سلام. آیا هرگز فکر کردید که دانشمندان چطور میتوانند RNA را کلون کنند؟ RNA مولکول خاصی است که در سلولهای ما پیدا میشود و کارهای زیادی انجام میدهد تا پروتئینها را تولید کند، و پروتئینها وجود دارند تا بدن ما تمام کارهای لازم را انجام دهد. در این قسمت، ما به طور مرحلهای بر روی پروتکل جالبتری که تحقیقکنندگان استفاده میکنند، یعنی «transcript in vitro» راهنمایی خواهیم داشت. و معنی این است که دانشمندان RNA را در یک لوله آزمایش (که ظرف کوچکی است که آزمایشگاهها از آن استفاده میکنند) تولید میکنند، پس بیایید به هر مرحله از این فرآیند بپردازیم.
پس از اتمام نوشته قبلی من، متوجه شدم که ممکن است آخرین نوشته کمی خشک بوده باشد - بیایید در پستهای آزمایشگاهی مرطوب شرکت کنیم؛ بنابراین، با این حال که حالا کاملاً روی قطار سرگرمی (RNA سازی) هستید: مواد شیمیایی و... که برای EF شما نیاز دارید چیست؟ برای انجام این کار، ما نیاز به پروتئینهای خاصی داریم که آنزیمها نامیده میشوند، مشابه محصول Yaohai تولید میدکین بازتولیدی آن enzymها که واکنشهای شیمیایی را کاتالیز میکنند، در تجزیه کمک میکنند. پس حالا ما فقط به قطعهای از DNA نیاز داریم. این تابع، DNA است که ما آن را به عنوان الگو برای کپی کردن RNA استفاده میکنیم. توالیهای تنظیمی اضافی در RNA نیز، به نام نوکلئوتیدها، لازم هستند. این نوکلئوتیدها مانند بلوکهای کوچکی هستند که باید جمع آوری شوند تا RNA ساخته شود. ما همچنین لولههای کوتاه با قطر کوچک را برای ارزیابی طعم به کار میبریم. در نهایت، ما به یک دستگاه (thermocycler) نیاز داریم که مطمئن شود واکنشها در دمای مناسب انجام میشوند. علاوه بر این، ممکن است برای آزمایشهای خاص به چند ابزار و محصول نیاز داشته باشیم.
پس از اینجا مسیر ها جدا می شوند، ما یک رشته RNA داریم و حالا می خواهیم کپی های بیشتری از آن داشته باشیم، همچنین تولید واکسنهای VLP ترکیبی توسط یائوهای توسعه یافته است. راه رسیدن به اینکه از آنزیم دیگری استفاده کنیم؛ پلیمراز RNA T7. این آنزیم منحصربهفرد، به عنوان مثال، نواحی خاص داخل RNA را تشخیص می دهد. یک مخروطه جهش برای ساختن کپی های بیشتری از RNA در مرحله بعدی. در این نقطه، تا زمانی که یک مقدار زیادی از ترانسکریپت ایجاد شود یا تا زمانی که به آن فرمان دهیم تا متوقف شود، توسط پلیمراز RNA T7 به رشته RNA اضافه خواهد شد.
بعد از آنکه ما به اندازهٔ ممکن RNA را جدا کردهایم، بیشتر پایین تمرکز کنید تا ببینید چگونه میتوانید آن را تمیز کرده و برای استفادهٔ آینده ذخیره کنید. رودز: بعضی از این روشها کمی در سوی حدود فراگیرتری برای جداسازی RNA قرار دارند — شما همیشه از آن استفاده نمیکنید، اما گاهی برای نوع خاصی از آزمایشات لازم است. وقتی RNA ما از هر آلودگی پاک میشود، میتواند در حالت یخ زده ذخیره شود. این روش امن است و ما بعداً میتوانیم آن را در آزمایشات مختلف استفاده کنیم.
