Kohandatud tsirkRNA süntees

IVT RNA

Tsirkulaarset mRNA-d (circRNA) on laialdaselt kasutatud geenide või valkude funktsioonide uurimisel. Vahepeal on see populaarne profülaktiliste ja terapeutiliste bioloogiliste ravimite väljatöötamisel, sarnaselt mRNA-ga.

Yaohai Bio-Pharma on loonud kvaliteetse RNA pakkumiseks tsirkRNA sünteesitehnoloogiate komplekti, nagu järjestuste kujundamine ja optimeerimine, in vitro transkriptsioon (IVT), tsirkulariseerimine/tsüklistamine, puhastamine ja lipiidide nanoosakeste (LNP) kapseldamine. Kõik tooted vabastatakse rangete kvaliteedikontrolli (QC) standardite alusel.

CircRNA rakendused

Võrreldes lineaarse mRNA-ga on tsirkulaarne RNA (circRNA) struktuurilt stabiilsem ja see on praegustes nukleiinhapete ravimite uuringutes peamine kuum koht. Sellel on lai valik rakendusi erinevates valdkondades, kas kodeeriva tsirRNA või mittekodeeriva tsirRNA-na, sealhulgas nakkushaiguste profülaktilised vaktsiinid, terapeutilised onkoloogilised vaktsiinid, terapeutilised onkoloogilised ravimid, valgu asendusravi, regeneratiivne meditsiin, raku- ja geeniteraapia (CGT) , molekulaarse käsna roll ja RNA aptameer.

Teenuse üksikasjad

Protsess	Valikuline teenus	Teenuse üksikasjad	Tarneaeg (päev)
circRNA järjestuse kujundamine ja optimeerimine	Kodeerimisjärjestuste kavandamine ja optimeerimine	CDS-i koodoni optimeerimine	1
circRNA järjestuse kujundamine ja optimeerimine	Mittekodeerivate järjestuste kujundamine ja optimeerimine	Introni ja eksoni järjestus, homoloogse käe ja vahetüki projekteerimine ja optimeerimine	1-2
Ringikujulise plasmiidi valmistamine	Geenide süntees	Geeni süntees (kolmanda osapoole)	7-10
	Plasmiidi võimendamine	Plasmiidi võimendamine	2
	Plasmiidi võimendamine	Plasmiidi ekstraheerimine	2
Lineariseeritud plasmiidi valmistamine	Plasmiidi lineariseerimine ja puhastamine	Plasmiidi lineariseerimine	1
Lineariseeritud plasmiidi valmistamine	Plasmiidi lineariseerimine ja puhastamine	Lineariseerimine DNA puhastamine	1
In vitro transkriptsioon ja tsüklistamine	In vitro transkriptsioon ja tsüklistamine	In vitro transkriptsiooni- ja tsüklistamisreaktsioonid	1-2
	In vitro transkriptsioon ja tsüklistamine	RNaasi R seedimine	1-2
	Optimeerimine - valikuline	Reaktsiooni koostis, aja optimeerimine	2-5
tsirkRNA puhastamine	Tavaline puhastusmeetod	Liitiumkloriidi sade	1
	Tavaline puhastusmeetod	Magnethelmeste puhastamine	1
	Väga puhas tsirkRNA puhastamine	Ettevalmistav kõrgjõudlusega vedelikkromatograafia (HPLC)	1-2
	Puhvrivahetus	Ultrafiltratsioon	1
tsirkRNA lüofiliseerimine	Proovi täitmine	Täitmine	2-3
	Lüofiliseerimine	Eelkülmutamine
		Esmane kuivatamine (sublimatsioon)
		Sekundaarne kuivatamine (desorptsioon)
tsircRNA-LNP kapseldamine	LNP kapseldus	Materjalide ja vedelike eeltöötlus	2
	LNP kapseldus	Mikrofluidse seadme segamine	2
	Puhvrivahetus	Tangentsiaalse voolu filtreerimine	1
	Steriliseerige	Filtreerimine	1
Plasmiidse DNA kvaliteedikontroll	Kontsentratsioon/puhtus	Ultraviolett (UV) spektrofotomeetria	1-2
	Plasmiidi konformatsioon	Agaroosgeeli elektroforees (AGE)
	Plasmiidi konformatsioon	Kapillaarelektroforees (CE) – valikuline
	Plasmiid tuvastada	Restriktsiooniensüümide identifitseerimine/vanus
CircRNA kvaliteedikontroll	Kontsentratsioon/puhtus	Ultraviolett (UV) spektrofotomeetria	-
	Puhtus	Agaroosgeeli elektroforees (AGE)/E-geel	0.5
	Puhtus	HPLC-valikuline	1
CircRNA-LNP kvaliteedikontroll	Kapseldamise efektiivsus	RiboGreeni meetod	1
	Osakese suurus	Dünaamiline valguse hajumine (DLS)	1
	Polüdisperssuse indeks	Dünaamiline valguse hajumine (DLS)	1
	Zeta potentsiaal	Dünaamiline valguse hajumine (DLS)	1
Rakupõhine potentsianalüüs	Rakkude transfektsioon	Rakkude plaadistamine, rakkude transfektsioon	4
Rakupõhine potentsianalüüs	Sihtvalgu tuvastamine	Fluorestsentsvaatlus, Western Blot/ELISA	1-3

Juhtumiuuring

Transfekteerisime täiustatud rohelise fluorestseeruva valgu tsirRNA (eGFP tsirRNA), mCherry circRNA, lutsiferaasi tsirRNA 293T rakkudesse ja tuvastasime sihtvalgu fluorestsentsi, luminestsents- või värvisignaali, Western blot (WB), ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi (ELISA) abil.

Yaohai Bio-Pharma tsirkRNA proovide rakupõhised tugevusanalüüsid

kõik kategooriad

Kohandatud tsirkRNA süntees

IVT RNA

Kataloogitoode

mRNA toodete kataloog

Kataloog saRNA tooted

Kataloog circRNA tooted

Kohandatud RNA süntees

Kohandatud mRNA süntees

Kohandatud saRNA süntees

Kohandatud tsirkRNA süntees

mRNA CDMO

E. coli rakupangandus

mRNA plasmiidi arendamine

mRNA protsessi arendamine

LNP formulatsiooni arendamine

GMP mRNA tootmine

Aseptiline täitmine ja viimistlus

mRNA analüüs ja testimine

mRNA analüüsi meetodi väljatöötamine

mRNA testimine

Rakupõhised tugevusanalüüsid