Process |
Service optionnel |
Détails du service |
Période de livraison (jour ouvrable) |
Résultat attendu |
conception et optimisation de la séquence d'ARNm |
Conception et optimisation des séquences codantes |
Conception de séquences CDS et optimisation des codons |
1-3 |
Fichier de séquence |
Conception et optimisation des séquences non codantes |
Conception et optimisation des UTR, séquences polyA |
Préparation du plasmide modèle de transcription |
Préparation de plasmide recombinant |
Synthèse de gènes |
7-10 |
Amplification et extraction de plasmides |
4 |
Linéarisation et purification des plasmides |
transcription in vitro de l'ARNm |
Mise en chapeau co-transcriptionnelle (méthode en un pas) |
Transcription in vitro (IVT) / Analogue de cap |
1-2 |
N/A |
Modifications des nucléotides (modifications UTP/CTP) |
Élimination du modèle d'ADN (DNase I) |
Cappage enzymatique (procédé en deux étapes) |
IVT |
2-3 |
Modifications des nucléotides (modifications UTP/CTP) |
Élimination du modèle d'ADN (DNase I) |
purification de l'ARNm (précipitation au chlorure de lithium/boules magnétiques) |
Cappage enzymatique |
purification de l'ARNm |
Schéma de purification conventionnel |
Précipitation au chlorure de lithium |
1 |
substance médicinale ARNm |
Purification par boules magnétiques |
Schéma de purification par colonne chromatographique |
Combinaison de plusieurs méthodes de chromatographie |
1-2 |
Échange de tampon |
Ultrafiltration |
1 |
lyophilisation de l'ARNm |
Lyophilisation |
Précongélation |
2-3 |
poudre lyophilisée d'ARNm |
Séchage primaire (soufflimation) |
Séchage secondaire (désorption) |
encapsulation d'ARNm |
Encapsulation en LNP |
Encapsulation en LNP |
2-3 |
produit pharmaceutique ARNm-LNP |
Concentration et échange de tampon |
analyse de la qualité de l'ARNm |
substance médicinale ARNm / poudre lyophilisée |
Concentration, pureté |
1 |
Rapport d'essai |
Intégrité, efficacité du capping, distribution de la queue polyA |
2-5 |
produit médicinal ARNm-LNP |
Efficacité d'encapsulation |
1 |
Taille et distribution des particules |
Charge de surface |
validation de l'expression de l'ARNm |
évaluation des cellules 293T |
Mise en culture cellulaire |
4 |
Transfection transitoire des cellules |
Observation du signal de fluorescence |
1-3 |
Western blot (WB) / Analyse par enzyme-liée immuno-sorbent (ELISA) |