در فرآیند آمادهسازی mRNA (IVT) در محیط بیرونی سلول، نیاز به DNA پلاسمید خطی به عنوان الگوی تراستیپتیون IVT با استفاده از پلیمراز RNA T7 وجود دارد. DNA پلاسمید با کیفیت بالا برای تراستیپتیون در محیط بیرونی سلول ضروری است.
بر اساس پلتفرم خدماتی آمادهسازی پلاسمید پیشرفته، شرکت Yaohai Bio-Pharma میتواند خدمات آمادهسازی DNA پلاسمید خطی با صافی و استاندارد بالا را برای تراستیپتیون IVT کارآمد ارائه دهد.
فرآیند | سرویس اختیاری | جزئیات خدمات | دوره تحویل (روز کاری) |
آمادهسازی پلاسمید دایرهای | 합성 ژن | 합성 ژن (سومین طرف) | ۷-۱۰ |
افزایش پلاسمید | افزایش پلاسمید | 2 | |
استخراج پلاسمید | |||
تهیه پلاسمید خطیسازی شده | خطیسازی و پاککردن پلاسمید | خطیسازی پلاسمید | 1 |
تصفیه دانهکار خطیسازی شده | |||
کنترل کیفیت DNA پلاسمید | Carthy گیتی | فوتومتر ماده Ultraviolet (UV) | ۱-۲ |
تصویربندی پلاسمید | الکتروفورز جل آگاروز (AGE) | ||
الکتروفورز کپیلری (CE)-اختیاری | |||
شناسایی پلاسمید | شناسایی انزیم محدودکننده / AGE |
انتخاب انعطاف پذیر روش های لینئاریزاسیون
بهینهسازی روشهای استخراج و تصفیه DNA برای دستیابی به نرخ بازیابی بالا.
معیارهای کنترل فرآیند سختگیرانه، با نرخ تراکم ابرپیچیده پلاسمیدها (برای مقاصد تحقیقاتی) بیش از 80%.
خدمات آمادهسازی و کنترل کیفیت پلاسمید با استاندارد بالا و کارایی بالا برای برآورده کردن نیازهای آزمایشگاهی.
با در نظر گرفتن محصول mRNA_luciferase کاتالوگ Yaohai Bio-Pharma به عنوان مثال، نمونه پلاسمید الگوی ترانسکریپت (سطح تحقیقاتی) نسبت خودپیچی بیش از 90% دارد، نسبت خطیسازی نزدیک به 100% و نسبت ترانسکریپت بعدی تا 1:200 (DNA پلاسمید خطیشده:mRNA).
MRNA_luciferase حاصل از آمادهسازی پلاسمید خطیشده به عنوان الگو، در سلولهای 293T منتقل میشود و فعالیت واکنش انزیم-زیستزای 24 ساعت پس از منتقل شدن ارزیابی میشود.
سیگنال فعالیت لوسیفراس قابل تشخیص است، یعنی پروتئین لوسیفراس به طور کارآمد بیان میشود، که نشان میدهد خلوص الیاف تراستیپتیو میتواند کاملاً نیازهای آمادهسازی mRNA با کیفیت بالا را برآورده کند.
آزمایش نسبت پلاسمید ابرپیچیده
اعتبارسنجی بیان mRNA لوسرfas در محیط درون زیستی