kõik kategooriad
ENEN
Kohandatud tsirkRNA süntees

Kohandatud tsirkRNA süntees

Avaleht >  IVT RNA  >  Kohandatud RNA süntees  >  Kohandatud tsirkRNA süntees

IVT RNA

Kohandatud tsirkRNA süntees

Tsirkulaarset mRNA-d (circRNA) on laialdaselt kasutatud geenide või valkude funktsioonide uurimisel. Vahepeal on see populaarne profülaktiliste ja terapeutiliste bioloogiliste ravimite väljatöötamisel, sarnaselt mRNA-ga.

Yaohai Bio-Pharma on loonud kvaliteetse RNA pakkumiseks tsirkRNA sünteesitehnoloogiate komplekti, nagu järjestuste kujundamine ja optimeerimine, in vitro transkriptsioon (IVT), tsirkulariseerimine/tsüklistamine, puhastamine ja lipiidide nanoosakeste (LNP) kapseldamine. Kõik tooted vabastatakse rangete kvaliteedikontrolli (QC) standardite alusel.

CircRNA rakendused

Võrreldes lineaarse mRNA-ga on tsirkulaarne RNA (circRNA) struktuurilt stabiilsem ja see on praegustes nukleiinhapete ravimite uuringutes peamine kuum koht. Sellel on lai valik rakendusi erinevates valdkondades, kas kodeeriva tsirRNA või mittekodeeriva tsirRNA-na, sealhulgas nakkushaiguste profülaktilised vaktsiinid, terapeutilised onkoloogilised vaktsiinid, terapeutilised onkoloogilised ravimid, valgu asendusravi, regeneratiivne meditsiin, raku- ja geeniteraapia (CGT) , molekulaarse käsna roll ja RNA aptameer.

Teenuse üksikasjad
Protsess Valikuline teenus Teenuse üksikasjad Tarneaeg (päev)
circRNA järjestuse kujundamine ja optimeerimine Kodeerimisjärjestuste kavandamine ja optimeerimine CDS-i koodoni optimeerimine 1
Mittekodeerivate järjestuste kujundamine ja optimeerimine Introni ja eksoni järjestus, homoloogse käe ja vahetüki projekteerimine ja optimeerimine 1-2
Ringikujulise plasmiidi valmistamine Geenide süntees Geeni süntees (kolmanda osapoole) 7-10
Plasmiidi võimendamine Plasmiidi võimendamine 2
Plasmiidi ekstraheerimine
Lineariseeritud plasmiidi valmistamine Plasmiidi lineariseerimine ja puhastamine Plasmiidi lineariseerimine 1
Lineariseerimine DNA puhastamine
In vitro transkriptsioon ja tsüklistamine In vitro transkriptsioon ja tsüklistamine In vitro transkriptsiooni- ja tsüklistamisreaktsioonid 1-2
RNaasi R seedimine
Optimeerimine - valikuline Reaktsiooni koostis, aja optimeerimine 2-5
tsirkRNA puhastamine Tavaline puhastusmeetod Liitiumkloriidi sade 1
Magnethelmeste puhastamine 1
Väga puhas tsirkRNA puhastamine Ettevalmistav kõrgjõudlusega vedelikkromatograafia (HPLC) 1-2
Puhvrivahetus Ultrafiltratsioon 1
tsirkRNA lüofiliseerimine Proovi täitmine Täitmine 2-3
Lüofiliseerimine Eelkülmutamine
Esmane kuivatamine (sublimatsioon)
Sekundaarne kuivatamine (desorptsioon)
tsircRNA-LNP kapseldamine LNP kapseldus Materjalide ja vedelike eeltöötlus 2
Mikrofluidse seadme segamine
Puhvrivahetus Tangentsiaalse voolu filtreerimine 1
Steriliseerige Filtreerimine
Plasmiidse DNA kvaliteedikontroll Kontsentratsioon/puhtus Ultraviolett (UV) spektrofotomeetria 1-2
Plasmiidi konformatsioon Agaroosgeeli elektroforees (AGE)
Kapillaarelektroforees (CE) – valikuline
Plasmiid tuvastada Restriktsiooniensüümide identifitseerimine/vanus
CircRNA kvaliteedikontroll Kontsentratsioon/puhtus Ultraviolett (UV) spektrofotomeetria -
Puhtus Agaroosgeeli elektroforees (AGE)/E-geel 0.5
HPLC-valikuline 1
CircRNA-LNP kvaliteedikontroll Kapseldamise efektiivsus RiboGreeni meetod 1
Osakese suurus Dünaamiline valguse hajumine (DLS) 1
Polüdisperssuse indeks Dünaamiline valguse hajumine (DLS) 1
Zeta potentsiaal Dünaamiline valguse hajumine (DLS) 1
Rakupõhine potentsianalüüs Rakkude transfektsioon Rakkude plaadistamine, rakkude transfektsioon 4
Sihtvalgu tuvastamine Fluorestsentsvaatlus, Western Blot/ELISA 1-3
Juhtumiuuring

Transfekteerisime täiustatud rohelise fluorestseeruva valgu tsirRNA (eGFP tsirRNA), mCherry circRNA, lutsiferaasi tsirRNA 293T rakkudesse ja tuvastasime sihtvalgu fluorestsentsi, luminestsents- või värvisignaali, Western blot (WB), ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi (ELISA) abil.

Yaohai Bio-Pharma tsirkRNA proovide rakupõhised tugevusanalüüsid

Hangi tasuta tsitaat

Võta ühendust