cellules 293T | Placage cellulaire | 4 | |
Transfection transitoire de cellules | ||||
Observation du signal de fluorescence | 1-3 | |||
Western blot (WB)/Test immuno-enzymatique (ELISA) |
Casquette 5' | ▪ Non plafonné ▪ Cap0, co-plafonné ▪ Cap1, co-plafonné ▪ Cap1, coiffage enzymatique |
5'UTR/3'UTR | ▪ Séquence UTR nature ▪ Séquence UTR Mutant/Ingénierie |
Queue PolyA 3' | ▪ Queue 100 A ~ 120 A (recommandé) ▪ Queue polyA segmentée ▪ Autres queues personnalisées |
Nucléosides modifiés | ▪ Bases non modifiées ▪ Pseudouridine (Ψ) ▪ N1-Méthylpseudouridine (N1Ψ) ▪ 5-méthylcytosine (m5C) ▪ 5-méthyluridine (m5U) ▪ 5-méthoxyuridine (5moU) ▪ 2-thiouridine (s2U) ▪ 2′-O-méthyl-U ▪ Autres modifications |
Flux de services intégré
Fournissez une série de services allant de la conception de séquences frontales à la préparation d’ARNm back-end, en passant par le contrôle qualité et la validation de l’expression.
Conception et optimisation de séquences internationales de pointe
La conception et l’optimisation professionnelles de séquences d’ARNm facilitent une expression efficace de l’ARNm.
Modifications diversifiées des nucléotides
Augmente efficacement l'expression de l'ARNm et réduit les réponses immunitaires indésirables de l'ARNm.
Plateforme de purification mature
En combinant une méthode de purification conventionnelle et auto-conçue, les échantillons d'ARNm sont obtenus avec une grande pureté
Plateforme CQ complète
Enrichissez les options de contrôle qualité pour répondre aux exigences des tests de routine, telles que la concentration, la pureté et l'intégrité A260/280, ainsi qu'aux exigences élevées de contrôle qualité, telles que l'efficacité du plafonnement/la distribution polyA.
Livraison rapide
L’ARNm personnalisé peut être livré en 7 jours seulement, sauf pour la synthèse de séquences externalisée.