کیفیت مادهٔ اولیه: مطمئن شوید که الیاف DNA شما تمیز باشد و کاملاً سوزی نرفته باشد. شما همچنین میتوانید با اضافه کردن نوکلئوتیدهای تازه تجدید شده و آنزیمهای تازه گشوده، احتمال موفقیت آزمایش را حداکثر کنید.
تنظیم دقیق شرایط: تمام آنزیمها و نوکلئوتیدهای آنها در دمای خاص و pH داخل بدن شما بهتر کار میکنند، و همچنین در Yaohai. MRNA Florescent قرمز . حالا شرایط را کمی تنظیم کنید تا به نقطهای برسید که کلید موفقیت برای تنظیمات منحصر به فرد شماست.
ترانسکریپتاز معکوس انزیمی غیرمعمول است، زیرا از یک مولکول RNA کپی DNA میسازد. ما هر دو DNAs و یک الگوی DNA (cDNA) را به عنوان ورودی برای روش ترانسکریپتیون در محیط بیرونی برای تولید RNA استفاده کردیم. با این حال، در بیشتر آزمایشها، دانشمندان میخواهند DNA را به RNA ترجمه کنند. ترانسکریپتاز معکوس نام خود را از این فرآیند گرفته است. آزمایش توزیع MRNA poly-A ساخته شده توسط Yaohai. این ابزار غیرقابل انکار در سراسر علوم مفید است - از مطالعه مولکولهای RNA در داخل سلولها تا تولید مولکولهای DNA مکمل برای آزمایشات بیشتر.
آزمایشات واقعی که در آن RNA یکی از ابزارهای مولکولی متداول است، همراه با محصول Yaohai تولید واکسن VLP در E. coli آزمایشهای کمی: این آزمایشها میتوانند مقدار هر مولکول خاصی را که در نمونه وجود دارد، نشان دهد. به عنوان مثال، دانشمندان میتوانند یک تهیهای از نسخههای ترانسکریپت RNA که از یک ژن هدف در داخل سلول به دست آمده است، به صورت in vitro تولید کنند. سپس، در صورتی که در حال جستجوی RNA باشند، میتوانند آزمایشی برای افزایش تعداد این نسخهها در یک نمونه انجام دهند، مانند واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR). این امکان را میدهد که دانشمندان ببینند ژنها چگونه در سلولها بیان میشوند و حتی میتواند به آزمایشهای بسیار بالا-سرعتی مثل تشخیص عفونت باکتریایی یا ویروسی و تشخیص بیماریهای ژنتیکی کمک کند.
پروتکل ترانسکریپت در محیط کنترل شده یکی از رهبران در زمینه خدمات CDMO برای بیولوژیکهای میکروبی است. تمرکز ما همواره بر واحدهای واکسنی و درمانی تولید شده توسط میکروارگانیسمها بوده است که مناسب برای مدیریت سلامت انسان، دامپزشکی و حیوانات خانگی هستند. ما بهترین پلتفرمهای تحقیق و توسعه و فناوری تولید را در اختیار داریم که شامل تمام فرآیند از ابتدا تا انتهاست: از توسعه نژادهای میکروبی و بانک سلولی، تا توسعه روشها و فرآیندها، و تا تولید بالینی و تجاری که اطمینان حاصل کردن راهحلهای نوآورانه را تضمین میکند. با گذر زمان، ما دانش فراوانی در زمینه پردازش بیولوژیک مبتنی بر میکروبها جمع آوری کردهایم. بیش از 200 پروژه با موفقیت به پایان رسیده است و ما مشتریان خود را در رعایت مقررات مانند آژانس FDA ایالات متحده و EMA اروپا کمک میکنیم. ما همچنین کمک آنها را در ناوبری از طریق MPA چین و TGA استرالیا فراهم میکنیم. تخصص حرفهای ما و تجربه گسترده ما ما را قادر میسازد تا به طور سریع به نیازهای بازار پاسخ دهیم و خدمات CDMO سفارشی ارائه دهیم.
