Určení molekulární hmotnosti pomocí LC-MS
Intaktní molekulární hmotnost je považována za důležitou charakteristiku biologických léků. Analýza intaktní molekulární hmotnosti se používá k prokázání produkty proteinů/peptidů a ověření biologických léků. Měření molekulární hmotnosti je požadavkem regulačních směrnic.
Yaohai Bio-Pharma nabízí analýzu intaktní molekulární hmotnosti v přirozeném, redukovaném a N-odškvařeném stavu. Používáme kapalnou chromatografii - massové spektrometrii (LC-MS) k určení intaktní molekulární hmotnosti.
Regulační požadavky na molekulární hmotnost
V ICH Q6 se doporučuje: „molekulární hmotnost (nebo velikost) je určena pomocí separace podle velikosti pomocí chromatografie, SDS-polyakrylamidové gelové elektroforeze (v redukovaném a ne-redukovaném stavu), massové spektrometrie (MS) a dalších vhodných technik“.
Analytické metody
| Analýza |
Metody |
| Molekulová hmotnost |
LC-MS / Kapalná chromatografie/Elektrosprayová hmotnostní spektrometrie (LC/ES-MS) pro přirozené, redukované, N-deglykosylové proteiny nebo subunity |
Analytické postupy
Celková molekulová hmotnost:
- Provádění LC-MS na původním vzorku v přirozeném stavu.
- Analýza dat z LC-MS.
Redukovaná molekulová hmotnost:
- Zpracování proteinového vzorku vhodným redukčním činidlem;
- Provádění LC-MS na redukovaném proteinu;
- Analýza dat z LC-MS.
N-deglykosylovaná molekulová hmotnost:
- Odstranění N-glykanů pomocí vhodného enzymu;
- Provádění LC-MS na N-deglykosylovaném proteinu;
- Analýza dat z LC-MS.
Redukovaná a N-deglykosylovaná molekulová hmotnost:
- Zpracování proteinového vzorku vhodným redukčním činidlem;
- Odstranění N-glykanů pomocí vhodného enzymu;
- Provádění LC-MS na redukovaném a N-deglykosylovaném proteinu;
- Analýza dat z LC-MS.
Molekulová hmotnost proteinového subunitu:
- Rozštěpování subunitu
- Provádění LC-MS na proteinovém subunitu
- Analýza dat LC-MS
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
