Kohandatud saRNA süntees
Itselisutav mRNA (saRNA), mida teistsugult nimetatakse ka replikonRNA-diks, kodeerib in vitro transkriptsiooni (IVT) mRNA-seinadega ning viirusest pärit replekaasijategenaadiga, mis tulenevad alphaviirusedest või flaviviirustest. Replekaasijategenaad võivad tekitada mRNA-itselfeermängu, mis tuleb kaasa suuremat proteiini väljendamist ning vähem RNA tarbitud kogust võrreldes mitte-lisuvate mRNA-dega. Lisaks on saRNA suur molekul (rohkem kui 14 kb).
Yaohai Bio-Pharma on loonud mRNA sünteesi tehnoloogia komplekti, et pakkuda mittetaksevat mRNA-d ja iseennast taksevat mRNA-d (1000 nt~14000 nt), nagu järjestuse disain ja optimeerimine, IVT, puhastamine, liivamine ja lipidnanopartikli (LNP) pakendamine. Kõik tooted väljastatakse rangete kvaliteedikontrollistandardite alusel.
Joonestik 1. Struktuuriomadused IVT mRNAdes: traditsiooniline, ringne ja iseennast taksev mRNA.
Iseennast takseva mRNA järjestuse omadused
Itsehõljutav RNA koosneb neljast mittestruktuurilisest protеiinist (milleks on määratud nsP1, nsP2, nsP3 ja nsP4), mis tuletatakse alphaviirusest, Venezuela hipposenfaliitviirusest (VEEV). Neist nsP1 näitab kahte enzyymilist tegevust, nimelt GTase ja N7MTase, samas kui nsP2 omab RTPase-tegevust, mis on oluline IVT mRNA kappimiseks Cap 0 struktuuri loomiseks. Lisaks toimib nsP2 proteaasina ja helikaasina, aidates täieliku nsP kompleksi keeruka töötlemist. nsP3 täpne funktsioon jääb endiselt salajaseks, kuid see osaleb erinevate hositi kehaaine-proteiinidega interaktsioonides, mida võib kaaluda hositi poolt esitatava antiviiruse vasturessponsi vähendamise panuseks.
Alphaviiruse subgenoomiline promotor (SGP) asub huviprotsendi (GOI) ees. SGP-element võimaldab GOI transkriptsiooni algust, vahele jättes seeriate lugemist, mis kodeerivad viiruse mittestruktuurilisi nsP-proteiine.
Kuju 2. eGFP saRNA süntees ja rakusidemed Yaohai Bio-Pharma RNASci platvormil.
Kohandatud lahendused saRNA jaoks
SaRNA sünteesiprotokoll on sarnane mRNA-ga: Kohandatud mRNA süntees
- Järgkordse disain
- Plasmidimallide ettevalmistamine
- in vitro transkriptsioon (IVT)
- mRNA enzyymiline kappimine
- mRNA koos-transkriptsiooni kappimine
- mRNA puhastamine
- mRNA lüöfiliseerimine
- LNP enkapsuleerimine
- Analüüs ja testimine
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
