Keskse dogma kohaselt on messenger RNA (mRNA) sillaks geneetilise materjali ülekandmisel DNA-st valkudele.
mRNA mängib bioloogilist rolli, kodeerides valke in vivo, ja küps mRNA eukarüootsetes organismides koosneb viiest komponendist: 5' Cap (korgi struktuur), 5' UTR (mittekodeeriv piirkond), ORF (avatud lugemisraam), 3ʹ UTR. ja 3' polüA saba (polüadenülaadi saba).
Teenuste üksikasjad
| Protsess | Valikuline teenus | Teenuse üksikasjad | Tarneperiood (päev) |
| mRNA järjestuse kujundamine ja optimeerimine | Kodeerimisjärjestuste kavandamine ja optimeerimine | CDS-järjestuse joondamine CDS koodoni optimeerimine | 1 |
| Mittekodeerivate järjestuste kujundamine ja optimeerimine | 5' UTR järjestuse kujundamine ja optimeerimine 3' UTR järjestuse kujundamine ja optimeerimine polyA järjestuse kujundamine ja optimeerimine | 1-2 |
Kohandatavad valikud
| 5' UTR/3' UTR | - Looduse UTR järjestus
- Mutant/konstrueeritud UTR järjestus
|
| 3' PolyA Tail | - 100A ~ 120A saba (soovitatav)
- Segmenteeritud polüA saba
- Muu Kohandatud saba
|
mRNA järjestuse kujundamise ühised strateegiad
| mRNA komponendid | Bioloogilised funktsioonid | Optimeerimisstrateegiad |
| 5' Cap | Kaitske mRNA-d eksonukleaaside poolt põhjustatud lagunemise eest ja toimige koos 3'-otsas oleva polüA saba, polüA-d siduva valgu ja translatsiooni initsiatsioonifaktori valguga, et algatada valgu translatsioon. | Looduslik Cap1 struktuur väldib mustrituvastusretseptoreid ja vähendab seega loomulikku immuunvastust, mida on võimalik saavutada üheastmelise kaastranskriptsioonilise või kaheetapilise ensümaatilise piiramisega [üksikasju vt mRNA ensümaatiliselt ja kaastranskriptsioonilt]. |
| 5' UTR | 5' UTR saab ära tunda ribosoomide abil, reguleerida mRNA translatsiooni ja mõjutada mRNA stabiilsust. | Sisaldavad Kozaki jadasid ilma väga stabiilse sekundaarse struktuurita. In vitro transkriptsiooni (IVT) mRNA, nagu α-globiin ja β-globiin, jaoks eelistatakse kõrgelt ekspresseeritud geenide looduslikke UTR-e. |
| CDS | Valku kodeerivad piirkonnad ja antigeenide, antikehade või muude funktsionaalsete valkude kodeerivad järjestused. | Koodonite optimeerimine suurendab translatsiooni taset, märkides, et teatud mitteoptimaalsed koodonid võivad mängida rolli valgu voltimisel. |
| 3' UTR | Reguleerige mRNA translatsiooni ja stabiilsust. | IVT mRNA, nagu α-globiin ja β-globiin, puhul eelistatakse kõrge ekspressiooniga geenide looduslikke UTR-e. |
| 3' polüA saba | Reguleerige valgu ekspressiooni ja kaitske korgi struktuuri lagunemise eest. | Vajalik on piisav pikkus (100-150 bp); polüA saba kodeerimine transkriptsioonimatriitsi plasmiidil tagab täpsemalt määratletud polüA saba pikkuse. |
Meie funktsioonid
- Mitmekesine UTR-i allika valik
Mitmed tugevalt väljendunud looduslike ja modifitseeritud UTR-teekide allikad; küps UTR-i muutmisstrateegia;
- Tipptasemel CDS-i optimeerimise meeskond
Koodonite optimeerimise lõpuleviimiseks tehke koostööd professionaalse AI-algoritmi meeskonnaga.
Lisage polüA järjestused vastavalt DNA mallidele, et kontrollida mRNA pikkust täpsemalt.
- Mitmekesised optimeerimiskombinatsioonid
Saavutage madala immunogeensusega mRNA efektiivne ekspressioon.
Juhtumiuuring
Kahe reporter-mRNA järjestuse kujundamine: mCherry-eGFP mRNA
Yaohai Bio-Pharma mRNA teenust täiendatakse jätkuvalt topeltreportergeeni tandemjärjestuse kavandamise ja optimeerimisega, mis saavutab kahekordsete geenide koosekspressiooni.
Tavalist transfektsioonireagenti kasutades transfekteeritakse topeltgeeni tandemjärjestus mCherry-eGFP mRNA 293T rakkudesse ning mCherry (punane) ja võimendatud rohelise fluorestsentsvalgu (eGFP) kaks fluorestseeruvat signaali tuvastatakse samaaegse ekspressiooniga 48 tunni pärast ja virnastatud graafik on kollaselt esile tõstetud.
mCherry-eGFP mRNA ekspressioon 293T rakus
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
