Die Betekenis van Voorproses Ontwikkeling
Voorproses (USP), ook bekend as die fermantasieproses, is een van die beginfases van voor-bioproessering. Die mikrobiële fermantasieproses is krities vir hoë-digtheid selkultuur en eksogene genuitdrukking, wat direk die opbrengs en koste van biologiese produkte beïnvloed.
In die vroeë fases van biologiese ontwikkeling (voor-klinies of fase 1/2) is die fokus om skaalbaar dier-vry prosesse te ontwikkel met gemiddelde opbrengs en om al die produk-kwaliteitstandaarde te voldoen.
Teryn in die laat stadium (fase 3 of kommersieel), sal ons fokus op opbrengs, robuustheid, skaalbaarheid en reproduseerbaarheid, 'n koste-effektiewe proses te genereer. Die aktiwiteite wat hierdie kwessies aanspreek, is proses karakterisering en proses validasie studies. Tussenwyls word kwaliteit deur ontwerp (QbD) en ontwerp van eksperimente (DoE) gereedskapies tipies toegepas.
Sleutelwoorde: prosesontwikkeling, optimalisering en validasie, fermentasieproses, mikrobiële sel fermentasie, bakteriële fermentasie, gist fermentasie, hoë-digtheid fermentasie, ingenieursgemaakte stres fermantasie
Toepassing: Bioweglike industrie, menslike geneesmiddels, dieregeneesmiddels, vakseen, rekombinante grootmolekulêre biologiese, rekombinante biologiese, biologiese reagensies
USP Oplossings van Yaohai Bio-Pharma
Deur baat te haal uit meer as 10 jaar mikrobiële fermentasie-ervaring, het Yaohai Bio-Pharma die kundigheid om te help met die oplosing van fermentasieproses uitdagings. Ons kan vinnig hoë-digtheid fermentasie-strategieë vestig vir Escherichia coli (E. coli) periplasmatiese sekresie, intracellulêre oplosbare of inklusie liggaam uitdrukking, en Yeast buite- of intracellulêre uitdrukking.
Ons beskikbare algemene fermersontwikkelingsdiens in sluit:
- Fermentasieprosesontwerp wat by 'n klein skaal van 7L in voedingsmodus plaasvind
- Drielingse prosesvalidering in 7L fermentators
- 'n Tussenliggende prosesvergrooting na 30L/70L
Ons kan veelsydig meerparametersoptimering uitvoer om die gewenste opbrengs of verhouding te bereik, deur One-Time-A-Factor (OTAF) of Design-of-experiments (DoE) te gebruik.
Sleutelfermentasieparameters word soos volg gelys:
Dierevrye fermentasie mediumsamestelling
Antibiotika-vry of nie, Inokulumvolume
Groei temperatuur, pH, Opgeloste suurstof (DO) vlak
Voeringsmodus (bv., fed-batch)
Konsentrasie van induser (bv., IPTG, metanol), Induseringpunt (selweegmasse/VOD600),
Induseringstemperatuur, Induseringtyd
ens.
Diensbesonderhede
| Diens |
Prosesvloei |
| Kweek in Skeeflas (500 mL) |
Dierevry medium voorbereiding → Kweek van mikrobiële saad → Kweek in skaker → Indusering → Oes |
| Kweek in Fermenter (7 L) |
Dierevry medium voorbereiding → Kweek van mikrobiële saad → Hoë-digste selfermentasie in 7L bioreaktor → Indusering → Oes |
| Kwaliteitbeheer van Proteïne/Peptide |
Voorbehandeling Intracellulêre oplosbare uitdrukking: Mikrobiele selle oes en hersuspensie → Ultrasone verpulvering → Selle residu verwijdering → Raa uittrekking Inklusiekorpuskie-uitdrukking: Mikrobiele selle oes en hersuspensie → Inklusiekorpuskie voorbereiding → Ultrasone verpulvering → Raa uittrekking Extracellulêre oplosbare uitdrukking: Kultuur supranatant versameling → Konsepsie en bufferruitingswisseling → Raa uittrekking Kwaliteitsanalise Raa uittrekking as monster → Doelwit proteïen analise deur middel van SDS PAGE of Western bloeiring (WB) |
| Kwaliteitstoets van Plasmids |
Voorbehandeling en Kwaliteitsanalise Plasmid ekstraksie → DNA analise deur middel van agarose gelfelektroforesis |
Gevallestudie
Ons word deur ons kliënt toevertrou om die opbrengst van die doelwit polipeïen hormoon van 8 g/L na 10 g/L te verhoog.
Gebaseer op die Volle Faktoriale Ontwerp en Respons Oppervlak Ontwerp in die DoE-gereedskap, het ons vinnig die sleutelfermentasieparameters herken en geoptimeer. Onder die geoptimeerde hoë-seltettheid fermentasieproses het die uitdrukkingsvlak toegeneem tot 10 g/L.
Ons ervaring
- Ons het gewerk met verskeie tipes mikrobiële gasheerspesies, bv., E.Coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink streek1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) en Hansenula polymorpha (H. polymorpha) .
- Ons is vertrou met E. coli periplastiese sekresie, oplosbare en inklusie-liggaam uitdrukking, asook Yeast intracellulaire of ekstracellulaire uitdrukking. Die opbrengs van die inklusie-liggaam is tot 10g/L, terwyl die oplosbare proteïen-opbrengs varieer van 0,5 tot 15g/L.
- Ons het betrokke gewees by die ontwikkeling en vervaardiging van verskeie groot molekulêre stowwe, insluitend rekombinante subeenheidvaksine, virus-gergelike deeltjies (VLPs), hormone (insulien, GLP-1, groeihormoon), sitokine (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), groeifaktore (EGF, FGF, NGF), nanoliggame/ enkeldomeinliggame (sdAbs), ensieme, ens.
- Toerusting
7L*16 Fermentasie-stelsel
Cedex Bio-analiseerder, Bioprozes-analiseerder
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
