N-glykosilasieplaasbesetting is 'n fisiologiese kenmerk van glykoproteïene en produseer hoofsaaklik N-glykan. Yaohai Bio-Pharma se diens vir N-glykosilasieplaasbesettingsanalise word uitgevoer deur vertiering, vrylating, verrikking en analise met Vloeistofkromatografie-Elektrospreiioniseringmassaspectrometrie-Massaspectrometrie (LC-ESI-MS/MS).
Ons het betrokke gewees by die Proteïenstruktur Karakterisering van verskeie groot molekulêre stowwe, insluitend Rekombinante Subeenheid Vakseen, Nanoliggame/VHHs/En-domein Antibodies (sdAbs), Antibode Fragment, Hormone/Peptide, Sitokine, Groei Faktore (GF), Ensimme, Kollagene, ens.
Reguleringsvereistes vir N-glykosilasieplaasbesetting
Volgens die ICH Q6B riglyne, ‘vir glykoproteïene word die koolhydraatinhoud (neutrale suikers, aminosuikers en sialiese suur) bepaal. Verder word die struktuur van die koolhydraatkette, die oligosakharidepatroon (antennaprofiel), en die glikosileringsteeë van die polipeptiidketting sover moontlik geanaliseer.’
Analitiese Metode
| Analise |
Metodes |
| N-glykosilasieplek Besetting |
LC-MS ná deglikosilase- en proteaasvertegting |
Prosedures
1. Proteïenvertegting van proteïene om klein peptiïenfragment te genereer.
2. Vrylating van N-glikane deur endoglikosidase H of PNGase F. Endoglikosidase H breek die band tussen die twee GlcNAc-residus in die kern van N-verbonde glikane, terwyl PNGase F 'n glykoamidas is wat die band tussen GlcNAc en Asn breek, waardeur die hele suikerketting vrykom en Asn in Asp verander met 'n massa-toename van 1-Da.
3. Enriksing van N-glikopeptiede via HILIC (Hydrofiel Interaksie Vloeistofkromatografie)
4. Analise van N-verbonde glikosileringsteeë gebruikmakend van LC-ESI-MS/MS.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
