DNA پلاسمید، به عنوان در محیط بیرونی سلول الگوی تراجمه ژنتیکی (IVT)، یک مواد اولیه مهم برای تولید mRNA است. عملکرد بالا، خالصی بالا و بازیابی بالا DNA پلاسمید اصلیترین مسئله در طی توسعه فرآیند پلاسمید است. هدف در طی توسعه فرآیند پلاسمید.
YaoHai Bio-Pharma راهحل یکپارچهای برای توسعه پلاسمید ارائه میدهد، شامل فرآیندهای بالا دست (ферментاسیون)، پایین دست (خالص سازی) توسعه فرآیند، مشخص کردن فرآیند و اعتبارسنجی فرآیند. ما تجربه گسترده ای در بهبود عملکرد پلاسمید و جداسازی آن از ماتریسهای پیچیده با توسعه و بهینه سازی فرآیندهای فرمنتاسیون، خالص سازی و حذف ناخالصیها داریم.
فرآیند زیستی پایه برای تولید پلاسمید شامل موارد زیر است: اسچریشیا کلی (E. coli) فرمنتاسیون، جمع آوری سلول، لیز آلکالین، روشن سازی، غلظت بندی، فرآیند سه مرحله ای کرومتوگرافی (گرفتن، خالص سازی میانی، و پُلیشینگ)، و غلظت بندی.
جزئیات خدمات | عملیات واحد | پارامترها |
ای. کلی خميرابی |
شیک فلask | ترکیب محیط رشد، آنتی بیوتیک، حجم نمونه اولیه، دمای رشد و غیره. |
فرmentor (7 لیتر) |
آنتی بیوتیک، حجم نمونه اولیه، دمای رشد، pH، اکسیژن محلول (DO)، روش تغذیه (مانند فید-باتچ)، محیط تغذیه، زمان فرMENTATION و غیره. |
|
جمعآوری سلول | میکروفیلتراسیون | استاندارد ای. کلی فرآیند جمعآوری |
لیز سلولی | بازکردن مجدد سلول، لیز قلیایی، خنثیسازی | نسبت قلیا، زمان لیز |
پاکسازی | فیلتراسیون | فیلتراسیون اولیه، فیلتر با اندازه 20 میکرون و سپس 5 میکرون (ترجیحی) |
غلظت | فیلتراسیون ابر، فیلتراسیون جریان جانبی | اندازه شسته (یا NMWC)، فشار عبوری از ممبران (TMP)، فلوکس، نسبت حجم فیلترات به مساحت ممبران |
کروماتوگرافی سه مرحلهای | کروماتوگرافی جداکنندگی بر اساس اندازه (SEC) یا کروماتوگرافی فیلتراسیون ژل (GFC) | طول و قطر ستون، ترکیب بفر، حجم تزریق، ترکیب فاز موبایل (جذب و آزادسازی)، pH، نرخ جریان، شرایط تعادل، جداسازی، شستشو و الود. |
کروماتوگرافی افینیت (AF) | ||
کروماتوگرافی مبادله یون منفی (AEX) | ||
غلظت | فیلتراسیون ابر، فیلتراسیون جریان جانبی | اندازه شسته (یا NMWC)، فشار عبوری از ممبران (TMP)، فلوکس، نسبت حجم فیلترات به مساحت ممبران |
برای راهحلهای فرآیند تصفیه بیولوژیک بیشتر |