Inkapsuleerimise aluseks on tarne süsteemi kujundamine ja arendamine. Korralikult kujundatud tarne süsteem võimaldab circRNA molekulidele keha sisse minemist ilma RNA enzyymi poolt halvimata muutumiseta ning neid siis tõhusalt sihtkohta toimetada, rippuda rakumembrani üle ja sisemuses vabastada.
Lipidsete nanaopartikliteid (LNPs) on parim saadaval olev toimetamissüsteem, mis pakub eeliseid teiste toimetamissüsteemidega võrreldes kapsleerimisel, in vivo väljenduses ja in vivo turvalisusel. Nukleiinhapete LNPs-dega on kõvasti selleks, et neid oleks lihtne lasta rakudesse ja vormida seal sisemised kehad. Pärast sisenemist rakku protondib hüdroksüsteemine keskkond sisemist keha ja laeb ioniseeritud lipiidile positiivse laengu, mis omakorda sulgub sisemise keha sisemise membraaniga ning vabastab sihtmärgi nukleiinhape rakkudeks tegevuseks.
Yaohai Bio-Pharma circRNA teenus jätka paranduste tegemist ja võib pakkuda circRNA-LNP kapsleerimisteenust, et optimeerida seotud olulisi protsessiparameetreid ning parandada circRNA ravimite tootmise ühtset ja taaskorduvust.
Protsess | Teenuste üksikasjad | Toimetamisperiood (päev) | Toodetavad tulemused |
circRNA-LNP enkapsuleerimine | Materjalide ja vedelike eeltoitlus | 2 | circRNA-LNP ravimistoode (DP) |
Mikrofluusi seadme segamine | |||
Tangentsiaalne Voolufiltratsioon | 1 | ||
Steriliseeriv filtratsioon | |||
circRNA-LNP kvaliteedi kontroll | Enkapsuleerimise tõhusus | 1 | Testiaruandlus |
Osariigid ja polüdispersiivsusindeks | |||
Zeta-potentiaal |
Kiire süntees, kõrge R&D tõhusus ja eeloptimeeritud lahendused;
Enkapsuleerimise suhe võib jõuda üle 90%;
Lipiidsete nanoparticulite suurus saab kontrollida vedeliku sissetoomise kiiruse ja suhtega muutmisel;
circRNA-LNP tooted on valideeritud in vitro rakude väljendamisega ja neid võib kasutada eesmärgi proteiini tõhusa väljendamiseks.
LNP-eGFP circRNA näidisd ajad valmistatakse ette ja nende erinevaid doosi (1ug, 2ug ja 4ug) tõmbatakse otse 293T rakkudesse, et kontrollida, kas need võivad väljendada eesmärgiproteiini. Tõmbamise 48 tunni pärast võib näha selget fluoresentsia signaali ning fluoresentsia intensiivsusel on doos-kaasnev efekt.
Lipo-circ_eGFP, mis koosneb liposoomist ja mittepakendatud eGFP circRNA-st, kasutatakse kontrollina.