Kohandatud saRNA süntees
Iseamplifitseeriv mRNA (saRNA), tuntud ka kui replikon-RNA, kodeerib in vitro transkriptsiooni (IVT) mRNA järjestusi ja viiruse replikaasi geene, mis on tuletatud alfa- või flaviviirustest. Viiruse replikaasi geenid võimaldavad mRNA iseamplifitseerimist, mille tulemuseks on suurenenud valgu ekspressioon ja minimaalne nõutav RNA annus võrreldes mitteamplifitseerivate mRNA-dega. Teine aspekt on see, et saRNA on suhteliselt suur molekul (rohkem kui 14 kb).
Yaohai Bio-Pharma on loonud mRNA sünteesitehnoloogiate komplekti, et pakkuda mitteamplifitseerivat mRNA-d ja iseamplifitseerivat mRNA-d (1000 nt ~ 14000 nt), nagu järjestuste kujundamine ja optimeerimine, IVT, puhastamine, lüofiliseerimine ja lipiidide nanoosakeste (LNP) kapseldamine. . Kõik tooted on välja antud rangete kvaliteedikontrolli standardite alusel.
Fig.1 Structural Features of IVT mRNAs: Conventional, Circular and Self-amplifying mRNA.
Sequence Features of Self-amplifying mRNA
The self-amplifying RNA comprises four non-structural proteins (designated as nsP1, nsP2, nsP3, and nsP4), which are derived from alphaviruses, Venezuelan equine encephalitis virus (VEEV). Among these, nsP1 exhibits dual enzymatic activities, namely GTase and N7MTase, whereas nsP2 possesses RTPase activity, pivotal for capping the IVT mRNA to generate Cap 0 structure. Additionally, nsP2 serves as a protease and helicase, facilitating the intricate processing of the entire nsP complex. The precise function of nsP3 remains elusive, yet it engages in interactions with diverse host cell proteins, thereby contributing to the attenuation of the antiviral response mounted by the host.
An alphavirus subgenomic promoter (SGP) region is located before the gene of interest (GOI). The SGP element facilitates the initiation of GOI transcription by bypassing the reading of the sequence encoding viral nsP proteins.
Fig.2 Synthesis and cell assays of eGFP saRNA of Yaohai Bio-Pharma RNASci Platform.
Custom Solutions of saRNA
SaRNA sünteesiprotokoll on sarnane mRNA-ga: Kohandatud mRNA süntees
- Järjestuse kujundamine
- Plasmiidi malli ettevalmistamine
- in vitro transkriptsioon (IVT)
- mRNA ensümaatiline piiramine
- mRNA kaastranskriptsiooni piiramine
- mRNA puhastamine
- mRNA lüofiliseerimine
- LNP kapseldus
- Analüüs ja testimine
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
