CircRNA ettevalmistamiseks on vajalik lineaarne RNA kui tsükkelprotsessi eelneva materjali (RNA prekursor) allikas, kus RNA prekursor ettevalmistatakse tavaliselt lineariseeritud plasmid-DNA abil transkriptsioonimalli jaoks ning selle transkribeerimine in vitro T7 RNA polümeerasese abil.
Kvaliteetne plasmidne DNA on oluline in vitro transkriptsiooni (IVT) jaoks. Suurepärase plasmidi ettevalmistamise teenuse platvormi põhjal võib Yaohai Bio-Pharma pakkuda kõrge puhtusega ja standardset lineariseeritud plasmid-DNA (pDNA) ettevalmistamise teenust, et tagada IVT-toodete täielikkus.
Teenuste üksikasjad
| Protsess |
Valikuline teenus |
Teenuste üksikasjad |
Toimetamisaeg (tööpäev) |
| Ringplasimidito ettevalmistamine |
Geeni süntees |
Geeni süntees (kolmandate poolte poolt) |
7-10 |
| Plasmidi amplifitseerimine |
Plasmidi amplifitseerimine |
2 |
| Plasmidi ekstraktioon |
| Lineaarse plasmidi ettevalmistamine |
Plasmidi lineaarne tegemine ja puhastamine |
Plasmidi lineaarneks tegemine |
1 |
| DNA lineaarsete osade puhastamine |
| Plasmidilise DNA kvaliteedikontroll |
Konsoentratsiooni puhtus |
Ultraviolet (UV) spektroofotomeetria |
1-2 |
| Plasmidikonformatsioon |
Agaarosegelei elektroforees (AGE) |
| Kapillaareelektrofoorees (CE)-valikuline |
| Plasmidi identifitseerimine |
Piiranguenzümi identifitseerimine / AGE |
Meie omadused
Linariseerimismeetodite paindlik valik
DNA ekstraktimise ja puhastamismeetodite optimeerimine, et saavutada kõrge taastamisnäitaja.
Tuginedes rangemate protsessi juhtimisnormidele, on plasmidmustrite superheliksonliku konformatsiooni määr uuringuteks üle 80%.
Kõrge standard ja tõhus plasmidi ettevalmistamine ning kvaliteedikontrolliteenused, mis rahuldavad eksperimentaalseid vajadusi.
Praktikunne
Võttes Yaohai Bio-Pharma toote mCherry circRNA näiteks, on transkriptsiooniplasmidmustrite (uuringunivaartus) superkoolitud suhe üle 70%, linearendusaste läheneb 100%le.
mCherry circRNA ettevalmistatakse lineaarset plasmidi kui mallina ja transfekteeritakse see 293T-seletesse. Pärast 24-tunnist transfektsioonist tuvastatakse tugev fluoresentsaus (punane fluoresentsus), mis tugevdub 48 tunni pärast ning mida võib endiselt tuvastada 7. ja 14. päeval pärast transfektsiooni.
mCherry protsein on stabiilselt ja tõhusalt väljendatud, ja transkriptsioonimallide puhtus vastab kvaliteetsete circRNA ravimistoote (DP) nõuetele.
MCherry circRNA in vitro väljenduse valideerimine
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
