Die betekenis van spanningsifting
Sifting van geskikte gashere is nodig vir biologiese CMC-ontwikkeling, wat die kwaliteit en konsekwentheid van die produk en vervaardigingsproses bepaal. Die direkte doelwit van gasheersifting is om 'n kandidaat primêre selbank (PCB) te voorsien, met hoë uitdrukkingsvlakke en hoë stabiliteit beide in terme van deurgangsstabiliteit en bergingsstabiliteit. Die keuring van geskikte gasheer is om twee hoofredes nodig:
- Eerstens, om die mikrobiese gasheer met 'n hoë uitdrukkingsvlak te selekteer. Daar is verskeie kommersieel beskikbare stamme, wat gebruik word om verskillende tipes proteïene uit te druk, soos toksiese proteïene, oplosbare proteïene of eukariotiese proteïene.
- Tweedens, om die gasheer met genetiese stabiliteit te skerm. Genetiese stabiliteitstoetsing is 'n sleutelpunt regdeur die produksielewensiklus. Daar word voorgestel dat hoë genetiese stabiliteit erken word as 'n ander sleutelkenmerk vir geskikte stam.
Sleutelwoorde: mikrobiese rasseleksie, mikrobiese stam sifting, hoë-deurset sifting van bakterieë of gis, hoë-produserende stam sifting, hoogs stabiele stam sifting, genetiese stabiele stam sifting Toepassing: menslike medisyne, diere medisyne, entstof, sintetiese biologie, rekombinante groot molekule biologiese middels, biologiese reagens
Stamsiftingdienste van Yaohai Bio-Pharma
Deur voordeel te trek uit meer as 10 jaar CDMO-ervaring in mikrobiese biologiese middels, ondersteun ons die ontwikkeling en vervaardiging van verskeie groot molekules, insluitend rekombinante subeenheid-entstowwe, virusagtige deeltjies (VLP), hormone (insulien, GLP-1, groeihormoon), sitokiene ( Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), groeifaktore (EGF, FGF, NGF), nanoliggame/enkeldomein-teenliggaampies (sdAbs), ensieme, ens.
Ons het ryk ervarings opgedoen in die seleksie van verskeie tipes plasmiedvektore, en mikrobiese gashere, insluitend bakterieë Escherichia coli (E. coli), en gis Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Ons kan die beste uitdrukkingstelsel vir u unieke biologiese middels vind.
Ons het verskeie mikrobiese gashere versamel met duidelike bronne en standaard CoA, insluitend E.coli uitdrukking en gisuitdrukking.
Diensbesonderhede
|
Dienste
|
Diensbesonderhede
|
Minimum tydlyn/dag
|
Aflewerbares
|
|
Stamkonstruksie (E. coli)
|
Plasmiedtransformasie (multi-gashere)
|
5
|
COA van kommersiële gashere Strain konstruksie verslag
|
|
PCR verifikasie
|
|
Stam suiwering
|
|
String preservering
|
|
Spankonstruksie (gis)
|
Voorbereiding van bekwame gisselle
|
10
|
|
Plasmied linearisering
|
|
Elektrotransformasie
|
|
Weerstand / Voedingstekort sifting
|
|
Stam suiwering
|
|
String preservering
|
|
Geskikte gasheervertoning
|
Plasmied of Genoom DNA ekstraksie
|
15-20
|
Gasheer siftingsprosesCOA van gemanipuleerde stamme
|
|
PCR-verifikasie, beperkingsensiemvertering
|
|
Teiken geenvolgordebepaling
|
|
Sifting van hoë-uitdrukking gashere
|
|
Sifting van gashere met genetiese stabiliteit
|
|
String preservering
|
Gevallestudie
’n Geskikte gasheer verbeter proteïenuitdrukkingsvlak met 2.5 keer.
Ons het die opdrag om hoë-produksie te ontwikkel E. coli druk. En ons het drie soorte kommersiële probeer E. coli gashere, gebaseer op die eienskappe van teikenproteïen. Daar word getoon dat die stam S1-1 en S1-2 (Fig A: Laan 1,2) proteïenvlak tot 3.5 keer verbeter het as die kliënt se aanvanklike stam (Fig A: Laan 3).
Boonop het die stam S1-1 hoë genetiese stabiliteit vertoon (Fig B), en dit is erken as kandidaat-stam vir primêre selbankwese (PCB).
Ons diensfunksies
Gedemonstreerde kundigheid met verskeie mikrobiese gashere, bv. E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink-stam 1/2/3/4; S.cerevisiae en H. polymorpha.
Ons is ervare met E. coli periplasmiese afskeiding, oplosbare en inklusiewe liggaamsuitdrukking, asook gis intrasellulêre of sekresie uitdrukking. Ons voeg geen antibiotika by nie of voeg die antibiotika by onder regulatoriese leiding.
Ons vestig 'n hoë deurset siftingsplatform om hoogproduserende en stabiele stamme van meer as honderd kandidaat-stamme te sift.
Daar word verseker dat die proses van spanningsingenieurswese en sifting naspeurbaar is, onder die Goeie Data- en Rekordbestuur.
AF
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
GEEN
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
MS
BE
MK
UR
BN