یاوهای بیو-فارما تجربهای در تولید داروهاي زیستی که از پروتکل ترانسکریپت in vitro ساخته میشوند، دارد. ما راهحلهای سفارشی RD و تولید را ارائه میدهیم همزمان با اطمینان از اینکه هیچ خطری وجود ندارد. ما در حوزههای مختلفی مانند واکسنهای زیرواحدی بازسازی شده، هورمونهای پپتیدی، سیتوکاینها، عوامل رشد، آنتیبادیهای تکدامنه، انزیمها، DNA پلاسمید، MRNA و بسیاری دیگر فعالیت داشتهایم. ما در بسیاری از میکروارگانیسمها متخصص هستیم، شامل افرازات بیرونسلولی و درونسلولی قارچان (تا 15 گرم در لیتر) و همچنین باکتریهای درونسلولی محلول و بدنه شامل (تا 10 گرم در لیتر). ما همچنین یک پلتفرم فرآورش BSL-2 برای ایجاد واکسنهای باکتریایی ایجاد کردهایم. ما بهبود فرآیندها، افزایش عملکرد محصولات و کاهش هزینههای تولید را تمرکز کردهایم. با استفاده از یک تیم فناوری قوی، میتوانیم ارسال پروژه را به صورت سریع و قابل اعتماد تضمین کنیم که محصول شما را به بازار نزدیکتر میکند.
یاوهای بیو-فارما، یکی از ده تولیدکننده برتر محصولات زیستی است که در حوزه فرآوری میکروبی تخصص دارد. ما امکانات پژوهش و توسعه قوی و تجهیزات پیشرفتهای را در یک امکان مدرن ساختهایم. ما پنج خط تولید مواد دارویی داریم که به مقررات GMP برای فرآوری میکروبی و پاکسازی مطابقت دارند. همچنین دو خط پرکردن خودکار برای کارتراژها، شیشههای دارویی و سیریهای پیشپر شده نیز داریم. مقیاس فرآوری میکروبی که در دسترس است از پروتکل ترانسکریپت در محیط آزمایشگاهی تا 2000 لیتر میباشد. مشخصات پرکردن شیشههای دارویی از 1 میلیلیتر تا 25 میلیلیتر است. مشخصات پرکردن سیریهای پیشپر شده یا کارتراژها حدوداً از 1 تا 3 میلیلیتر است. امکان تولید ما که با cGMP مطابقت دارد، تأمین مداوم نمونههای بالینی و محصولات تجاری را تضمین میکند. کارخانه ما مولکولهای بزرگی تولید میکند که به سراسر جهان ارسال میشوند.
یائوهای بایو فارما یکی از ده شرکت برتر CDMO میکروبی است که از پروتکل ترانسکریپت درون زیستی و همچنین امور نظارتی استفاده میکند. ما یک سیستم مدیریت کیفیت داریم که با استانداردهای جدید GMP و همچنین مقررات جهانی هماهنگ است. تیم متخصصان نظارتی ما در چارچوبهای نظارتی جهانی آشنایی دارد تا راهاندازی محصولات زیستی را شتاب بدهد. ما اطمینان میدهیم که فرآیندهای تولید قابل رد و بدل باشد، محصولات کیفیتمند تولید شود و همچنین با قوانین FDA ایالات متحده و EMA اروپا مطابقت داشته باشد. TGA استرالیا و NMPA چین نیز رضایت یافتهاند. یائوهای بایو فارما با موفقیت از بازرسی محوطهای کارشناس مجاز (QP) اتحادیه اروپا برای سیستم کیفیت GMP و تسهیلات تولید خود عبور داده است. علاوه بر این، ما اولین ارزیابیهای گواهی سیستم مدیریت کیفیت ISO9001، سیستم مدیریت محیط زیست ISO14001 و سیستم مدیریت بهداشت و ایمنی شغلی ISO45001 را تأیید کردهایم.